Descripción
El kit de detección de micoplasma GMyc-PCR utiliza principalmente el método PCR para detectar la infección por micoplasma en diversos materiales biológicos (como cultivos celulares, secreciones de animales de experimentación, suero animal, etc.). Combina varias ventajas: es sensible, específico, rápido y se puede detectar directamente con sobrenadantes de cultivos celulares. Este producto detecta micoplasma en materiales biológicos como células cultivadas mediante el método PCR. Los cebadores utilizados están diseñados de acuerdo con la región conservada de la secuencia de ARNr 16S-23S del micoplasma y solo amplifican específicamente el ADN del micoplasma, con alta sensibilidad y especificidad de detección. La amplificación por PCR y el análisis por electroforesis solo toman unas pocas horas y la operación es conveniente y simple.
El cultivo celular es un experimento común en la investigación de las ciencias biológicas. A diferencia de otros métodos experimentales de uso común, el cultivo celular es un proceso continuo y dinámico, y las células a menudo responden a errores de manipulación o contaminantes que a menudo presentan estados celulares o apariencia anormales del medio. Si está contaminado por micoplasma, la morfología celular no presenta cambios obvios y es fácil pasarlo por alto. A menudo no se detecta hasta que la contaminación es muy grave. Puede haber cientos de micoplasmas en la membrana celular contaminada, estos micoplasmas compiten por los nutrientes y liberan metabolitos tóxicos, lo que afecta gravemente los resultados experimentales.
Los estudios han demostrado que al menos 20 tipos de micoplasma pueden contaminar las células, entre los que los más comunes son: Mycoplasma oral (M. orale), Mycoplasma arginina (M. arginini), Mycoplasma hyorhinis (M. hyorhinis), Micoplasma fermentum (M. fermentans), Mycoplasma hominis (M. hominis), Mycoplasma salivarius (M. salivarium), Mycoplasma pulmonar (M. pulmonis) y Mycoplasma pera (M. pirum). La tasa de contaminación por micoplasma de las células cultivadas varía entre el 4% y el 92%. Las fuentes de contaminación incluyen el entorno de trabajo, el propio operador (algunos micoplasmas son flora normal del cuerpo humano), el medio de cultivo, el suero, la contaminación cruzada de células, el equipo experimental y la contaminación del tejido u órgano original a partir del cual se prepararon las células.
Identificar la causa subyacente de los problemas durante el cultivo celular es una tarea difícil y que requiere mucho tiempo, en la que se deben sospechar los cambios repentinos y es necesario aplicar buenas prácticas de análisis y realizar análisis periódicos para detectar la contaminación por micoplasma. Existen muchos métodos para la detección de micoplasma, como el cultivo directo, la tinción de fluorescencia de ADN, la ELISA y los métodos de PCR.
Característica
- Los cebadores utilizados fueron diseñados de acuerdo con la región conservada de la secuencia del ARNr 16S-23S de Mycoplasma.
- Sólo el ADN de micoplasma amplificado específicamente
- Excelente sensibilidad y especificidad.
- Se pudieron detectar más de 20 especies de micoplasma
Solicitud
- Detección de micoplasma
Componentes
Componentes No. | Nombre | 40601ES10 (10 ensayos) | 40601ES20 (20 ensayos) |
40601-A | Mezcla de PCR GMyc-1st | 250 µL | 2×250 µL |
40601-B | Mezcla de PCR GMyc-2nd | 250 µL | 2×250 µL |
40601-C | Plantilla de control positivo N | 20 µL | 20 µL |
[Notas] 1. Cuando no se utiliza durante un tiempo prolongado, se puede almacenar congelado a una temperatura de -85 a -65 ℃.
2. La reacción de PCR es extremadamente sensible.Para evitar falsos positivos, al agregar muestras se añade un control positivo al final.
Almacenamiento
Este producto puede almacenarse a una temperatura de entre -25 y -15 ℃ durante 18 meses. Si no se utiliza durante un tiempo prolongado, manténgalo alejado de la luz.
Cifras
Figura 1. Resultado del electroforetograma del kit de prueba PCR Mycoplama.
El electroforetograma de la primera ronda se muestra en la Figura 1A y el electroforetograma de la segunda ronda se muestra en la Figura 1B. (M: marcador de 1 kb, 1-2: controles positivos, 3: control negativo)
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