نمای کلی

کوئلنترازین یک فلورسین طبیعی است که در طبیعت به وفور یافت می شود و مولکول ذخیره انرژی نور در اکثر موجودات درخشان دریایی (بیش از 75٪) است. کوئلنترازین می تواند به عنوان سوبسترا برای بسیاری از آنزیم های لوسیفراز، مانند لوسیفراز کلیه دریایی (Rluc)، لوسیفراز ترشح شده توسط گاوسیا (Gluc) و فوتوپروتئین ها از جمله آکوورین و اوبلیا استفاده شود. برخلاف سیستم لوسیفرین/لوسیفراز کرم شب تاب، سیستم کوئلنترازین/لوسیفراز به آدنوزین تری فسفات (ATP) نیاز ندارد و مطالعه بیوفلورسانس را در داخل بدن آسانتر می کند. بنابراین، کوئلنترازین معمولاً به‌عنوان یک بستر درخشان برای سنجش‌های ژنی گزارشگر مبتنی بر سنجش فلورسانس و سنجش‌های حیوانات زنده استفاده می‌شود.

عمده ترین کولنترازین تجاری که در حال حاضر استفاده می شود بومی کوئلنترازین است. همچنین مشتقات زیادی از کولنترازین مانند کوئلنترازین h، کوئلنترازین 400a، کوئلنترازین cp، کولنترازین f، کولنترازین hcp، کولنترازین n برابر سنتز می شوند. از نظر تئوری، این کوئلنترین ها را می توان در آزمایش های مشابه استفاده کرد، اما به دلیل تفاوت آنها در طول موج نوری، نفوذپذیری غشای سلولی و کارایی کوانتومی نور، آنها اثرات تجربی متفاوتی را در یک کاربرد نشان می دهند.

گونه کوئلنترازین

کوئلنترازین بومی

همچنین به عنوان اسید آزاد کوئلنترازین شناخته می شود. این سوبسترای بسیاری از آنزیم‌های لوسیفراز مانند Renilla luciferase (Rluc) و Gaussia luciferase (Gluc) است و همچنین کوفاکتور پروتئین درخشان چتر دریایی است.

سناریوهای کاربردی: تشخیص غلظت یون کلسیم در سلول های زنده، تجزیه و تحلیل گزارش ژن، مطالعه BRET (انتقال انرژی تشدید بیولومینسانس)، ELISA، HTS و تشخیص شیمی لومینسانس سطوح ROS در بافت ها یا سلول ها و غیره.

کوئلنترازین h

این سوبسترای بسیاری از آنزیم‌های لوسیفراز مانند Renilla luciferase (Rluc) و Gaussia luciferase (Gluc) است و همچنین کوفاکتور پروتئین درخشان چتر دریایی است.

سناریوی کاربردی: شدت نور بیش از 10 برابر بیشتر از Coelenterazine Native است که برای تجزیه و تحلیل ژن گزارشگر و تشخیص غلظت یون کلسیم در سلول های زنده مناسب است.

کوئلنترازین hcp

این یکی از مشتقات کوئلنترازین بومی است. شدت فلورسانس کمپلکس کوئلنترازین hcp-Aequorin 190 برابر بیشتر از کمپلکس بومی کوئلنترازین است، با بازده کوانتومی بالا و کلسیم سریع.²⁺ سرعت واکنش، که برای تشخیص سطوح یون کلسیم بسیار مناسب است.

سناریوی کاربردی: مناسب برای تشخیص سطح یون کلسیم

کوئلنترازین 400a

همچنین به عنوان DeepBlue CTM شناخته می شود، یکی از مشتقات Coelenterazine Native است. این یک بستر خوب برای رنیل لوسیفراز (Rluc) است و طول موج انتشار آن حدود 400 نانومتر است که تداخل کمی با سیگنال پروتئین گیرنده GFP دارد و نمی تواند توسط لوسیفراز ترشح شده گاوسیا (Gluc) اکسید شود.

سناریوی کاربردی: این بستر ترجیحی کوئلنترازین برای تحقیقات BRET (انتقال انرژی تشدید بیولومنسانس) است.

کوئلنترازین اف

این بستر ترجیحی برای اکورین است و تنها تفاوت ساختاری با کوئلنترازین بومی این است که گروه هیدروکسیل روی گروه فنل R-1 آن با فلوئور (F) جایگزین شده است.در مقایسه با تعداد کل فوتون های تولید شده توسط مجموعه کوئلنترازین Native-Apoaequorin، این کمپلکس تنها 80 درصد انرژی فوتون را تولید می کند. مزیت این است که زمان بسیار کمی برای تولید کمپلکس اکورین نیاز دارد. هنگامی که با Ca در تماس است²⁺نور را به سرعت و با بازدهی بالا ساطع می کند و شدت تولید آن 20 برابر کوئلنترازین بومی است. علاوه بر این، نفوذپذیری سلولی خوبی دارد.

سناریوی کاربردی: زمانی که کلسیم بسیار بالا باشد²⁺ حساسیت تشخیص برای مطالعه آزمایش های بازسازی پروتئین چتر دریایی لازم است، استفاده از بسترها توصیه می شود.

کوئلنترازین cp

این یک مشتق از Coelenterazine Native است. کمپلکس فوتوپروتئینی که با پروتئین Apoaequorin تشکیل شده است، 15 برابر درخشان تر از Coelenterazine Native است و کلسیم سریع تری دارد.²⁺ سرعت واکنش

سناریوی کاربردی: می توان از آن برای غربالگری با کارایی بالا داروهای گیرنده های جفت شده با پروتئین G (GPCRs) استفاده کرد.

کوئلنترازین n

شدت فلورسانس آن در تمام مشتقات کوئلنترازین ضعیف تر است و سرعت واکنش به کلسیم کمتر است.²⁺ به طور قابل توجهی کمتر از کوئلنترازین بومی است.

کوئلنترازین E

یک مشتق از Coelenterazine Native که از نظر ساختاری یک گروه اتیل بیشتر از Coelenterazine Native است. به عنوان یک بستر برای Renilla luciferase، شدت فلورسانس آن 137٪ از Coelenterazine Native است. کوئلنترازین e دارای واکنش پذیری بالا در شرایط آزمایشگاهی پروتئین شب تاب چتر دریایی و پیک انتشار دوگانه (405 و 465) است که تعیین کلسیم را امکان پذیر می کند.²⁺ غلظت در محدوده pCa5-7 با نسبت طول موج های دوگانه. این روش مستقل از غلظت کوئلنترازین است، بنابراین دقت تشخیص را بهبود می بخشد. از آنجایی که نفوذپذیری سلولی این مشتق ضعیف است، این مزیت را برای آزمایش های مربوط به داخل سلولی ندارد.

سناریوی کاربردی: بستر بسیار مفید برای Ca²⁺ تشخیص حساسیت کم

کوئلنترازین 2-متیل

این یک آنتی اکسیدان سلولی قدرتمند است. این می تواند به طور موثر بر روی گونه های اکسیژن فعال درون سلولی، مانند اکسیژن منفرد و آنیون های سوپراکسید عمل کند، و استرس اکسیداتیو یک پیوند میانی در فرآیند آپوپتوز است. علاوه بر این، این ترکیب دارای ویژگی های غیر سمی و نفوذپذیری غشا است، بنابراین می توان از آن برای مطالعه آپوپتوز استفاده کرد.

کاربرد محصول:

1) به عنوان یک ابزار مهم برای مطالعه آپوپتوز.

2) همچنین می تواند برای لومینسانس شیمیایی برای تشخیص سطوح آنیون سوپراکسید و آنیون پراکسی نیتریت استفاده شود.

نام محصول	وزن مولکولی	فرمول مولکولی	Em (nm)	RLC*	شدت نسبی	زمان نیمه برخاستن (میلی‌ثانیه)**
بومی کوئلنترازین	423.46		466	1.00	1	6-30
کوئلنترازین h	407.48		466	0.75	16	6-30
کوئلنترازین hcp	399.48		445	0.65	500	2-5
کوئلنترازین cp	415.48		442	0.63	28	2-5
کوئلنترازین اف	425.46		472	0.80	20	6-30
کوئلنترازین n	457.52		468	0.25	0.15	6-30
کوئلنترازین E	449.5		405 و 465	0.5	4	0.15-0.3
2- متیل کولنترازین	331.37		/	/	/	/
کوئلنترازین 400 a	391.48		400	/	/	/

اطلاعات محصول

نام محصول	شماره کاتالوگ	مشخصات
دی لوسیفرین، نمک سدیم	40901ES01/02/03/08	100 میلی گرم / 500 میلی گرم / 1 گرم / 5 گرم
دی لوسیفرین، نمک پتاسیم	40902ES01/02/03/09	100 میلی گرم / 500 میلی گرم / 1 گرم / 5 گرم
دی-لوسیفرین کرم شب تاب، اسید آزاد	40903ES01/02/03	100 میلی گرم / 500 میلی گرم / 1 گرم
کوئلنترازین بومی	40904ES02/03/08	1×500μg/2×500μg/5mg
کوئلنترازین 400a	40905ES02/03	1×500 میکروگرم/2×500 میکروگرم
کوئلنترازین h	40906ES02/03/08	1×500μg/2×500μg/5mg
کوئلنترازین اف	40908ES02/03	1×500 میکروگرم/2×500 میکروگرم

ادبیات منتشر شده از کاربران (آمار ناقص)

1. Xie J، Zheng H، Chen S، Shi X، Mao W، Wang F. طراحی منطقی یک گزارشگر فعال برای تصویربرداری کمی از اتصال نابجای RNA در داخل بدن. روش‌های Mol Ther Clin Dev. 2020؛ 17:904-911. منتشر شده در 18 آوریل 2020.

2. Lin GY، Lin L، Cai XQ، و همکاران. کمپین غربالگری با کارایی بالا یک آگونیست مولکولی کوچک گیرنده پپتیدی خانواده ریلاکسین 4 را شناسایی می کند [منتشر شده آنلاین قبل از چاپ، 31 مارس 2020]. Acta Pharmacol Sin. 2020؛ 10.1038/s41401-020-0390-x.

3. Shao L، Chen Y، Zhang S، Zhang Z، Cao Y، Yang D، Wang MW. اثرات تعدیل کننده RAMP ها بر پروفایل های سیگنالینگ خانواده گیرنده گلوکاگون، Acta Pharmaceutica Sinica B.

4. هایفنگ ژنگ، سی چن، شینان وانگ، جینرونگ زی، جی تیان، و فو وانگ.اینترون گزارشگر بیولومینسانس را برای تصویربرداری بلادرنگ از اتصال پیش mRNA در افراد زنده حفظ کردند.CAnal. شیمی. 2019، 91، 12392-12398

5. Peiyu Xu، Sijie Huang، Chunyou Mao، ...، Xi Cheng، Yan Zhang، H. Eric Xu. ساختارهای مجتمع‌های گیرنده دوپامین D3-Gi انسانی. 2021، سلول مولکولی 81، 1147-1159

6. موکسوان جی، شینان وانگ، هایفنگ ژنگ، ونجی مائو، شیائوروی شی، سی چن، چو تانگ، و فو وانگ سی. گزارشگر مخفی برای پایش خون مرگ سلولی پیروپتوتیک. مقعدی شیمی.

7. F Hu، Y Zhang، Q Liu، Z Wang. PurA Edwardsiella piscicida را برای فرار از فعال سازی سیگنالینگ NF-kB تسهیل می کند. ایمونولوژی ماهی و صدف، 2022 - الزویر

8. هایفنگ ژنگ، شینان وانگ، سی چن، شیائوروی شی، جینرونگ زی، ونجی مائو، جی تیان و فو وانگ. تصویربرداری زیستی کاربردی در زمان واقعی از دینامیک microRNA ویژه نورون در طول تمایز عصبی با استفاده از یک گزارشگر لوسیفراز دوگانه. ACS Chem. Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614