تشخیص، پیشگیری و حذف مایکوپلاسما - همه در یک مرحله!

مایکوپلاسما

مایکوپلاسما که به عنوان مایکوپلاسم نیز شناخته می شود، کوچکترین و ساده ترین پروکاریوت کشف شده تا به امروز با قطر 0.1 تا 0.3 میکرومتر است. می تواند از فیلترها عبور کند و پلئومورفیسم بالایی از خود نشان می دهد و به اشکال مختلف مانند کروی، میله ای شکل، رشته ای و منشعب ظاهر می شود. در آزمایشگاه ها و تولید بیودارویی، کشت های سلولی مستعد آلودگی به مایکوپلاسما هستند. بر اساس متون، میزان بروز آلودگی مایکوپلاسما در رده های سلولی ذخیره شده تقریباً 15 تا 35 درصد است و در صنعت بیوداروسازی از 0.44 تا 6.70 درصد متغیر است. ^[1].

شکل 1: مورفولوژی مایکوپلاسما

تاثیر آلودگی مایکوپلاسما

تشخیص، پیشگیری و حذف آلودگی باکتریایی و قارچی نسبتاً آسان است، اما تشخیص آلودگی مایکوپلاسما دشوار است. حتی در تراکم رشد تا 10^7-10^9 CFU/ml، ممکن است هیچ نشانه آشکاری از آلودگی (مانند کدورت یا تغییرات pH) وجود نداشته باشد. آلودگی مایکوپلاسما می تواند منجر به تغییرات مختلفی در سلول ها شود (شکل 2 را ببینید).

Figure 2: Changes in Cell States After Mycoplasma Contamination

شکل 2: تغییرات در حالات سلولی پس از آلودگی مایکوپلاسما

سناریوهای کاربردی برای تشخیص مایکوپلاسما

Application Scenarios for Mycoplasma Detection

منابع معمولی آلودگی مایکوپلاسما

آلودگی متقابل بین سلول ها؛
آلودگی محیط کار یا تجهیزات آزمایشی؛
تکنیک آسپتیک ضعیف توسط آزمایشگر.
آلودگی محیط های کشت یا سایر معرف ها؛
آلودگی بافت یا اندام اصلی که برای آماده سازی سلول استفاده می شود.

وقتی کشت سلولی با آلودگی مایکوپلاسما مواجه شد چه باید کرد؟

Figure 3: Total Solution for Mycoplasma Contamination

شکل 3: محلول کل برای آلودگی مایکوپلاسما

راه حل سه در یک برای آلودگی مایکوپلاسما در سلول ها

1. تشخیص مایکوپلاسما

تشخیص مایکوپلاسما ایزوترمال یک مرحله ای:

Yeasenمعرف تشخیص مایکوپلاسما ایزوترمال یک مرحله ای از فناوری تقویت همدما منحصر به فرد استفاده می کند، که تمایز رنگ قوی تری را ارائه می دهد - از آبی-بنفش (منفی) تا آبی آسمانی (مثبت) - که شناسایی بصری را آسان تر می کند. این شامل اجزای ضد آلودگی برای از بین بردن موارد مثبت کاذب است.

Figure 4: Operation Process of One-Step Mycoplasma Detection

شکل 4: فرآیند عملیات تشخیص مایکوپلاسما یک مرحله ای

تشخیص مایکوپلاسما مبتنی بر PCR:

Yeasenروش تشخیص مایکوپلاسما PCR با PCR معمولی یک مرحله ای با استفاده از سه جفت پرایمر به جای یک جفت، که مناطق حفاظت شده 16S و 23S مایکوپلاسما را برای تقویت PCR تو در تو مورد هدف قرار می دهد، متفاوت است. این به طور قابل توجهی حساسیت را بهبود می بخشد و در عین حال غیر اختصاصی بودن را کاهش می دهد و به اندازه یک کپی از مایکوپلاسما شناسایی می شود.

Figure 5: Gel Electrophoresis Image of PCR Amplification of Samples with Different Mycoplasma Concentrations

شکل 5: تصویر ژل الکتروفورز از تکثیر PCR نمونه ها با غلظت های مختلف مایکوپلاسما

Figure 6: Gel Electrophoresis Image of PCR Amplification of Samples with Different Mycoplasma Concentrations

شکل 6: تصویر ژل الکتروفورز از تکثیر PCR نمونه ها با غلظت های مختلف مایکوپلاسما

جدول 1: انواع مایکوپلاسما قابل تشخیص توسط Yeasenمعرف یک مرحله ای ایزوترمال تشخیص مایکوپلاسما

ypes of Mycoplasma Detectable by Yeasen’s One-Step Isothermal Mycoplasma Detection Reagent

توجه: قسمت آبی انواع مایکوپلاسما را نشان می دهد که با هر دو روش تشخیص ایزوترمال یک مرحله ای و PCR قابل تشخیص هستند.

2. معرف حذف مایکوپلاسما MycAway (1000×)

معرف حذف مایکوپلاسما MycAway (1000×) یک فرمول ترکیبی است که به طور موثر مایکوپلاسما را با مهار DNA و سنتز پروتئین ضروری مورد نیاز برای رشد مایکوپلاسما، بدون آسیب رساندن به سلول ها، از بین می برد. سلول های شما را به حداکثر می رساند و تلفات ناشی از آلودگی مایکوپلاسما را کاهش می دهد.

Figure 6: Demonstration of Cell Elimination Effect

شکل 7: نمایش اثر حذف سلولی

ویژگی های معرف حذف مایکوپلاسما:

سمیت کم: حداقل سمیت سلولی، آزمایشات سلولی بعدی را تحت تاثیر قرار نمی دهد مانند آزمایش زنده ماندن سلولی و ترانسفکشن؛
پایداری بالا: با حفظ اثربخشی، می توان آن را در -20 درجه سانتیگراد برای مدت طولانی نگهداری کرد.
آسان برای استفاده: به سادگی محصول را به محیط کشت آلوده به مایکوپلاسما اضافه کنید و انکوبه کنید.
بازیگر سریع: نتایج قابل مشاهده در کمتر از 3 روز;
طیف گسترده: بر روی اکثر انواع مایکوپلاسماهای آزمایشگاهی موثر است.

شکل 8: نمودار تست سمیت سلولی معرف حذف مایکوپلاسما

3. پیشگیری از مایکوپلاسما

محصول اطلاعات

دسته بندی	نام محصول	گربه شماره	مشخصات
تشخیص	کیت تشخیص مایکوپلاسما یک مرحله ای رنگی MycAway™ Hot	40612ES25/60	25/100 T
	MycAway™ Mycoplasma کیت تشخیص qPCR بلادرنگ داغ	40618ES25/60	25/100 T
	کیت تست مایکوپلاسما GMyc-PCR	40601ES10/20	سنجش 10/20
حذف	اسپری MycAway™ (آماده برای استفاده)	40605ES02/03	1/2×500 میلی لیتر
حذف	درمان MycAway™ (1000×) - معرف حذف مایکوپلاسما	40607ES03/08	1/5×1 میلی لیتر
پیشگیری	MycAway™ Prophylactic (2000×) - معرف پیشگیری از مایکوپلاسما	40608ES03/08	1/5×1 میلی لیتر
	راه حل MycGuard™ -1 (100×)	40609ES60	100 میلی لیتر
	راه حل MycGuard™-2 (500×)	40610ES60	100 میلی لیتر

مقاله بعدی

محلول کل آلودگی مایکوپلاسما