Hieff Trans™ Reactivo de transfección liposomal Preguntas frecuentes

(1) P: ¿Puede haber suero presente al preparar el complejo de reactivos de transfección de ácidos nucleicos?

R: La presencia de suero afectará la formación de liposomas. Se recomienda utilizar un medio sin suero (normalmente medio MEM) al preparar complejos de reactivos de transfección de ácidos nucleicos.

(2) P: ¿Se puede congelar el reactivo de transfección?

R: No. Este reactivo debe almacenarse a una temperatura entre 2 y 8 ℃ y se debe tener cuidado de no abrir la tapa repetidamente durante un tiempo prolongado, ya que la apertura prolongada de la tapa provocará la oxidación de los liposomas y afectará la eficiencia de la transfección.

(3) P: ¿A qué debo prestar atención al utilizar el reactivo de transfección de ácidos nucleicos liposomales Hieff Trans™?

R: 1) Durante la operación de transfección, es mejor que la confluencia celular alcance el 80%-95%, y la densidad de siembra específica se determina de acuerdo con la situación de las células;

2) El uso de ADN de alta pureza ayuda a obtener una mayor eficiencia de transfección;

3) Es necesario diluir el ADN y los reactivos de transfección con medio sin suero cuando se preparan complejos de transfección;

4) No se pueden añadir antibióticos al medio durante la transfección;

5) La concentración de ADN y la cantidad de reactivo de liposoma catiónico deben optimizarse para el primer uso para obtener la máxima eficiencia de transfección. La proporción de ADN a reactivo de transfección es Generalmente se recomienda que sea 1:2-1:3.

(4) P: ¿Es necesario finalizarlo después de la transfección?

R: No es necesario. Los complejos de liposomas son estables durante 6 horas. Si no se cambia el medio celular antes de la transfección, para garantizar los nutrientes necesarios para el crecimiento normal de las células, es necesario cambiar a un nuevo medio después de 4 a 6 horas. Sin embargo, si se ha cambiado el medio antes de la transfección, no es necesario cambiarlo después de la transfección de liposomas.

(5) P: ¿A qué debo prestar atención si quiero mejorar la eficiencia de la transfección?

R: a: La densidad de células en el momento de la transfección es del 90%-95%.

b: Durante la transfección, utilice medio MEM sin suero para diluciones de ácidos nucleicos y liposomas.

c: El medio se puede cambiar 4-6 horas después de la transfección.

(6) P: ¿Se puede realizar la cotransfección de ADN y ARNi? ¿Qué efecto produce?

R: Se puede realizar una cotransfección, pero se recomienda realizar la transfección por separado y la transfección de ADN debe realizarse 6 horas después de la del ARNi. Si se realizan juntas, la eficiencia de la transfección del ARNi será menor.

(7) P: ¿Se puede utilizar el reactivo de transfección para la transfección de paquetes lentivirales?

R: El empaquetamiento lentiviral es posible, pero la eficiencia del empaquetamiento lentiviral no está necesariamente relacionada con la eficiencia de la transfección, sino también con la selección de plásmidos de empaquetamiento y la proporción entre plásmidos.

(8) P: ¿Se puede utilizar el reactivo de transfección de ácidos nucleicos liposomales Hieff Trans™ para la transfección de células en suspensión?

A: El reactivo de transfección de ácidos nucleicos liposomales Hieff Trans™ se puede utilizar para la transfección de células en suspensión; consulte el protocolo para obtener más detalles. Además, también hemos lanzado un reactivo de transfección específico para células en suspensión (n.° de cat. 40805, reactivo de transfección de ácidos nucleicos liposomales para células en suspensión).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. Control optogenético de la función y el metabolismo del ARN mediante el uso de proteínas de unión al ARN conmutables por luz diseñadas. Nat Biotechnol. 3 de enero de 2022. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Publicación electrónica antes de su impresión. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J, Chen P, Wang H, Liu H, Li Y, Zhang Y, Wu Y, Paek C, Sun Z, Lei J, Yin L. Variantes de Cas12a diseñadas para un menor efecto fuera del objetivo en todo el genoma mediante un reconocimiento estricto de PAM. Mol Ther. 5 de enero de 2022;30(1):244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Publicación electrónica 20 de octubre de 2021. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] Chen S, Cao X, Zhang J, Wu W, Zhang B, Zhao F.circVAMP3 impulsa la separación de fases de CAPRIN1 e inhibe el carcinoma hepatocelular al suprimir la traducción de c-Myc. Adv Sci (Weinh). 2022 Mar;9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Publicación electrónica 24 de enero de 2022. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF:16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. El factor de empalme arginina/serina-rico 8 promueve la malignidad del mieloma múltiple y la lesión ósea a través del empalme alternativo de CACYBP y la comunicación celular basada en exosomas. Clin Transl Med. 2022 Feb;12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X, Deng Z, Ding P, Qiang W, Lu Y, Gao S, Hu Y, Yang Y, Du J, Gu C. Una nueva proteína codificada por circHNRNPU promueve la progresión del mieloma múltiple mediante la regulación del microambiente de la médula ósea y el empalme alternativo. J Exp Clin Cancer Res. 8 de marzo de 2022; 41 (1): 85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (SI:11.161)

[6] Hua Z, Wei R, Guo M, Lin Z, Yu X, Li X, Gu C, Yang Y. YTHDF2 promueve la proliferación de células de mieloma múltiple a través del eje STAT5A/MAP2K2/p-ERK. Oncogene. 2022 Mar;41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Publicación electrónica 24 de enero de 2022. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Reactivación del supresor tumoral en el cáncer de mama mediante el cambio de potenciador a través de la red NamiRNA. Nucleic Acids Res. 7 de septiembre de 2021;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (SI:16.9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. Perspectiva estructural del reclutamiento del complejo BRCA1-BARD1 a la cromatina dañada. Mol Cell. 1 de julio de 2021;81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Publicación electrónica 7 de junio de 2021. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K, Wang A, Zhong K, Qi S, Wei C, Shu X, Tu WY, Xu W, Xia C, Xiao Y, Chen A, Bai L, Zhang J, Luo B, Wang W, Shen C. El eje UBQLN2-HSP70 reduce los agregados de poli-Gly-Ala y alivia los defectos de comportamiento en el modelo animal C9ORF72. Neuron. 16 de junio de 2021;109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Publicación electrónica 14 de mayo de 2021. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Reactivación del supresor tumoral en el cáncer de mama mediante el cambio de potenciador a través de la red NamiRNA. Nucleic Acids Res. 7 de septiembre de 2021;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16.9)

[11] Li T, Chen X, Qian Y, Shao J, Li X, Liu S, Zhu L, Zhao Y, Ye H, Yang Y. Un dispositivo optogenético sintético basado en BRET para la expresión pulsátil de transgenes que permite la homeostasis de la glucosa en ratones. Nat Commun. 27 de enero de 2021;12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] Pan Y, He X, Li C, Li Y, Li W, Zhang H, Wang Y, Zhou G, Yang J, Li J, Qu J, Wang H, Gao Z, Shen Y, Li T, Hu H, Ma H. La actividad neuronal recluta el eje CRTC1/CREB para impulsar la autofagia dependiente de la transcripción para mantener la LTD en fase tardía. Cell Rep. 20 de julio de 2021;36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. El receptor acoplado a proteína G GPR17 inhibe el desarrollo de gliomas al aumentar la producción de ROS mediada por el complejo represor polycomb 1. Cell Death Dis. 12 de junio de 2021;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] Fan Y, Wang J, Jin W, Sun Y, Xu Y, Wang Y, Liang X, Su D.CircNR3C2 promueve el efecto supresor de tumores mediado por HRD1 mediante la absorción de miR-513a-3p en el cáncer de mama triple negativo. Mol Cancer. 2 de febrero de 2021;20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x. PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C, Wang Y, Zhang L, Qiao L, Sun S, Shao M, Tang X, Ding P, Tang C, Cao Y, Zhou Y, Guo M, Wei R, Li N, Xiao Y, Duan J, Yang Y. AHSA1 es un objetivo terapéutico prometedor para la proliferación celular y la resistencia a los inhibidores del proteasoma en el mieloma múltiple. J Exp Clin Cancer Res. 6 de enero de 2022;41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1 activa la apoptosis independiente y dependiente de caspasa al promover la translocación nuclear de AIF y la degradación de MCL1. Adv Sci (Weinh). 8 de febrero de 2021;8(8):2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF:15.84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11 equilibra la estabilidad de ARID1A y el estado oncogénico/supresor de tumores del carcinoma de células escamosas. Cell Rep. 2020 7 de enero;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] Sun X, Peng X, Cao Y, Zhou Y, Sun Y. ADNP promueve la diferenciación neuronal mediante la modulación de la señalización de Wnt/β-catenina. Comuna Nacional. 12 de junio de 2020; 11 (1): 2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; PMCID: PMC7293280. (SI:14.911)

[19] Yang X, Wang H, Xie E, Tang B, Mu Q, Song Z, Chen J, Wang F, Min J. La reconexión de la señalización de ERBB3 y ERK confiere resistencia a la inhibición de FGFR1 en el cáncer gastrointestinal que albergaba una mutación ERBB3-E928G. Protein Cell. Diciembre de 2020;11(12):915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF:14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. et al. Nanomáquina de ADN móvil impulsada por enzimas duales para la obtención de imágenes intracelulares de microARN de baja expresión. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (SI:8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. La interacción entre p53 y la señalización Ras controla la resistencia al cisplatino a través de la regulación de la apoptosis y la autofagia mediada por HDAC4 y HIF-1α. Theranostics. 30 de enero de 2019;9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] Zou Y, Wang A, Shi M, Chen X, Liu R, Li T, Zhang C, Zhang Z, Zhu L, Ju Z, Loscalzo J, Yang Y, Zhao Y. Análisis de paisajes redox y dinámicas en células vivas e in vivo utilizando sensores fluorescentes codificados genéticamente. Nat Protoc. 2018 Oct;13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K, Zhao X, Chen X, Wei Y, Du W, Wang Y, Liu L, Zhao W, Han Z, Kong D, Zhao Q, Guo Z, Han Z, Liu N, Ma F, Li Z. Efectos terapéuticos mejorados de los exosomas derivados de células madre mesenquimales con un hidrogel inyectable para el tratamiento de la isquemia de las extremidades posteriores. ACS Appl Mater Interfaces. 12 de septiembre de 2018;10(36):30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Publicación electrónica 29 de agosto de 2018. PMID: 30118197. (IF:8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. La pérdida de CXCR7 endotelial afecta la homeostasis vascular y la remodelación cardíaca después de un infarto de miocardio: implicaciones para el descubrimiento de fármacos cardiovasculares. Circulation. 28 de marzo de 2017;135(13):1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Publicación electrónica 2 de febrero de 2017. PMID: 28154007. (IF:18.881)