Descripción
La proteasa TEV recombinante (proteasa TEVr) es una proteasa recombinante modificada y purificada mediante ingeniería genética, que no solo mantiene la actividad funcional de la proteasa TEV natural, sino que también muestra una mayor estabilidad y especificidad en un amplio rango de temperaturas. La proteasa TEVr es una enzima que se utiliza comúnmente para cortar etiquetas de afinidad en proteínas de fusión. Es específica de la secuencia de siete aminoácidos EXXYXQ↓(G/S), y el sitio de corte está entre la glutamina y la glicina/serina. La secuencia de siete aminoácidos que se utiliza habitualmente es Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-La proteasa Gly. rTEV tiene una actividad óptima a pH 7,0, 30°C, pero es activo en un amplio rango de pH de 6,0 a 8,5 y temperaturas de 4 a 30°C (ver Tabla 1), lo que permite que la elección de las condiciones de reacción sea flexible dependiendo de la proteína objetivo. Además, el 6×Su etiqueta de N-terminal también se puede utilizar para eliminar la proteasa rTEV mediante resina Ni-NTA para purificar la proteína objetivo.
El producto ha sido optimizado sobre la base de 20403ES y, en comparación con 20403ES, tiene mayor pureza, actividad más fuerte y menor E. coli Residuo de ADNg, adecuado para aplicaciones con mayores requisitos de pureza, actividad y residuos enzimáticos.
Características
Alta eficiencia de escisión:La etiqueta de proteína se elimina más a fondo.
Bajo nivel residual de ADN genómico del huésped:Reducir eficazmente el riesgo de introducción de residuos de sustancias exógenas.
Aplicaciones
Eliminación de etiquetas de fusión
Presupuesto
| Definición de unidad | La cantidad de enzima necesaria para cortar >85% de los 3 micrasg sustrato en un 1×Tampón rTEV (50 mM Tris, pH 8,0, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT) a 30odo porque 1 h se definió como unidad de actividad |
| Pureza de las proteínas | ≥95% |
| Fuente | Expresado en E. coli |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 20427ES80 | 20427ES10 | 20427ES50 |
| 20427-A | Proteasa rTEV (5 U/μL) | 200 μL | 2×1 ml | 10 ml |
| 20427-B | Tampón rTEV (10×) | 600 μL | 6 ml | 30 ml |
Envío y almacenamiento
Proteasa rTEV, almacenada a -25~-15odo Durante 6 meses; Conservar a -85~-65odo por 1 año.
Tampón rTEV, almacenado a -25~-15odo por 1 año.
Nota: Se recomienda almacenar cada componente por separado al recibir los productos o usarlos por primera vez para evitar la congelación y descongelación repetidas.
Cifras
Cifra 1. Verificación de la actividad de escisión de UCF.MEMT. Proteasa rTEV
Nota: Uso de una proteína de fusión (3 μg)cque contiene el UCF.MEMT. Sitio de escisión de la proteasa rTEV como sustrato, UCF.MEMT. Se añadió proteasa rTEV a 10, 5 y 3 U, respectivamente. La reacción se llevó a cabo a 30 odo durante 1 hora, y el efecto de escisión se detectó mediante electroforesis en gel de agarosa. Los resultados mostraron que cuando la cantidad de UCF.MEMT. La proteasa rTEV tenía más de 3 U y podía escindir el sustrato de manera eficiente con una eficiencia de escisión de >90%.
Documentos:
Hoja de datos de seguridad
20427_Ficha de datos de seguridad_Versión EN20250120.pdf
Manuales
Pago y seguridad
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Consulta
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Preguntas frecuentes
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