Descripción
Las neurotoxinas botulínicas y tetánicas (BoNT y TeNT) son metaloproteasas de zinc que hidrolizan e inactivan las proteínas necesarias para la neurotransmisión. El dominio de la proteasa se encuentra en la cadena ligera de la neurotoxina. Entre los sustratos conocidos de las BoNT y las TeNT se encuentran la proteína sinaptosómica 25 (SNAP25) y la proteína de membrana asociada a vesículas (VAMP). Este sustrato incorpora una proteína fluorescente verde (GFPuv) y porciones de SNAP25B y VAMP2 humanas que contienen los sitios de escisión de todas las BoNT y TeNT conocidas. Las cadenas ligeras de las BoNT -A, -C y -E escinden la secuencia de SNAP25B, mientras que las BoNT -B, -D, -F, -G y TeNT escinden dentro de la secuencia de VAMP2. El sustrato se puede utilizar en un ensayo de cambio de gel SDSPAGE para detectar la escisión por las proteasas de neurotoxina. Como alternativa, el sustrato se puede acoplar a microplacas activadas con maleimida a través del residuo de cisteína C-terminal para generar un formato de ensayo de alto rendimiento. Se ha utilizado un sustrato y un formato de ensayo similares para detectar inhibidores de estas proteasas neurotóxicas.
Producto Propiedades
Sinónimos | Proteína de fluorescencia verde, GFP/SNAP25B/VAMP-2 |
Adhesión | P42212 |
Identificación genética | 7011691 |
Fuente | Derivado de E. coli p.ejFP, con un Met N-terminal. |
Peso molecular | Aproximadamente 26.9 Número de modelo: kDa. |
Secuencia AA | Español MVSKGEELFT GVVPILVELD GDVNGHKFSV SGEGEGDATY GKLTLKFICT TGKLPVPWPT LVTTLTYGVQ CFSRYPDHMK QHDFFKSAMP EGYVQERTIF FKDDGNYKTR AEVKFEGDTL VNRIELKGID FKEDGNILGH KLEYNYNSHN VYIMADKQKN GIKVNFKIRH NIEDGSVQLA DHYQQNTPIG DGPVLLPDNH YLSTQSALSK DPNEKRDHMV LLEFVTAAGI TLGMDELYK |
Etiqueta | Ninguno |
Apariencia física | Polvo liofilizado (liofilizado) blanco filtrado estéril. |
Pureza | > 95% mediante análisis SDS-PAGE y HPLC. |
Endotoxin | < 1,0 UE por 1μg de proteína por el método LAL. |
Formulación | Liofilizado a partir de una solución concentrada filtrada a 0,2 μm en PBS, pH 7,4. |
Reconstitución | Recomendamos centrifugar brevemente este vial antes de abrirlo para que el contenido se escurra hasta el fondo. Reconstituir en agua destilada estéril o solución tampón acuosa que contenga 0,1% BSA a una concentración de 0,1-1,0 mg/ml. Las soluciones madre deben dosificarse en alícuotas de trabajo y almacenarse a ≤ -20℃.Se deben realizar diluciones adicionales en soluciones tamponadas adecuadas. |
Sde cadera y Salmacenamiento
Los productos se envían con una bolsa de hielo y se pueden almacenar en -20℃ a -80℃ para 1 año.
Se recomienda dividir la proteína en cantidades más pequeñas cuando se usa por primera vez. y evitar ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Precaucións
1. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.
2. Por su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes desechables durante la operación.
3. ¡Solo para uso en investigación!
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