Descripción
La expresión recombinante en Escherichia coli es un método relativamente simple y rentable para producir algunas proteínas y ADN plasmídico. Durante el proceso de producción de productos utilizando Escherichia coli, existe una alta posibilidad de contaminación de las proteínas de la célula huésped (HCP) de Escherichia coli, lo que puede reducir la eficacia de los fármacos terapéuticos y causar toxicidad adversa o respuestas inmunitarias. Por lo tanto, durante la producción y purificación de fármacos terapéuticos para humanos o animales, es necesario minimizar el contenido de esta impureza tanto como sea posible.
El ELISA es un método simple, altamente sensible y objetivo para detectar HCP. Este kit utiliza el principio experimental del inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA) de doble anticuerpo en sándwich para detectar la cantidad residual de HCP de E. coli. Para detectar residuos de HCP de E. coli, agregue el estándar de HCP de E. coli y la muestra a analizar a la etiqueta enzimática recubierta previamente con la placa de anticuerpo anti-HCP de E. coli (36712-A). Luego agregue el anticuerpo de detección de HCP de E. coli marcado con biotina diluido (36712-C) y, finalmente, agregue estreptavidina-HRP (SA-HRP) (36712-D) para formar el complejo anticuerpo+antígeno+anticuerpo ‐Biotina+SA‐HRP. Después de lavar la placa, agregue la solución de revelado de color TMB (36712-G) para revelar el color. El TMB se transformó de incoloro a azul bajo la catálisis de la enzima HRP y finalmente se transformó en amarillo bajo la acción de la solución de parada (36712-H). El tono de amarillo se correlaciona positivamente con la cantidad de HCP de E. coli detectada en la muestra. Este kit se puede utilizar para optimizar el proceso de purificación de productos biológicos, controlar las impurezas en el proceso intermedio y detectar la liberación de productos finales.
Componentes
No. | Nombre | 36712ES96 |
36712-A | Tiras de microtitulación recubiertas con anti-E. coli | 96T |
36712-B | MI.Estándares HCP de coli | 2 viales |
36712-DO | Anticuerpos de detección: Anticuerpos conjugados con biotina | 120 μL |
36712-D | Estreptavidina-HRP | 40 μl |
36712-MI | Tampón de dilución (5×) | 50 ml |
36712-F | Concentrado de tampón de lavado (20×) | 50 ml |
36712-GRAMO | Sustrato TMB | 15 ml |
36712-H | Detener la solución | 10 ml |
36712-I | Sellador de placas | 5 cada uno |
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Consulta
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Preguntas frecuentes
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