Fibronectina humana recombinante _ 40113es

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Descripción

La fibronectina (FN) es una glucoproteína extracelular que existe en forma soluble en los fluidos corporales o en forma insoluble en la matriz extracelular. Como una de las principales moléculas de adhesión celular, la FN desempeña un papel clave en muchos procesos fisiológicos importantes, como la embriogénesis, la cicatrización de heridas, la hemostasia y la trombosis. Los cambios en la expresión, degradación y combinación de la fibronectina están estrechamente relacionados con un gran número de fenómenos patológicos, incluidos el cáncer y la fibrosis.

Aplicaciones de la fibronectina (FN):

1) Como matriz de cultivo celular; su función es promover el crecimiento celular, aumentar la tasa de adhesión celular, mejorar el nivel de metabolismo celular, acortar el tiempo de crecimiento celular; aumentar la tasa de fusión celular en la tecnología de hibridomas, etc.

2) Diagnóstico y tratamiento de enfermedades; su función es la reparación y cicatrización de heridas, diagnóstico y tratamiento del cáncer, tratamiento del sistema vascular y enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares, etc.

Este producto es una fibronectina humana recombinante derivada de células de endospermo de arroz, que existe en forma monomérica y se puede utilizar como matriz de cultivo celular para reemplazar Matrigel, colágeno de cola de rata, fibronectina derivada de sangre, etc., para aumentar la tasa de adhesión celular, mejorar el nivel de metabolismo celular y acortar el ciclo de crecimiento celular. También se puede agregar directamente al medio de cultivo para reemplazar o reducir la cantidad de suero utilizado, promover la adhesión celular, la migración, el crecimiento móvil y mantener el estado celular.

Este producto es un polvo liofilizado de grado de cultivo celular que presenta características de pequeñas diferencias de lote a lote y ningún riesgo potencial de infección viral.

Producto Propiedades

Número CAS

86088-83-7

Fuente

Rhielo

Peso molecular

200 ~ 210 kDa

Apariencia física

Polvo liofilizado (liofilizado) blanco filtrado estéril.

Pureza

> 95% por SDS-PAGE

pH

6.0 ~ 8.0

Actividad Biológica

El ED50 Según lo determinado por un ensayo de adhesión celular utilizando células de melanoma de ratón B16-F1, es inferior a 1,1 μg/ml, lo que corresponde a una actividad específica de > 1,17 X 107 UI/mg.

Endotoxin

< 0.5 UE/μg

Envío y almacenamiento

Este producto debe almacenarse a -25~-15℃ durante 3 años.

Reconstitución

Disolver la fibronectina humana recombinante (rFN) en PBS 1× para preparar una solución de conservación con una concentración de 1 mg/ml. Conservar a -20 °C en alícuotas según dosis de un solo uso para evitar la congelación y descongelación repetidas. Es eficaz durante 3-6 meses.

Instrucciones de uso

1. Experimento de recubrimiento (tomando como ejemplo una placa de 6 pocillos; para otras placas de cultivo, consulte la Tabla 1)

1.1 Extraiga una cantidad adecuada de fibronectina humana recombinante (rFN) y dilúyala hasta la concentración de solución de trabajo con PBS 1× estéril, pH 7,2~7,4, y el rango de referencia de concentración final es 50~100 μg/mL. Después de mezclar, agréguela a la placa de 6 pocillos, 800 μL/pocillo, para asegurarse de que la solución de trabajo cubra completamente el fondo de la placa de 6 pocillos.

1.2 Coloque la placa de 6 pocillos con la solución de trabajo de rFN a 4 ℃ durante la noche o a 37 ℃ para recubrir durante 1 hora.

1.3 Recoja la solución de trabajo en la placa de 6 pocillos y consérvela a 4 ℃. Puede utilizarse para recubrir otros frascos o placas de cultivo en el plazo de una semana.

1.4 Retire la placa de 6 pocillos recubierta con rFN, agregue medio de cultivo celular normal e inocule directamente las células. rFN promueve la adhesión y el crecimiento celular.

1.5 Si la placa de 6 pocillos recubierta no se utiliza por el momento, guárdela en un recipiente sellado a 4 ℃. Se recomienda utilizarla en el plazo de una semana.

Tabla 1. Cantidades de adición de rFN recomendadas para diferentes frascos/placas de cultivo

Placas/placas de cultivo celular

Área inferior (cm2)

Dosis recomendada

Placa de 96 pocillos

0,32

50 μL/pocillo

Placa de 24 pocillos

2

200 μL/pocillo

Placa de 12 pocillos

4.5

400 μL/pocillo

Placa de 6 pocillos

9.6

800 μL/pocillo

Plato de 35 mm

8

600 μL/pocillo

Plato de 60 mm

21

1.6 ml/placa

Botella T-25

25-28

2 ml/botella

En el experimento de recubrimiento/siembra, la cantidad de solución de trabajo de fibronectina humana recombinante (rFN) agregada debe ajustarse de acuerdo con el tamaño de la placa/botella de cultivo, como se muestra en la Tabla 1 a continuación.

2. Experimento de cultivo celular

Durante el cultivo celular, la adición de rFN directamente al medio de cultivo celular puede promover la adhesión celular, la migración y mantener el estado celular. El rango de referencia de concentración final es de 5 a 50 μg/ml.

Notas

1. Este producto es solo para uso de investigación.

2. Por favor, trabaje con bata de laboratorio y guantes desechables.Para su seguridad.

Precaucións

1. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

2. Por su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes desechables durante la operación.

3. ¡Solo para uso en investigación!

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