Descripción
Cuando las células experimentan apoptosis, activan enzimas endonucleasas que cortan el ADN genómico entre los nucleosomas. La escalera de ADN de 180-200 pb se puede detectar mediante electroforesis después de la extracción de ADN durante la apoptosis.
El kit de ensayo de apoptosis celular TUNEL (etiquetado de extremos de dUTP mediado por TdT) (FITC) se puede utilizar para detectar la rotura del ADN nuclear en células de tejido durante la etapa apoptótica tardía. El principio es que FITC-12-dUTP Se inserta en la terminal 3'-hidroxilo (3'-OH) del ADN genómico expuesto durante la ruptura del ADN bajo la acción de la Terminal Deoxynucleotidyl Transferasa (TdT). Esto se puede detectar mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
Este kit optimiza la reacción de etiquetado mediante el uso de FITC-12-dUTP y dNTP no marcado en la proporción óptima para la incorporación de nucleótidos en el extremo 3' -OH terminal, lo que da como resultado una "cola de etiquetado" más larga al final del mismo fragmento de ADN roto. La “cola del etiquetado” reduce el impedimento estérico de los grupos marcados en dNTP adyacentes, aumenta el número de grupos fluorescentes en cada fragmento roto y reduce la agregación y extinción que pueden ser causadas por grupos fluorescentes adyacentes, mejorando así la sensibilidad de detección y reduciendo las reacciones no específicas.
Este kit tiene una amplia gama de aplicaciones. Se puede utilizar para detectar la apoptosis en secciones congeladas o en parafina, así como en cultivos de células adherentes o en situaciones de células en suspensión.
Características
- Los reactivos de este kit se proporcionan en forma líquida para facilitar su uso.
- El kit se puede utilizar para una variedad de propósitos: citometría de flujo, microscopía de fluorescencia para detección.
- Bajo el microscopio de fluorescencia, la distinción de colores es evidente.
Aplicaciones
- Este kit se puede utilizar para citometría de flujo y microscopía de fluorescencia.
- Este kit puede detectar la apoptosis temprana de las células.
- Este kit puede distinguir entre células apoptóticas tardías y necróticas.
Presupuesto
| Solicitud | La aplicación verificada del kit fue detectar células apoptóticas mediante citometría de flujo o citología de inmunofluorescencia. |
| Forma de embalaje | Botella |
Componentes
| Componente | Nombre | 40306ES20 (20 dientes) | 40306ES50 (50 dientes) | 40306ES60 (100T) |
| 40306-A | 5×Búfer de equilibrio | 750 μl | 1,25 ml × 2 | 1,25 ml × 3 |
| 40306-B | Mezcla de etiquetado FITC-12-dUTP | 100 μl | 250 μL | 250 μL × 2 |
| 40306-C | Enzima TdT recombinante | 20 μL | 50 μl | 50 μL × 2 |
| 40306-D | Proteinasa K (2 mg/ml) | 40 μl | 100 μl | 100 μL × 2 |
| 40306-E | DNasa I (1 U/μL) | 5 μL | 12,5 μl | 25 μL |
| 40306-F | Tampón 10 × DNasa I | 100 μl | 250 μL | 500 μL |
Envío y almacenamiento
El producto se envía con hielo seco y se puede almacenar a -15 ℃. ~-25℃ para 1 año.
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