1 مکانیسم عمل بلاستیسیدین S
بلاستیدین اس یک آنتی بیوتیک نوکلئوزیدی است که از Streptomyces griseochromogenes استخراج می شود که به طور خاص با ایجاد اختلال در تشکیل پیوندهای پپتیدی در ریبوزوم، سنتز پروتئین را در سلول های پروکاریوتی و یوکاریوتی مهار می کند. مکانیسم اثر آن شامل مسدود کردن هیدرولیز پپتیدیل-tRNA ناشی از فاکتورهای آزادسازی و افزایش اتصال tRNA به زیرواحد ریبوزومی بزرگ است، در نتیجه تشکیل پیوندهای پپتیدی را تا حد معینی مهار می کند.
بلاستیسیدین S یک حالت اثر سریع و قوی دارد و غلظت های بسیار کم آنتی بیوتیک می تواند منجر به مرگ سریع سلولی شود. این نه تنها مهار قابل توجهی از سنتز پروتئین در باکتری ها و یوکاریوت ها دارد، بلکه در برابر قارچ ها، نماتدها و سلول های تومور نیز فعالیت دارد. Pltocidin S اغلب برای غربالگری سلول های ترانسفکت شده حامل ژن های bsr یا BSD استفاده می شود.
2 کاربرد بلاستیدین اس
2.1 کشت سلولی و غربالگری
- سلول های پستانداران: بلاست S اغلب برای غربالگری سلول های ترانسفکت شده حامل ژن های bsr یا BSD استفاده می شود. این ژن‌های مقاومت، به ترتیب از B. cereus و Aspergillus، قادر به تبدیل مورانسیدین به مشتقات غیر ویروسی بودند، در نتیجه کشتن انتخابی سلول‌ها را بدون حمل ژن‌های مقاومت، با غلظت‌های کاری Blasticidin S در سلول‌های پستانداران از 1 تا 50 میکروگرم در میلی‌لیتر، ممکن می‌سازند.
| سیخوب | جیمخفی | Oسازمان | سیرسانه ulture | غلظت بلاستیدین S (μg/ml) |
| HeLa | انسان | رحم | DMEM | 3-10 |
| HEK293 | انسان | کلیه | DMEM | 3-10 |
| B16 | موش | ملانوما | RPMI | 3-10 |
| PC1.0 | همستر | آدنوکارسینوم | RPMI | 10-30 |
| CHO | همستر | تخمدان | DMEM | 5-15 |
- انتخاب باکتری: در کشت باکتری، غلظت توصیه شده 25-100 میکروگرم در میلی لیتر می تواند به سرعت باعث مرگ سلول های بدون ژن مقاومت شود.
E.coli نسبت به Blasticidin S کمی حساسیت کمتری دارد، اما ترانسفورماتورها به Blasticidin S متحمل هستند و می توان با محیط LB کم نمک (pH 8) در محدوده غلظت 50-100 میکروگرم در میلی لیتر Blasticidin S غربالگری کرد و pH بالا باعث بهبود فعالیت Blasticidin S می شود.
- سلول های گیاهی: همچنین برای آزمایش های انتقال ژن در سلول های گیاهی قابل استفاده است، bsr و BSD معمولاً به عنوان نشانگرهای غربالگری استفاده می شوند.
2.2 تحقیق در مورد سنتز پروتئین
- Blasticidin Swas برای مطالعه فرآیند سنتز پروتئین در سطح تشکیل پیوند پپتیدی، به ویژه در سلول‌های HEK293-T و سلول‌های HEK-D5 ساختارهای TLR-2 استفاده می‌شود.
2.3 خاصیت ضد قارچی
- همچنین دارای فعالیت ضد قارچی خاصی است که می تواند برای پیشگیری و درمان بلاست برنج استفاده شود. اثر ضد باکتری آن عمدتاً بر سنتز پروتئین تأثیر می گذارد و می تواند جوانه زنی هاگ، رشد هیف و تشکیل هاگ را مهار کند.
2.4 سایر برنامه ها
- Blasticidin Shas همچنین برای مطالعه اثر مهاری سلول های تومور استفاده می شود.
- همچنین به عنوان یک عامل انتخاب برای سلول های تبدیل شده حاوی ژن مقاومت bls، bsr یا BSD عمل می کند.
3 روش آزمایشی مربوط به بلاستیسیدین S (غربالگری ترانسفکتنت های پایدار پستانداران)
1) Blasticidin S به طور معمول در غلظت 10 میکروگرم در میلی لیتر استفاده می شود. سلول ها با پلاسمیدهای حامل ژن bsr یا BSD ترانسفکت شده و در محیط رشد نرمال حاوی بلاستیسیدین S انکوبه می شوند تا ترانسفکتنت های پایدار انتخاب شوند.
2) در 48 ساعت پس از ترانسفکشن، سلول ها را در محیط تازه حاوی غلظت مناسب Blasticidin S عبور دهید (توجه: آنتی بیوتیک ها زمانی که سلول ها در مرحله تقسیم فعال هستند بهترین عملکرد را دارند. اگر تراکم سلولی خیلی زیاد باشد، کارایی آنتی بیوتیک ها کاهش می یابد. هنگام تقسیم سلول ها، تلاقی نباید از 25٪ تجاوز کند).
3) هر 3-4 روز یکبار، محیط مصرف شده را بردارید و محیط تازه حاوی آنتی بیوتیک را اضافه کنید.
4) بعد از 7 روز تشکیل کلونی های سلولی را بررسی کنید. بسته به نوع سلول میزبان و کارایی انتقال/انتخاب، تشکیل کلنی ممکن است به یک هفته یا بیشتر نیاز داشته باشد.
5) 5-10 کلون مقاوم را به ظروف کشت سلولی 35 میلی متری انتقال داده و در محیط انتخابی به مدت 7 روز نگهداری کنید. پس از آن، سنجش سمیت سلولی را برای آزمایش انجام دهید.
4 توصیه محصول
Yeasen Biotech Blasticidin S (60218ES) به دو شکل پودر (1 گرم) و محلول (10 میلی گرم در میلی لیتر) موجود است.
| نام محصول | گربه# | مشخصات | ظاهر |
| بلاستیدین اس CAS: 3513-03-9 | 60218ES10 | 10 میلی گرم | محلول (10 میلی گرم در میلی لیتر) در HEPES بافر (pH 7.5) |
| 60218ES50 | 5×10 میلی گرم | ||
| 60218ES60 | 10×10 میلی گرم | ||
| 60218ES80 | 1 g | پودر (در هنگام استفاده محلول ذخیره 5-10 میلی گرم در میلی لیتر با آب استریل یا بافر تهیه کنید). |
5 مقالات منتشر شده با معرف های ما
[1] Mo J، Tan K، Dong Y، Lu W، Liu F، Mei Y، Huang H، Zhao K، Lv Z، Ye Y، Tang Y. هدف گیری درمانی محرک انکوژن EWSR1::FLI1 در سارکوم یوینگ از طریق مهار کمپلکس FACT. انکوژن. ژانویه 2023؛ 42 (1): 11-25. doi: 10.1038/s41388-022-02533-1. Epub 2022 Nov 10. PMID: 36357572. (اگر:8.0)
[2] Tan K، Mo J، Li M، Dong Y، Han Y، Sun X، Ma Y، Zhu K، Wu W، Lu L، Liu J، Zhao K، Zhang L، Tang Y، Lv Z. حلقه بازخورد مثبت SMAD9-MYCN یک وابستگی منحصر به فرد برای نوروبلاستوم تقویت شده با MYCN است. J Exp Clin Cancer Res. 2022 دسامبر 20; 41 (1): 352. doi: 10.1186/s13046-022-02563-3. PMID: 36539767; PMCID: PMC9764568.(اگر:11.3)
6 محصولات مرتبط
| نام محصول | گربه# | مشخصات |
| سیپروفلوکساسین هیدروکلراید | 60201ES05/25/60 | 5/25/100 گرم |
| آمپی سیلین، نمک سدیم | 60203ES10/60 | 10/100 گرم |
| داکسی سایکلین هیکلات | 60204ES03/08/25 | 1/5/25 گرم |
| کلرامفنیکل، درجه USP | 60205ES08/25/60 | 5/25/100 گرم |
| کانامایسین سولفات | 60206ES10/60 | 10/100 گرم |
| تتراسایکلین HCl تتراسایکلین هیدروکلراید (USP) | 60212ES25/60 | 25/100 گرم |
| وانکومایسین هیدروکلراید | 60213ES60/80/90 | 100 میلی گرم / 1 گرم / 5 گرم |
| نمک سولفات جنتامایسین | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 گرم |
| اسپکتینومایسین هیدروکلراید | 60215ES08 | 5 گرم |
| فلئومایسین (20 میلی گرم در میلی لیتر در محلول) | 60217ES20/60 | 20/5×20 میلی گرم |
| بلاستیسیدین S (بلاستیسیدین) | 60218ES10/60 | 10/10×10 میلی گرم |
| نیستاتین | 60219ES08 | 5 گرم |
| سولفات G418 (ژنتیکین) | 60220ES03/08 | 1/5 گرم |
| پورومایسین (محلول 10 میلی گرم در میلی لیتر) | 60209ES10/50/60/76 | 1 × 1 / 5 × 1 / 1 0 × 1 / 50 × 1 میلی لیتر |
| پورومایسین دی هیدروکلراید | 60210ES25/60/72/76/80 | 25/100/250/500 میلی گرم / 1 گرم |
| هیگرومایسین B (50 میلی گرم در میلی لیتر) | 60224ES03 | 1 گرم (20 میلی لیتر)/10×1 گرم (20 میلی لیتر) |
| هیگرومایسین B | 60225ES03/10 | 1/10 گرم |
| اریترومایسین | 60228ES08/25 | 5/25 گرم |
| تیمنتین | 60230ES07/32 | 3.2/10×3.2 گرم |
| اورئوباسیدین A (AbA) | 60231ES03/08/10 | 1/5×1/10×1 میلی گرم |
| سولفات پلی میکسین B | 60242ES03/10 | 1/10 MU |