La D-luciferina es un sustrato común para la enzima luciferasa Luciferasa y se utiliza comúnmente en toda la biotecnología, especialmente en la obtención de imágenes in vivo. El mecanismo de acción es que la luciferina (el sustrato) puede oxidarse para emitir luz en presencia de ATP y luciferasa. Cuando hay un exceso de luciferina, la cantidad de cuantos de luz producidos se correlaciona positivamente con la concentración de luciferasa (véase la figura siguiente). Después de transfectar células con un plásmido que lleva el gen que codifica la luciferasa (Luc) e introducirlo en animales de investigación como ratones y ratas, se inyecta luciferina en las células y los cambios en la intensidad de la luz se detectan mediante BLI, lo que permite el seguimiento en tiempo real del estado de progresión de la enfermedad o la eficacia terapéutica de un fármaco, por ejemplo. El efecto del ATP en este sistema de reacción también se puede utilizar para indicar energía o signos vitales en función de los cambios en la intensidad de la bioluminiscencia.

La D-luciferina también se utiliza comúnmente en estudios in vitro, incluidos el análisis de niveles de luciferasa y ATP, el análisis de genes reporteros, la secuenciación de alto rendimiento y varios ensayos de contaminación. Actualmente, existen tres formas de producto en el mercado: D-luciferina (ácido libre), sal sódica de D-luciferina y sal potásica de D-luciferina. La principal diferencia entre estos tres productos está en sus características de solubilidad; la D-luciferina (ácido libre) es débilmente soluble en agua y en sistemas tampón, a menos que sea soluble en bases débiles como soluciones de NaOH y KOH. La D-luciferina en forma de sales de sodio y potasio se disuelve muy fácil y rápidamente en agua o tampones, es fácil de usar y los solventes no son tóxicos, lo que la hace particularmente adecuada para experimentos in vivo. Cuando se formula como líquidos, no hay una diferencia sustancial entre los tres productos para la mayoría de las aplicaciones.

Características

• Sin radiación, prácticamente inofensivo para los organismos vivos.
• Bioluminiscencia, sin fuente de luz de excitación.
• Es tan sensible que se puede detectar en unos cientos de células.
• Buena penetración, aún se puede detectar una profundidad de tejido de 3-4 cm.
• Alta relación señal-ruido, fuerte señal de fluorescencia y buena antiinterferencia.

Aplicaciones

• En el experimento de tumorigénesis en ratones desnudos, se observó el crecimiento del tumor sin invasión en tiempo real, sin medición de extirpación del tumor.
• Para probar el efecto de la administración sobre el crecimiento del tumor o la metástasis, el sustrato de fluoresceína puede eliminarse completamente en 3 horas, sin interferir en el experimento farmacológico.
• Se detectó la localización y distribución de células extrañas en animales.
• El gen objetivo o el promotor del gen objetivo se fusiona con el gen de la luciferasa para detectar cambios en la expresión genética durante el tratamiento farmacológico o la progresión de la enfermedad.
• Monitoreo del trasplante de células madre, supervivencia y proliferación; seguimiento de la distribución y migración de células madre in vivo.

Presupuesto

Componentes

Envío y almacenamiento

Transportado en bolsas de hielo; almacenado a -20°C seco y protegido de la luz; válido para 1 año.

Cifras

Documentos:

Hoja de datos de seguridad

Manuales

Citas y referencias:

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