Descripción
El factor activador de células B (BAFF) pertenece a la superfamilia de ligandos del TNF y se le ha denominado TNFSF13B. Producido por macrófagos, células dendríticas y linfocitos T, BAFF promueve la supervivencia de las células B y es esencial para su maduración (1-4). BAFF se une a tres miembros de la superfamilia de receptores del TNF: el antígeno de maduración de células B (BCMA/TNFRSF17), el activador transmembrana y modulador de calcio e interactor con el ligando de ciclofilina (TACI/TNFRSF13B) y el receptor BAFF (BAFF). R/BR3/TNFRSF13C). Estos receptores son proteínas transmembrana de tipo III que carecen de un péptido señal. Mientras que TACI y BCMA se unen a BAFF y a otro ligando de la superfamilia del TNF, APRIL (un ligando inductor de proliferación), BAFF R se une selectivamente a BAFF. El dominio extracelular de BAFF R carece del TNF. El dominio rico en cisteína (CRD) canónico del receptor contiene solo un CRD parcial con cuatro residuos de cisteína. El receptor BAFF humano y murino comparte una identidad de secuencia de aminoácidos del 56%. El receptor BAFF se expresa ampliamente en el bazo, los ganglios linfáticos y el B en reposo. También se expresa en niveles más bajos en las células B activadas y en las células CD4+ en reposo. T células, en el timo y en los leucocitos de sangre periférica.
Presupuesto
Sinónimos | CD268; BAFFR; BR3; TNFRSF13C; BROMIX; CVID4; prolixina |
Uniprot No. | |
Fuente | La proteína humana recombinante BAFFR/TNFRSF13C se expresa a partir de Células HEK293 con etiqueta His en el C-terminal. Contiene Ser7-Ala71. |
Peso molecular | La proteína tiene un peso molecular previsto de 7,6 kDa. Debido a la glicosilación, la proteína migra a 13-25 kDa según el resultado de la PAGE con Tris-Bis. |
Apariencia física | Polvo liofilizado (liofilizado) blanco filtrado estéril. |
Pureza | > 95% según lo determinado por SDS-PAGE |
Actividad | 1. Datos ELISA: BAFFR humano inmovilizado, etiqueta His a 0,5 μg/ml (100 μl/pocillo). Curva dosis-respuesta para el anticuerpo BAFFR humano, etiqueta hFc con el EC.50 de 6,0 ng/ml determinado por ELISA. 2. Datos ELISA: BAFF humano inmovilizado (trímero), etiqueta hFc a 5 μg/ml (100 μl/pocillo) en la placa. Curva dosis-respuesta para BAFFR humano, etiqueta His con el EC.50 de 2,3μg/ml determinado por ELISA. 3. Datos SPR: El BAFFR humano, His Tag capturado en el chip CM5 a través del anticuerpo anti-his puede unirse al trímero BAFF humano, hFc-Flag Tag con una constante de afinidad de 1,21 nM como se determinó en el ensayo SPR (Biacore T200). |
Endotoxin | < 1.0 UE por 1μg de el proteína por el Método LAL. |
Formulación | Liofilizado a partir de 0,22 Solución filtrada en PBS (pH 7,4) de μm. Normalmente Se añade un 5% de trehalosa como protector antes de la liofilización. |
Reconstitución | Centrifugar los tubos antes de abrirlos. Reconstituir a una concentración superior a 100 μg/mL. se recomienda (normalmente usamos 1) mg/ml solución para liofilización). Disolver la proteína liofilizada en agua destilada. |
Almacenamiento
Transporte con bolsas de hielo. Conservar entre -20 °C y -80 °C. Válido por un año.
Una vez reconstituido, conservar sin abrir entre -20 y -80 °C de 3 a 6 meses. Tras la reconstitución, conservar entre 2 y 8 °C de 2 a 7 días.
Se recomienda almacenar en alícuotas y congelar para el primer uso para evitar congelaciones y descongelaciones repetidas.
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