Descripción
Aquí está la traducción al inglés del texto:
Pirofosfatasa inorgánica (PPasa) cataliza la conversión de una molécula de pirofosfato en dos moléculas de iones fosfato. En experimentos de amplificación de ácidos nucleicos, la PPasa puede hidrolizar el pirofosfato inorgánico generado durante la reacción. Se trata de una reacción altamente exergónica que puede desplazar el equilibrio de la reacción hacia el lado del producto, evitando así la inhibición del sistema de reacción.
En el proceso de producción de productos de vacunas de ARNm, la adición de PPasa puede mejorar el rendimiento del ARNm. Sin embargo, para los productos con ARNm como producto final, la PPasa añadida es una sustancia exógena que debe eliminarse durante el proceso de purificación. Por lo tanto, es necesario detectar la cantidad residual de PPasa para evaluar la eficacia del proceso de purificación en la eliminación de residuos de proteínas y confirmar si la PPasa residual en el producto de vacuna de ARNm se ha purificado a un nivel aceptable.
Este kit utiliza el principio de un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) de doble sándwich de anticuerpos para detectar residuos de PPasa. El estándar de PPasa y las muestras de prueba se añaden a una placa de enzimas recubierta previamente con anticuerpos anti-PPasa (36706-A), seguido de la adición de un anticuerpo de detección marcado con biotina diluido (36706-C) y, finalmente, estreptavidina-HRP (SA-HRP) (36706-D). Esto forma el complejo anticuerpo+antígeno+anticuerpo-Biotina+SA-HRP. Después del lavado, se añade la solución de sustrato TMB (36706-H) para desarrollar el color.
Bajo la catálisis de la enzima HRP, el TMB pasa de incoloro a azul y, bajo la acción de la solución de parada (36706-1), finalmente se convierte en amarillo. La intensidad del color amarillo se correlaciona positivamente con la cantidad de PPasa detectada en la muestra.
Componentes
No. | Nombre | 36706ES48 | 36706ES96 |
36706-A | Microtitulación recubierta de anti-PPasa tiras | 48T | 96T |
36706-B* | Estándar: PPase | 1 frasco | 2×1 vial |
36706-C | Anticuerpo de detección: Anticuerpo conjugado con biotinaOdias | 60 microlitros | 120 microlitros |
36706-D | Estreptavidina-HRP | 30 microlitros | 60 microlitros |
36706-E | Dilución Buffer 1 | 25 ml | 45 ml |
36706-F | Lavar Buffer Concentrado(20×) | 25 ml | 50 ml |
36706-G | Dilución Buffer 2 | 15 ml | 30 ml |
36706-H | Sustrato TMB | 8 ml | 15 ml |
36706-1 | Detener la solución | 5 ml | 10 ml |
36706-J | Sellador de placas | 3 cada uno | 5 cada uno |
*El estándar 36706-B es un polvo liofilizado.
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