معرفی محصول

کلاژناز یک کلاس از اندونوکلئازها است که می تواند به طور خاص توالی Pro-X-Gly-Pro را تشخیص دهد (که اغلب در کلاژن رخ می دهد و به ندرت در پروتئین های دیگر یافت می شود) و پیوند پپتیدی بین اسید آمینه خنثی (X) و گلیسین (Gly) را در این توالی قطع می کند و می تواند کلاژن بافت پیوندی را هیدرولیز کند.

بسیاری از پروتئازها قادر به هیدرولیز پپتیدهای کلاژن تک رشته ای و دناتوره شده هستند، اما کلاژناز تنها پروتئازی است که می تواند الیاف کلاژن طبیعی را با ساختار ابرپیچ سه رشته ای تجزیه کند و به طور گسترده در بافت های همبند یافت می شود، که قوی ترین آن ها "خام" collagenerobicloticum collagenerobicloticum histobacter ترشح می شود.

Yeasen collagenase از کلستریدیوم هیستولیتیکوم مشتق شده است که یک آنزیم عصاره "درشت" است که نه تنها حاوی کلاژناز است که می تواند کلاژن طبیعی و الیاف شبکه ای را تجزیه کند، بلکه حاوی برخی پروتئازهای دیگر مانند پلی ساکاریدازها، لیپازها و غیره است که می تواند به طور موثری در سایر پروتئین های بافت سلولی، پلی چارتریکس و پروتئین های اضافی سلولی، پلی اسکیل ها هیدرولیز کند. و بافت اپیتلیال، بنابراین برای هضم بافت مناسب تر است.

در حال حاضر کلاژناز باکتریایی موجود در بازار با توجه به تفاوت در فعالیت کلاژناز عمدتاً به پنج نوع تقسیم می شود: کلاژناز نوع I، نوع II، نوع III، نوع IV و نوع V.

انتخاب کلاژناز

نام محصول	ظاهر	فعالیت آنزیمی	دامنه کاربرد
نوع I کلاژناز)	پودر کریستالی قهوه ای یا خرمایی	≥250 U/mg جامد	حاوی (کلاژناز، کازئیناز، کلستریدیا و تریپسین) فعالیت برای جداسازی سلول های اپیتلیال، ریه، چربی و بافت آدرنال.
نوع II کلاژناز)	پودر کریستالی قهوه ای یا خرمایی	≥125 U/mg جامد	حاوی فعالیت کلستریداز بیشتری است و برای جداسازی سلول های بافت کبد، استخوان، تیروئید، قلب و غدد بزاقی مناسب است.
نوع III کلاژناز)	پودر کریستالی قهوه ای یا خرمایی	≥100 U/mg جامد	حاوی فعالیت پروتئولیتیک کم است که برای قسمت اتصال بافت گوارشی موثر است و اغلب برای جداسازی سلول های بافت پستانداران استفاده می شود.
نوع IV کلاژناز)	پودر کریستالی قهوه ای یا خرمایی	≥125 CDU/mg جامد*	حاوی فعالیت کم تریپسین است و معمولاً در آماده سازی سلول برای یکپارچگی جزایر و گیرنده استفاده می شود
نوع V کلاژناز)	پودر کریستالی قهوه ای یا خرمایی	≥125 CDU/mg جامد*	حاوی حداقل 7 جزء پروتئاز است که می تواند برای جداسازی بافت جزایر پانکراس و جداسازی بافت همبند به سلول های منفرد استفاده شود.

*CDU = واحدهای هضم کلاژن

ویژگی های محصول

1. راندمان هضم بالا: عصاره آنزیمی خام کلستریدیوم هیستولیتیکوم کارایی هضم بالایی برای بافت ها دارد.
2. وابسته به فعال کننده ها: کلاژناز باید به فعالیت آنزیم های فعال کننده مانند کاتیون های دو ظرفیتی مانند کلسیم تکیه کند.²⁺و روی²⁺.
3. تحت تأثیر مهارکننده ها: مهارکننده های کلاژناز عبارتند از EDTA، EGTA و غیره. دومی یون های فلزات سنگین (Hg²⁺، سرب²⁺، سی دی²⁺) همچنین برخی از عوامل شیمیایی مانند سیستئین، هیستیدین، DTT، 2- مرکاپتواتانول، o-phenanthroline و غیره وجود دارند که اثرات مهاری بر روی کلاژناز نیز دارند.
4. مقاومت تداخلی قوی: کلاژن تحت تأثیر سرم مورد استفاده برای کشت سلول ها قرار نمی گیرد.

اقدامات احتیاطی برای استفاده

1. استفاده: در محلول های نمکی هنک، ارل یا سایر محلول های نمک متعادل حل می شود، غلظت کاری توصیه شده 0.05٪ ~ 0.5٪ (w/v) است.
2. دمای نگهداری: 2-8 درجه سانتی گراد
3. پیشنهاداتی برای استفاده:

(1) برای مطالعه ساختار کلاژن و بیوسنتز، فرآورده های کلاژناز با خلوص بالاتر اغلب استفاده می شود و هیچ فعالیت پروتئولیتیک دیگری استفاده نمی شود.

(2) برای تفکیک بافت، فرآورده های کلاژناز خام، مانند الاستاز، تریپسین یا پاپائین، اغلب استفاده می شود.

سوالات متداول

1. هضم ضعیف در طول آزمایش

(1) اگر ناشی از فعالیت آنزیمی ضعیف یا یون های ناکافی کلسیم باشد، کلاژناز باید در دمای پایین و شرایط خشک نگهداری شود و محلول کلاژناز باید پس از جداسازی منجمد شود.

(2) اگر ناشی از یون های کلسیم ناکافی باشد، غلظت یون های کلسیم در محلول کلاژناز باید 5 میلی مولار باشد.

2. مرگ سلولی در حین استفاده رخ می دهد

(1) اگر پروتئاز بیش از حد وجود داشته باشد، زمان تماس پروتئاز باید کاهش یابد یا آلبومین یا سرم غیرفعال اضافه شود.

(2) اگر pH تغییر کند، باید از یک بافر (مثلا HBSS) استفاده شود. مرتباً pH خود را بررسی و تنظیم کنید

(3) اگر اکسیژن خیلی کم باشد، محلول گوارشی باید با هوای استریل تهویه شود

3. سلول ها در طول آزمایش آسیب دیدند

اگر ناشی از پروتئاز بیش از حد باشد، باید مقدار پروتئاز را کاهش داد یا آلبومین یا سرم غیرفعال را اضافه کرد.

سفارش دادن

شماره کاتالوگ	نام محصول	اندازه
40507ES60	کلاژناز I	100 میلی گرم، 1 گرم
40508ES60	کلاژناز II	100 میلی گرم، 1 گرم
40509ES60	کلاژناز III	100 میلی گرم
40510ES60	کلاژناز IV	100 میلی گرم، 1 گرم
40511ES60	کلاژناز V	100 میلی گرم

توصیه های محصول مرتبط

شماره کاتالوگ	نام محصول	اندازه
40123ES60	PerfCel™l Trypsin-EDTA (0.25%)، فنل قرمز	100 میلی لیتر
40124ES60	PerfCell™ تریپسین بدون EDTA (0.25 درصد، فاقد فنل قرمز است	100 میلی لیتر
40126ES60	PerfCell™ تریپسین (0.25%)، فنل قرمز	100 میلی لیتر
40127ES60	PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%)، فنل قرمز	100 میلی لیتر
40101ES25	تریپسین 1:250 (پودر)	25 گرم
40512ES10/60	تریپسین نوترکیب (پودر) PerfCell™	10 میلی گرم / 100 میلی گرم
20416ES60	تریپسین نوترکیب (MS-SAFE)	100 میکروگرم
40134ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 میلی لیتر
40135ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 میلی لیتر
40506ES60	تهمت زدن	100 میلی لیتر
40104ES60/80	Dispase II	100 میلی گرم در 1 گرم