Descripción
El reactivo de transfección in vitro de ARNi/miARN Hieff Trans™ es un reactivo de transfección anfifílico y catiónico de PEI desarrollado para la transfección de ARNi en células de mamíferos. Adecuado para la transfección de ARNi y miARN. Este reactivo de transfección encapsula el ARNi o miARN para formar un complejo catiónico, que interactúa con proteoglicanos cargados negativamente en la superficie celular y se adsorbe en la superficie celular, ingresa a la célula a través de endocitosis y forma un cuerpo de inclusión. El reactivo de transfección actúa como una esponja de protones, que puede absorber H+ en el lisosoma, y el flujo continuo de protones hace que el complejo se hinche y se rompa, liberando así el ARNi o miARN exógeno al citoplasma.
Este producto puede alcanzar una eficiencia de expresión de más del 90 % de 1 nM de ARNi en una amplia gama de líneas celulares, evitando efectos no deseados. Adecuado para la transfección de una variedad de células, incluidas Hela, MCF-7, HepG2, CHO y otras células adherentes; y líneas celulares en suspensión difíciles de transfectar, como las células K562 o THP-1, pueden alcanzar una eficiencia de silenciamiento del 80 %; incluidas algunas células primarias, fibroblastos humanos primarios y hepatocitos humanos primarios, etc., se puede lograr una eficiencia de silenciamiento del 80 %.
Característica
- Baja toxicidad: las células transfectadas aún mantienen una buena actividad.
- Amplia adaptabilidad: se cubren totalmente las células ordinarias y las células primarias difíciles de transfectar.
Solicitud
- Transfección celular
Especificación
| Propiedades físicas y químicas | Información |
| Forma | Líquido |
| Suero compatible | Sí |
| Tipo de célula | Líneas celulares establecidas |
| Tipo de muestra | ARNi/ARNmi |
| Técnica de transfección | Transfección basada en PEI |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 40806ES01 | 40821ES02 | 40821ES03 |
| 40806 | Hieff Trans™ in vitro Reactivo de transfección de ARNi/ARNmi | 0,1 ml | 0,5 ml | 1 ml |
Almacenamiento
El producto debe conservarse a 2-8ºC durante un año. ¡No congelar!
Cifras
- Demostración del efecto de transfección
Figura 1. La eficiencia de transfección del reactivo de transfección de ARNi/miARN in vitro Hieff Trans™ se mostró arriba.
(1) P: ¿Cuál es la diferencia entre la transfección de ADN y la transfección de ARNi?
R: 1. Dado que sólo hay 20 pares de bases, el ARNi es mucho más pequeño que el ADN, con miles o incluso más de 10.000 pares de bases.
2. Los reactivos y métodos de transfección utilizados para transfectar ADN no son adecuados para la transfección de ARNi.
3. La transfección de ARNi tiene requisitos más estrictos sobre la citotoxicidad de los reactivos de transfección que la transfección de ADN.
(2) P: ¿Es necesario cambiar el reactivo de transfección después de la transfección?
R: Para el cambio de medio se pueden distinguir dos situaciones:
1. Si no hay cambio de medio antes de la transfección, el medio debe cambiarse aproximadamente 6 horas después de la transfección para garantizar los nutrientes necesarios para el crecimiento celular;
2. Si hay un cambio antes de la transfección El medio se puede cambiar como de costumbre cuando el medio es deficiente en nutrientes.
(3) P: ¿Cuál es la eficiencia del reactivo de transfección PEI para transfectar ARNi y plásmido?
R: Este reactivo de transfección PEI está desarrollado especialmente para ARNi y no se recomienda la transfección de plásmidos.
(4) P: ¿Se puede congelar el reactivo de transfección?
R: No lo congele, ya que el reactivo de transfección es un reactivo de transfección catiónico PEI. La congelación a baja temperatura destruirá la actividad del reactivo de transfección PEI. Por lo tanto, es mejor almacenarlo a 4 grados para mantener la mejor eficiencia de transfección.
(5) P: ¿Cómo mejorar la eficiencia de la transfección?
A: a: Densidad de células en el momento de la transfección, 30%-50%.
b: Se debe utilizar medio sin suero Opti-MEM para la dilución de ARNi y liposomas durante la transfección.
c: El medio se puede cambiar 4-6 horas después de la transfección.
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