Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) es un kit de PCR cuantitativa multiplex basado en ARN como plantilla. En el proceso del experimento, la transcripción inversa y la PCR cuantitativa se llevaron a cabo en el mismo tubo, lo que simplificó la operación experimental y redujo el riesgo de contaminación.

En este kit, la primera cadena de ADNc se sintetizó de manera eficiente mediante Hifair™ resistente al calor. Transcriptasa inversa y amplificada cuantitativamente por UNICON™ Polimerasa de ADN Taq HotStart. El kit contiene principalmente una solución tampón MP optimizada y una mezcla de enzimas. La solución tampón ya contiene Mg²⁺ y dNTP Mix. Además, se añaden los factores que pueden inhibir eficazmente la amplificación por PCR no específica y mejorar la eficiencia de amplificación de múltiples reacciones de qPCR, lo que puede garantizar la eficiencia de la amplificación y llevar a cabo hasta múltiples reacciones de amplificación. Se añadió el sistema dUTP/UDG para prevenir eficazmente el riesgo de contaminación por aerosoles.

Característica

Características

1. GRAMOBuena versatilidad: Es adecuado para la amplificación por qPCR y la detección de ácidos nucleicos de microorganismos patógenos, genomas humanos, plantas y otras especies..

2. Alta sensibilidad: El sistema de tampón cuidadosamente optimizado mejora la sensibilidad de detección de plantillas de baja concentración hasta 250 copias/ml..

3. Sistema dUP/UDG: Se introduce el sistema anticontaminación dUTP/UDG termolábil para degradar la contaminación por aerosoles de los productos de manera eficiente, reducir los falsos positivos y garantizar resultados auténticos..

4. ApoyoEn Programa rápido: Compatible con el programa rápido de 40 minutos.

5. Súper estabilidad: establemi a 37℃ durante 14 días, congelación y descongelación repetidas 10 veces.

Presupuesto

Componentes

Nota: 1) 5×Hifair™ MP Buffer es la abreviatura de Hifair™ Tampón de sonda RT-qPCR de un solo paso Multiplex Superior, que incluye dNTP, dUTP, Mg²⁺, estabilizadores y más.

2) Hifair™ Mezcla de enzimas contiene principalmente Hifair™ transcriptasa inversa, UNICON™ Polímeros de ADN HotStart Taq, Inhibidor de la ARNasa, y UDGase y así sucesivamente.

Almacenamiento

El producto debe conservarse a una temperatura de entre -25 °C y -15 °C durante 1 año. Se debe evitar la congelación y descongelación repetidas.

Instrucciones

1. Composición de la reacción:

Nota:Asegúrese de mezclar bien antes de usar, evite burbujas excesivas causadas por vibraciones violentas.

a) Concentración del cebador: Cebador mezcla que incluye primer multiplex, Dependiendo de la situación, la concentración óptima de cebador puede estar entre 0,1 y 1,0 μM.

b) Concentración de la sonda: Mezcla de sondas que incluye grupo fluorescente de diferencia de etiquetado de sonda multiplexada, dependiendo de la situación la concentración óptima de la sonda puede estar entre 0,05 y 0.5 micras.

do) Dilución de la plantilla: la PCR cuantitativa es muy sensible y se recomienda diluir la plantilla. El valor Ct del control es adecuado entre 20 y 35.

d) Preparación del sistema: quitar el cabezal del elemento filtrante. Evitar la contaminación cruzada y la contaminación por aerosoles.

2. Protocolo de ciclismo optimizado

(1) Procedimiento de amplificación estándar

Nota:

a) Transcripción inversa: La temperatura puede seleccionarse 50°C o 55°C durante 10-15 minutos.

b) Reacción de amplificación: La temperatura se ajusta según el valor de Tm de los cebadores diseñados.

c) Adquisición de señal de fluorescencia: configure el procedimiento experimental de acuerdo con los requisitos del instrumento manual.

(2) Programa de amplificación rápida

Nota:Si el detector qPCR real admite una amplificación rápida, realice una prueba previa para confirmarlo.

3. Equipo de aplicación

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Rápido, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 y 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；

Estratagema MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000 de Corbett；

Roche LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96 para ciencias aplicadas；

Termo Ciclador científico PikoReal; Cefeida Ciclador inteligente®; Ilumina PCR ecológica; SLAN 96S, 96P.

Notas

Utilice el EPP necesario, como bata de laboratorio y guantes, para garantizar su salud y seguridad.！

Utilice consumibles libres de ARNasa para El experimento.

Este producto es para investigación utilizar únicamente！