پروتکل کولیت اولسراتیو مدل سازی خوکچه با استفاده از دکستران سدیم سولفات (DSS)

افزایش نفوذپذیری روده یکی از عوامل اتیولوژیک IBD است و از این رو می توان از آن به عنوان نشانگر زیستی برای ارزیابی شدت آسیب روده کوچک و بزرگ استفاده کرد. D-Mannitol، یک مولکول کربوهیدرات کوچک بی اثر است که می تواند در امتداد کل محور پرزهای کریپت جذب شود، برای ارزیابی نفوذپذیری روده in vivo استفاده شد.^[1].

Figure 1. Piglet

شکل 1. خوکچه

1. ماکت ساختمان

2. نتایج

3. پیوند به این منبع

4. مورد موفق برای مدل سازی با Yeasen DSS

5. سفارش محصول

6. مقالات منتشر شده با معرف های ما

7. با توجه به Reading

1. ماکت ساختمان

1.1 مدل حیوانی

خوکچه های یورکشایر در سن 5-4 روزگی

1.2 مواد

DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)

1.3 پروتکل

الف) خوکچه های یورکشایر به صورت جداگانه در قلم های کف فلزی با کف های لاستیکی در یک اتاق چرخه نور/تاریکی کنترل شده 12 ساعته قرار گرفتند. دمای اتاق در 26 درجه سانتیگراد حفظ شد و با لامپ گرمایش تکمیل شد.
ب) خوکچه ها سه بار در روز با رژیم غذایی جایگزین شیر تجاری تغذیه شدند، مشابه سطح مصرف آزادانه آنها.
ج) حیوانات از طریق جراحی با یک کاتتر داخل معده نصب شدند، کاتتر به یک چسب سیلیکونی (حدود 8×12 میلی‌متر) متصل شد، که بیشتر روی دیواره معده بخیه شد و تقریباً 30 میلی‌متر در داخل لومن معده قرار داده شد. هر حیوان در یک جلیقه سفارشی با یک جیب پشتی برای ذخیره موقت بخش بیرونی کاتتر تعبیه شده بود.
د) حیوانات به گروه کنترل مثبت (Pos)، گروه کنترل منفی (Neg) و گروه آزمایش (Trp) تقسیم شدند.
ه) گروه کنترل مثبت (Pos): پرفیوژن DSS (5 روز) + سالین (5 روز). گروه کنترل منفی (Neg): پرفیوژن با نرمال سالین (10 روز). گروه آزمایش (Trp): تزریق DSS (5 روز) + داروهای درمانی (5 روز).
f) دوز DSS: 1.25 گرم بر کیلوگرم، مصرف خوراکی به مدت 5 روز.
g) در نقطه پایانی، حیوانات از طریق یک بیهوشی استنشاقی، ایزوفلوران آرام بخش شدند و از طریق تزریق داخل قلب اتانول (پنتوباربیتال) با 0.3 میلی لیتر بر کیلوگرم وزن بدن (BW) معدوم شدند.
h) بافت‌های کولون بلافاصله در محلول نمک سرد (154 میلی‌مولار، pH7.4) حاوی 0.1 میلی‌مولار فنیل متیل سولفونیل فلوراید (PMSF) شسته شدند و برای بافت‌شناسی نمونه‌برداری شدند یا برای تجزیه و تحلیل بعدی در نیتروژن مایع منجمد شدند.

2. نتایج

2.1 تجزیه و تحلیل نفوذپذیری روده

Figure 2. DSS-induced D-mannitol concentration in piglets was higher than that in the control group

شکل 2. غلظت D-مانیتول ناشی از DSS در خوک‌ها بیشتر از گروه کنترل بود.

غلظت D-مانیتول ناشی از DSS در خوک‌ها افزایش یافت و سد روده از بین رفت.

2.2 بخش رنگ آمیزی پاتولوژیک H&E

Figure 3. H&E pathological staining section (A: Neg group; B: Pos group)

شکل 3. بخش رنگ آمیزی پاتولوژیک H&E (A: گروه Neg؛ B: گروه Pos)

شدت التهاب کولون با امتیازدهی التهاب و اندازه‌گیری‌های بافت‌شناسی ارزیابی شد.در گروه Pos تحت درمان با DSS، ساختار فرورفتگی تحریف شد، سلول‌های التهابی به مخاط و زیر مخاط، آبسه فرورفتگی و التهاب فرورفتگی نفوذ کردند.

2.3 تشخیص عوامل التهابی

Figure 4. Detection of inflammatory factors

شکل 4. تشخیص عوامل التهابی

غلظت دو سیتوکین در گروه Pos تحت درمان با DSS افزایش یافت^[1].

3. پیوند به این منبع

[1] Connie J. Kim و همکاران. مجله بیوشیمی تغذیه 21 (2010) 468-475.

4. مورد موفق برای مدل سازی با Yeasen DSS

Yeasen کیفیت بالایی را ارائه می دهد DSS (Cat#60316ES): خلوص (98٪)، محتوای گوگرد 17-19٪، گوگرد آزاد <0.2٪، پشتیبانی شده توسط تعداد زیادی از داده های ادبیات.

جدول 1 ساخت انواع مدل های آنتریت با DSS

مدل	نمونه های مدل سازی	طرح مدلسازی	نتایج مدلسازی	از ارزیابی استفاده کنید
کولیت حاد	موش BALB/c ماده، 6-8 هفته، 25 گرم	3 تا 5 درصد DSS به مدت 7 روز متوالی آزادانه می نوشید	در روز 5 ظاهر شد طول کولون کوتاه شد، HE رنگ آمیزی شد و التهاب آشکار بود	سرعت قالب گیری سریع و زمان کوتاه است. مطابق با ویژگی های مدل کولیت حاد
کولیت حاد	موش C57BL/6، نر، 8 هفته، 20 گرم	3-5% DSS با گاواژ، تجویز مداوم	روز 5 رخ می دهد، کوتاه شدن روده بزرگ، کاهش وزن، وجود خون در مدفوع، اسهال	سرعت قالب بالا و مدت زمان کوتاه. مطابق با ویژگی های مدل کولیت حاد
کولیت مزمن	ماوس C57BL/6، نر، 8 هفته، 22 گرم	1-2٪ DSS با گاواژ، تجویز مداوم	روز 40 ظاهر می شود، کوتاه شدن روده بزرگ، کاهش وزن، خون در مدفوع، اسهال	سرعت قالب گیری بالا مطابق با ویژگی های مدل کولیت مزمن
سرطان روده بزرگ	ماوس C57BL/6، نر، 8 هفته، 21 گرم	1%-2% DSS بصورت آزاد به مدت 5 روز و به مدت 3 هفته	14 هفته با کوتاه شدن طول کولون، کاهش وزن، رنگ آمیزی HE و التهاب آشکار	سرعت قالب گیری بالا مطابق با ویژگی های مدل سرطان کولون

5. سفارش محصول

محصول پرفروش فقط به 1/3 قیمت M* با همان کارایی نیاز دارد و ما موجودی زیادی داریم.

جدول 2. سفارش محصول

نام محصول	گربه شماره	اندازه
نمک سدیم سولفات دکستران برای مدل سازی کولیت MW: 36000 ~ 50000	60316ES25	25 گرم
	60316ES60	100 گرم
	60316ES76	500 گرم
	60316ES80	1 کیلوگرم

6. مقالات منتشر شده با معرف های ما

[1] Li Zhao، Fei Wang، Zhengwei Cai، و همکاران. بهبود پلت فرم استفاده از دارو با هیدروژل مخاط چسب تزریقی برای درمان کولیت اولسراتیو [J]. ژورنال مهندسی شیمی.424(2021)130464.IF=16.744
[2] Lingjun Tong، Haining Hao، Zhe Zhang، و همکاران. وزیکول‌های خارج سلولی مشتق از شیر با تنظیم ایمنی روده و تغییر شکل میکروبیوتای روده، کولیت اولسراتیو را کاهش می‌دهند[J]. Theranostics.2021 11 (17): 8570-8586 IF=11.556
[3] Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. اسید والریک مشتق شده از روده در برابر صدمات ناشی از تشعشع محافظت می کند. میکروب های روده،. 2020 0.1-18.IF=10.245
[4] Jingjing Gan، Yuxiao Liu، Lingyu Sun، و همکاران. ذرات نوکلئوتیدی تحویل خوراکی از microfluidics را برای درمان بیماری التهابی روده تجویز کردند [J]. مواد کاربردی امروز. 2021 دسامبر؛ 25:101231 IF=10.041
[5] Mengmeng Xu، Ying Kong، Nannan Chen، و همکاران. شناسایی امضای ژن مرتبط با ایمنی و پیش‌بینی شبکه CeRNA در کولیت اولسراتیو فعال [J].Frontiers in Immunology.2022. 13: 855645. IF=7.561
[6] JialiDong، YuanLi، HuiwenXiao، و همکاران. میکروبیوتای دهان بر اثربخشی و پیش آگهی رادیوتراپی برای سرطان کولورکتال در مدل‌های موش تأثیر می‌گذارد [J]. Cell report.2021, 109886.
[7] هائو H ژانگ X، تانگ L، لیو Q، و همکاران. Q7 در مورد میکروبیوتای روده و کولیت اولسراتیو در موش [J].Frontiers in Immunology.2021.777147.IF=7.561
[8]Yaohua Fan، Yanqun Fan، Kunfeng Liu، et al.Edible Bird's Nest کولیت اولسراتیو ناشی از سدیم سولفات دکستران را در موش‌های C57BL/6J با بازگرداندن تعادل سلولی Th17/Treg بهبود می‌بخشد[J].Frontiers.
[9] Jia-Rong Huang، Sheng-Te Wang، Meng-Ning Wei، و همکاران. Piperlongumine کولیت موش و سرطان کولورکتال مرتبط با کولیت را کاهش می دهد [J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885. IF=7.561
[10] Gao X، Fan W، Tan L، و همکاران. ایزوفلاون های سویا با هدف قرار دادن مسیرهای التهابی ERα/NLRP3 [J] کولیت تجربی را بهبود می بخشد. مجله بیوشیمی تغذیه، 2020، 83.IF=6.048
[11] Lujuan Xing، Lijuan Fu، Songmin Cao، و همکاران. اثر ضد التهابی پپتیدهای مشتق شده از ژلاتین استخوان گاو در RA ناشی از LPSW264.7 سلول های ماکروفاژها و سولفات دکستران ناشی از سدیم C57BL/6 موش [J]. مواد مغذی 2022، 14، 1479. IF=5.717
[12] وانگ اس، هوانگ جی، قهوهای مایل به زرد KS، و همکاران Isosteviol Sodium کولیت مزمن ناشی از سولفات سدیم دکستران را از طریق تنظیم پروفایل متابولیک، پلاریزاسیون ماکروفاژها و مسیر NF-B [J] بهبود می بخشد. پزشکی اکسیداتیو و طول عمر سلولی. 2022,4636618. IF=5.076