Descripción
MolPureMT. Kit magnético universal de ADN/ARN viral es adecuado para extraer ácido nucleico viral de muestras de sangre completa o fluidos corporales libres de células (como suero, plasma, líquido cefalorraquídeo, hisopo nasal/faríngeo, líquido de lavado alveolar, etc.). Este método adopta la tecnología de purificación de perlas magnéticas, sin extracción tóxica de fenol cloroformo, seguro, no tóxico y rápido. Los productos resultantes se pueden utilizar directamente para PCR, qPCR, secuenciación de segunda generación y otros experimentos. Con el instrumento de extracción automática del método de perlas magnéticas, se puede lograr la extracción de alto rendimiento de ácido nucleico.
Producto IInformación
Catalogar.No | 18521ES48/18521ES49/18521ES97 |
Tallas |
Componentes
Bacotado Versión
Número de componente | Nombre del componente | 18521ES48 | |
Parte I | 18521-A | Líquido de unión a lisis
| 33 ml/botella × 1 |
18521-B | Suspensión de perlas magnéticas
| 1.1 ml/vial×1 | |
18521-C | Solución de lavado A | 40 ml/botella × 1 | |
18521-D | Solución de lavado B | 80 ml/botella × 1 | |
18521-E | Solución de elución | 10 ml/botella × 1 | |
Parte Ⅱ | 18521-G | Proteasa K | 1.1 ml/vial×1 |
Preenvasado Versión
Categoría | Número de componente | Nombre del componente | 18521ES49 | 18521ES97 |
Parte Ⅰ | 18521-a | Placa de unión de lisis | 1 plato/caja | 1 plato/caja |
18521-b | Placa de lavado | 1 plato/caja | 1 plato/caja | |
18521-c | Lavado + Perlas Magnéticas Lámina Láminalámina | 1 plato/caja | 1 plato/caja | |
18521-d | Placa de lavado | 1 plato/caja | 1 plato/caja | |
18521-e | Placa de elución | 1 plato/caja | 1 plato/caja | |
18521-f | Juego de varillas magnéticas | 1 juego/caja | 1 juego/caja | |
Parte Ⅱ | 18521-G | Proteasa K | 1,1 ml/frasco × 1 | 1.1 ml/frasco × 2 |
Almacenamiento
Parte I: Conservar a temperatura ambiente, transportar a temperatura ambiente, con una vida útil de 1 año.
Parte II: Para el componente 18521-G (proteasa K), almacenar entre 2 y 8 °C y transportar a temperatura ambiente.
Notas
1.Los distintos tampones de este kit contienen sales de guanidinio. Por su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio.
y guantes desechables durante el funcionamiento. Manipular de acuerdo con las precauciones de seguridad estándar para evitar el contacto con la piel, los ojos y las membranas mucosas. En caso de contacto, enjuagar inmediatamente con abundante agua y buscar atención médica.
2.Si se produce precipitación en la solución, se debe calentar en un baño de agua a 30 °C hasta que el precipitado sea
completamente disuelto antes de usar.
3.Si la suspensión de perlas magnéticas está congelada, no la utilice.
4.Los distintos tampones de este kit contienen sales de guanidinio. No tratar con desinfectantes oxidantes como
como el hipoclorito de sodio, ya que puede liberar gases tóxicos. Deben manipularse como residuos médicos.
5.Durante la elución, pueden quedar partículas magnéticas residuales. Al aspirar muestras, trate de evitar inhalarlas.
Perlas magnéticas.
Instrucciones
1. Tipos de muestras aplicables: sangre completa, suero, plasma, líquido cefalorraquídeo, hisopos nasales/faríngeos,
líquido de lavado broncoalveolar y otras muestras.
2. Almacenamiento y transporte de muestras: Las muestras se pueden utilizar inmediatamente para realizar pruebas o almacenar a -70 °C o
Reducir el contenido para futuras pruebas con una vida útil de 6 meses. Evitar la congelación y descongelación repetidas. Las muestras deben transportarse utilizando logística de cadena de frío.
3. Requisitos de congelación y descongelación: congelación y descongelación rápidas para evitar ciclos repetidos.
Pasos de la operación
Se verificó la solución para detectar precipitaciones y si las perlas magnéticas podían resuspenderse antes de los experimentos.
Manual miextracción
1. Transfiera 200-300 μL de la muestra a un tubo de centrífuga de 1,5 mL, agregue 600 μL de líquido de unión de lisis,
20 μL de proteasa K y 20 μL de suspensión de perlas magnéticas. Luego, mezcle en un agitador vórtex durante 30 segundos a alta velocidad. Incube a 50 °C con agitación durante 5 a 7 minutos; si la incubadora no tiene función de agitación, agite en un agitador vórtex tres veces durante la incubación, cada vez durante 15 segundos.
2. Transfiera a un soporte magnético de 1,5 mL para separación magnética hasta que la solución esté clara y transparente, luego aspire y deseche la solución.
3. Agregue 700 μL de solución de lavado A, agite durante 10 segundos para dispersar las perlas magnéticas, luego transfiera al soporte magnético para la separación magnética hasta que la solución esté transparente y aspire y deseche la solución.
4. Agregue 700 μL de solución de lavado B, agite durante 10 segundos para dispersar las perlas magnéticas, luego transfiera al soporte magnético para la separación magnética hasta que la solución esté transparente y aspire y deseche la solución.
5. Repita el paso 4 con otros 700 μL de solución de lavado B.
6. Centrifugar brevemente para recoger las gotitas de la pared del tubo, transferir al soporte magnético hasta que quede transparente, aspirar y desechar el líquido residual. Secar al aire durante 3-5 minutos.
Nota: Los residuos de etanol pueden inhibir las reacciones enzimáticas posteriores, por lo que es necesario asegurarse de que el etanol se evapore por completo durante el secado. No secar durante demasiado tiempo para evitar afectar la elución posterior.
7. Añadir 50-100 μL de líquido de elución, agitar a alta velocidad durante 2-3 minutos para dispersar las perlas magnéticas. Incubar a 60 °C durante 5 minutos y luego agitar a alta velocidad durante 60 segundos.
8. Centrifugar brevemente para recoger las gotas de la tapa del tubo dentro del tubo, transferir al soporte magnético hasta que las perlas magnéticas estén completamente adsorbidas, luego transferir con cuidado el líquido a un nuevo tubo de centrífuga para obtener la solución de ácido nucleico.
9. La solución de ácido nucleico se puede almacenar a -20 °C a corto plazo o a -80 °C a largo plazo.
Automatizado miextracción
Yeasen Instrumento automático de extracción y purificación de ácidos nucleicos AP-96N (para conocer más tipos de instrumentos, comuníquese con el soporte técnico)
1. Antes del experimento, pre-envasar el Placa de orificios profundos con oscilación forzada varias veces para evitar residuos de líquido en la membrana de sellado. Se verificó la precipitación de la solución y si las perlas magnéticas podían resuspenderse.
2. Coloque cada placa de 96 pocillos en el instrumento de extracción de ácido nucleico en orden y coloque la funda de varilla magnética de 96 orificios profundos.
Posición 1: cortar la placa de unión
Posición 2: tabla de enjuague
Posición 3: lavado + placa de perlas magnéticas
Posición 4: placa de lavado
Posición 6: placa de elución
3. Agregue 200-300 µL de la muestra y 20 µL de proteasa K a los pocillos de la placa de unión de lisis.
4. Realice el siguiente procedimiento. Después del procedimiento, transfiera el eluido de la placa de elución a un nuevo tubo de centrífuga. La solución se puede colocar a -20 ℃ para un almacenamiento a corto plazo y a -80 ℃ para un almacenamiento a largo plazo.
Programa del instrumento de extracción de ácidos nucleicos del canal AP-96N
Spaso | Paso 1 | Paso 2 | Paso 3 | Paso 4 | Paso 5 | Paso 6 | Paso 7 |
Stación | 3 | 1 | 2 | 3 | 4 | 6 | 3 |
Tiempo de espera | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:01:00 | 00:00:00 |
M2 | M2 | M2 | M2 | M2 | M1 | M2 | |
00:00:30 | 00:05:00 | 00:01:00 | 00:00:30 | 00:00:30 | 00:05:00 | 00:00:30 | |
Pausa | denegar | denegar | denegar | denegar | denegar | denegar | denegar |
Tiempo magnético | 00:01:00 | 00:03:00 | 00:01:00 | 00:01:00 | 00:01:00 | 00:03:00 | 00:00:00 |
Volumen | 800 | 900 | 800 | 800 | 800 | 100 | 800 |
yotemperatura | -- | 50℃ | -- | -- | -- | 90℃ | -- |
| |||||||
Modo de mezcla | M 1 | El tiempo de mezcla fue de 10 s, con una velocidad de mezcla de 300.000 | |||||
Modo de mezcla | M2 | El tiempo de mezcla fue de 10 s, con una velocidad de mezcla de 200.000 |
Pago y seguridad
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Consulta
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Preguntas frecuentes
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