پس زمینه - ROS چیست

گونه‌های اکسیژن فعال (ROS) یک محصول طبیعی متابولیسم سلولی است - یک مولکول فعال زیستی حاوی اکسیژن، از جمله پراکسید، سوپراکسید، رادیکال هیدروکسیل، اکسیژن منفرد و اکسیژن α و غیره، که نقش تنظیمی مهمی در مسیرهای سیگنال‌دهی سلولی و رونویسی، آپوفا، سرطان و غیره دارند.

تأثیر غلظت ROS بر سلول ها - چرا ROS را شناسایی می کنیم؟

در سطوح پایین گونه‌های اکسیژن فعال، ROS در سیگنال‌دهی و تنظیم درون سلولی به‌عنوان «پیام‌رسان ردوکس» نقش دارد. با این حال، تحت تنش های محیطی (به عنوان مثال، پرتوهای یونیزه، قرار گرفتن در معرض گرما، اشعه ماوراء بنفش، هیپوکسی، و غیره)، سطوح ROS به طور چشمگیری افزایش می یابد، که ممکن است باعث آسیب DNA، مهار بیان ژن، منجر به تا شدن نادرست پروتئین شود و حتی بر سنتز پروتئین آسیب جدی وارد کند، که به عنوان استرس اکسیداتیو شناخته می شود.

هنگامی که سطوح ROS از ظرفیت دفاع آنتی اکسیدانی درون زا فراتر رود، تعادل ردوکس مختل می شود که منجر به تغییرات ساختاری یا ساختاری در DNA، لیپیدها، پروتئین ها و در نهایت مرگ سلولی می شود.

سطح ROS یک سیگنال مهم از آسیب سلولی ناشی از عملکردهای فیزیولوژیکی طبیعی و عوامل محیطی است و تشخیص سطح ROS درون سلولی برای درک مسیرهای سیگنالینگ و مکانیسم‌های بالقوه اثر برخی داروها اهمیت زیادی دارد. بنابراین، انتخاب پروب های مناسب برای تشخیص ROS نقش مهمی در تحقیقات مکانیسم بیماری و غربالگری دارو ایفا می کند.

تشخیص ROS چگونه کار می کند؟

را کیت سنجش گونه های اکسیژن واکنشی (CAT# 50101ES01) متداول ترین روش مورد استفاده برای تعیین کمیت سطوح گونه های اکسیژن فعال درون سلولی بر اساس تغییرات در شدت فلورسانس رنگ فلورسنت DCFH-DA (2،7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate) است.

DCFH-DA خود فلورسانس ندارد و می تواند آزادانه از غشای سلولی عبور کند و پس از ورود به سلول توسط استرازهای داخل سلولی هیدرولیز شده و DCFH تولید می کند. با این حال، DCFH نمی تواند به غشای سلول نفوذ کند، و باعث می شود کاوشگر به راحتی در سلول برچسب گذاری و جمع شود. گونه های اکسیژن فعال درون سلولی قادر به اکسید کردن DCFH غیر فلورسنت برای تشکیل DCF فلورسنت هستند. شدت فلورسانس سبز DCF به طور مستقیم با سطح گونه های اکسیژن فعال درون سلولی متناسب است و سطح گونه های اکسیژن فعال درون سلولی را می توان با تشخیص فلورسانس DCF شناخت.

تحت شرایط طول موج تحریک 488 نانومتر و طول موج گسیل 525 نانومتر، فلورسانس DCF توسط میکروسکوپ فلورسانس، میکروسکوپ کانفوکال لیزری، اسپکتروفتومتر فلورسانس، فلورسانس فلورسانس، ریزپلیت خوان فلورسانس، تعیین سطح فلورسانس به میزان بازتابنده سلول، تشخیص داده شد. گونه های اکسیژن

ادبیات منتشر شده توسط مشتریان با استفاده از این محصول (چند نمونه)

تا سپتامبر 2022، در مجموع 164 مقاله در کیت تشخیص گونه‌های اکسیژن فعال ROS (50101ES01) با ضریب تأثیر کل 913.72 منتشر شده است.

اثر تولید ROS بر پلاریزاسیون ماکروفاژها و کشتن سلول های تومور (PMID: 35665496; PMID: 35301299; PMCID: PMC8931093PMCID: PMC9353410.

سوالات متداول

Q1: کدام نمونه ها برای آزمایش ROS مناسب هستند؟

A1: به طور کلی برای تشخیص سلول های پستانداران استفاده می شود و فقط برای تشخیص گونه های اکسیژن فعال در سلول های زنده یا in vivo مناسب است.

Q2: آیا کیت تست ROS برای تشخیص در سرم یا پلاسما مناسب است؟

A2: برای تشخیص ROS در سرم یا هموژن بافت مناسب نیست. سوسپانسیون های تک سلولی تهیه شده از بافت تازه را می توان امتحان کرد.

Q3: آیا گیاهان یا باکتری ها قابل شناسایی هستند؟

A3: فقط برای تشخیص گونه های فعال اکسیژن در سلول های زنده یا in vivo مناسب است، زیرا نیمه عمر رادیکال های هیدروکسیل و رادیکال های سوپراکسید اکسیژن بسیار کوتاه است و فقط برای تشخیص سلول های زنده مناسب است. گیاهان یا باکتری‌هایی که پس از تهیه پروتوپلاست‌ها می‌توانند برای تشخیص استفاده شوند، این کیت نمی‌تواند ROS را در داخل بدن شناسایی کند.

Q4: چگونه می توانم از پس زمینه فلورسانس بیش از حد اجتناب کنم؟

A4: پس از انکوباسیون پروب، مطمئن شوید که پروب های باقیمانده که وارد سلول نشده اند را بشویید.

Q5: آیا می توانم مقدار ROS را در سلول های طبیعی تشخیص دهم؟

A5: محتوای گونه های اکسیژن فعال در سلول های طبیعی بسیار کم است و اثر تشخیص ممکن است خیلی خوب نباشد.

Q6: مقادیر فلورسانس منفی و مثبت یکسان هستند، چه اتفاقی می افتد؟

A6: ممکن است به دلیل غلظت پروب اضافه شده بسیار زیاد باشد، توصیه می شود غلظت پروب را 5-7.5 میکرومولار کاهش دهید و زمان انکوباسیون: 15-20 دقیقه.

Q7: فلورسانس کنترل مثبت ضعیف است، چه اتفاقی می افتد؟

A7: Rosup کنترل مثبت معمولاً در 100 میکرومولار متمرکز می‌شد و افزایش قابل توجهی در گونه‌های اکسیژن فعال 30 دقیقه تا 4 ساعت پس از تحریک مشاهده شد. اثر کنترل مثبت گونه های اکسیژن فعال ممکن است بین سلول های مختلف بسیار متفاوت باشد. اگر افزایش ROS در 30 دقیقه پس از تحریک مشاهده نشد، می توان زمان القاء را افزایش داد یا غلظت Rosup را به طور مناسب افزایش داد.

ج8: همون پروب تقسیم نشده، 5 بار اول خیلی خوبه، این بار رنگ نمیشه، قضیه چیه؟

Q8: 1. وضعیت سلولی خوب نیست و در نتیجه کارایی رنگ‌آمیزی کم می‌شود. 2. زمان القای داروی مثبت بسیار کوتاه است و سطح گونه های اکسیژن فعال را می توان با انکوباسیون در دمای 37 درجه سانتی گراد در تاریکی به مدت 30 دقیقه تا 4 ساعت به طور قابل توجهی افزایش داد. 3. پروب بیش از 4 بار منجمد و ذوب شده است، راندمان رنگ‌آمیزی کاهش می‌یابد و سیگنال فلورسانس ناپایدار است (گاهی قوی، گاهی ضعیف و به راحتی خاموش می‌شود). توصیه می‌شود که پروب‌ها را به مقدار کافی تقسیم کرده و در یک فریزر -20 درجه سانتی‌گراد محافظت شده از نور نگهداری کنید تا از تکرار چرخه‌های انجماد و ذوب جلوگیری شود.

Q9: از چه ابزارهایی می توان برای آزمایش استفاده کرد؟

A9: میکروسکوپ فلورسانس، میکروسکوپ کانفوکال لیزری، اسپکتروفتومتر فلورسانس، خواننده میکروپلیت فلورسانس، فلوسیتومتر و غیره می توانند مقادیر فلورسانس را تشخیص دهند.

انتشارات تحقیقات علمی منتشر شده توسط مشتریانی که از این محصول استفاده می کنند (جزئی)

[1] Zhong D، Jin K، Wang R، Chen B، Zhang J، Ren C، Chen X، Lu J، Zhou M. هیدروژل مبتنی بر ریزجلبک برای بیماری التهابی روده و اضطراب و افسردگی مرتبط با آن. Adv Mater. 26 ژانویه 2024: e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. Epub جلوتر از چاپ. PMID: 38277492.   IF: 29.4

[2] ژانگ ام و همکاران اجباری کردن سلول‌های ایمنی توسط اگزوزوم مشتق از NK (LASNEO) خاموش‌کننده فعال با نور برای ریشه‌کنی تومور سینرژیک. Adv Sci (Weinh). 2022 Aug;9 (22): e2201135. doi: 10.1002/advs.202201135. Epub 2022 4 ژوئن. IF: 16.806

[3] ژانگ دی و همکاران ریزحامل های خوراکی مبتنی بر ریزجلبک برای هموستاز میکروبیوتای روده و محافظت از روده در سرطان رادیوتراپی Nat Commun. 17 مارس 2022؛ 13 (1): 1413. doi: 10.1038/s41467-022-28744-4. PMID: 35301299. IF: 14.919

[4] جیائو دی و همکارانBMSCهای تحریک‌شده با اکسید گرافن کاهش‌یافته زیست سازگار، از طریق ارتقاء استئوکلاستوژنز و رگ‌زایی، باعث تسریع در بازسازی استخوان و حرکت ارتودنسی دندان می‌شوند. Bioact Mater. 6 فوریه 2022; 15:409-425. doi: 10.1016/j.bioactmat.2022.01.021. PMID: 35386350; PMCID: PMC8958387.   IF: 14.593
[5] گوو جی و همکاران شیمی درمانی انتخابی فضایی نانومکعب CuFe5O8 برای عفونت های مرتبط با ایمپلنت. نانو ACS. 2020 اکتبر 27; 14 (10): 13391-13405. doi: 10.1021/acsnano.0c05255. Epub 2020 Sep 22. PMID: 32931252.  IF: 14.588

[6] یانگ سی و همکاران درمان فتودینامیک و فوتوترمال با واسطه Nanorod TiO2 با فسفر قرمز برای کارسینومای سلول کلیوی. کوچک. 2021 ژوئیه؛ 17 (30): e2101837. doi: 10.1002/smll.202101837. Epub 2021 Jun 19. PMID: 34145768.  IF:13.281

[7] شیائولو چن و همکاران نانوذرات تحویل تقویت‌کننده آبشاری محصور در شبکه‌های فلزی-فنولی که بر مقاومت دارویی سرطان از طریق گرسنگی/شیمی‌درمانی/شیمی‌درمانی ترکیبی غلبه می‌کنند. مجله مهندسی شیمی. اوت 2022; 442:136221.   IF: 13.273

[8] هائو دینگ و همکاران سلول‌های بنیادی مزانشیمی محصور شده در یک هیدروژل تزریقی گونه‌های اکسیژن فعال - مهارکننده و تولید کننده O2 برای درمان سکته قلبی. مجله مهندسی شیمی. 2022.133511:1385-8947.  IF: 13.273

[9] یو اچ و همکاران نانوکاتالیست آبشاری سه گانه با منبع اکسیژن فعال با لیزر و افزایش فتوترمال برای درمان کاتالیزوری موثر در برابر تومور هیپوکسیک. بیومواد. ژانویه 2022; 280:121308. PMID: 34896860.  IF: 12.479

[10] سان دی و همکاران یک نانوفرمولاسیون مبتنی بر سیکلودکسترین به تحویل همزمان جین سنوزید Rg3 و کوئرستین برای شیمی-ایمونوتراپی در سرطان کولورکتال منجر می شود. Acta Pharm Sin B. 2022 Jan; 12 (1): 378-393. PMID: 35127393.   IF: 11.614

[11] Xiong Y و همکاران. نانوذرات زیست پلیمری قابل فعال سازی خاص تومور که توسط پیش داروی نشاسته هیدروکسی اتیل برای درمان مشترک سرطان خود تقویت شده تثبیت شده اند. ترانوستیک ها 2022 ژانویه 1؛ 12 (2): 944-962. PMID: 34976222. IF: 11.556

[12] گائو جی و همکاران "نانو قایق" فوق مولکولی هدفمند میتوکندری که به طور همزمان متابولیسم انرژی دوگانه را برای شیمی درمانی انتخابی و هم افزایی تومور مهار می کند. ترانوستیک ها 2022 ژانویه 1؛ 12 (3): 1286-1302. PMID: 35154487.   IF: 11.556

[13] ژونگ دی و همکاران کلسیم فسفات ریزجلبک های فتوسنتزی را برای مقابله با تومور هیپوکسیک با تعدیل درجا هیپوکسی و رادیو فوتوتراپی آبشاری مهندسی کرد. ترانوستیک ها 2021 ژانویه 22؛ 11 (8): 3580-3594. PMID: 33664849. IF: 11.556

[14] سان جی و همکاران سمیت سلولی خاکستر بادی سوزاندن زباله های جامد شهری تثبیت شده/جامد. جی خطر ماتر. 15 فوریه 2022؛ 424 (Pt A): 127369. doi: 10.1016/j.jhazmat.2021.127369. Epub 2021 Sep 29. PMID: 34879564.  IF: 10.588

[15] ژو سی و همکاران هیدروژل حساس به حرارت چند منظوره برای تعدیل ریزمحیط در استئوآرتریت با پلاریزاسیون ماکروفاژها و پاکسازی RONS. J نانوبیوتکنولوژی. 7 مه 2022؛ 20 (1): 221. IF: 10.435

[16] پان ایکس و همکاران نانوکره اکسید روی برای مهار سولفید هیدروژن و فروپتوز سرطان کولورکتال. J نانوبیوتکنولوژی. 2021 نوامبر 27; 19 (1): 392. doi: 10.1186/s12951-021-01069-y. PMID: 34838036; PMCID: PMC8626909.   IF: 10.435

[17] او جی و همکاران نانوپوسته‌های طلا-نقره باعث بهبود زخم ناشی از عفونت باکتری‌های مقاوم به دارو می‌شوند و نظارت را از طریق تصویربرداری پراکندگی رامان بهبود یافته سطحی امکان‌پذیر می‌سازند. بیومواد. مارس 2020; 234:119763. PMID: 31978871.   IF: 10.317

[18] چنگ کیو و همکاران نانودرمان‌ها با هموستاز ردوکس سلولی برای درمان فتودینامیک بسیار بهبود یافته تداخل می‌کنند. بیومواد. دسامبر 2019; 224:119500. doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119500. Epub 2019 Sep 17. PMID: 31557591.  IF: 10.273

[19] ژونگ دی و همکاران α مکعب تجمع یافته با لیزر-Fe2O3@Au nanoکامپوزیت ها برای تصویربرداری رزونانس مغناطیسی و درمان هم افزایی پرتوهای فتوترمال/افزایش یافته بیومواد. اکتبر 2019; 219:119369. PMID: 31351244.   IF: 10.273

[20] سان سی و همکاران حذف سلنوکسید استرس اکسیداتیو را برای بهبود اثر ضد تومور دستکاری می کند. بیومواد. دسامبر 2019; 225:119514. doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119514. Epub 2019 Sep 24. PMID: 31569018.    IF: 10.273

محصولات توصیه شده

نام محصول

شماره کاتالوگ

اندازه

کیت سنجش گونه های اکسیژن واکنشی

50101ES01

1 کیت (1000 تست)

تحقیق