نقش BST DNA پلیمراز در لامپ ? چیست

نقش Bst DNA پلیمراز در LAMP چیست؟

فناوری تقویت اسید نوکلئیک ایزوترمال را می توان با توجه به اصول مختلف تقویت به دسته های زیادی تقسیم کرد. در حال حاضر، رایج ترین و پرکاربردترین فناوری تقویت همدما با واسطه حلقه (LAMP) است که توسط محقق ژاپنی Notomi و همکاران توسعه یافته است. در سال 2000. Bst DNA پلیمراز آنزیم هسته فناوری تقویت همدما است. عملکرد و عملکرد Bst DNA پلیمراز در LAMP چیست؟

1. Bst DNA polymerase چگونه در LAMP نقش دارد؟
2. لیوفیلیزه Bst Plus DNA Polymerase چیست؟
3. ویژگی محصول چیست لیوفیلیز شده Bst به علاوه DNA پلیمراز (14405ES)?
4. عملکرد محصول Lyophilized چگونه است Bst به علاوه DNA پلیمراز (14405ES)؟
5. محصولات مرتبط
6. در مورد خواندن

1. Bst DNA polymerase چگونه در LAMP نقش دارد؟

ویژگی فنی LAMP طراحی چهار پرایمر برای شش ناحیه از ژن هدف و انجام واکنش تکثیر با استفاده از BST DNA پلیمراز در شرایط دمای ثابت 60 تا 65 درجه سانتیگراد است که در عرض 15 تا 60 دقیقه به 1010-109 بار تقویت می شود. Bst DNA پلیمراز دارای پایداری حرارتی قوی، فعالیت جابجایی رشته و فعالیت پلیمراز است. این می تواند یک الگوی تقویتی سریع، کارآمد و خاص در شرایط دمای ثابت بدون چرخه تقویت دناتوراسیون حرارتی PCR باشد و کل آزمایش LAMP را در عرض 1 ساعت کامل کند.

2. لیوفیلیزه Bst Plus DNA Polymerase چیست؟

لیوفیلیزه Bst Plus DNA Polymerase برای منجمد کردن Bst Plus DNA پلیمراز بدون گلیسرول استفاده می شود که مشکل ناپایداری آنزیم Bst بدون گلیسرول را حل می کند. در عین حال، این محصول دارای فعالیت 5 '-3' DNA پلیمراز قوی، فعالیت جابجایی رشته و تحمل dUTP است که برای واکنش تقویت همدما ضد آلودگی مناسب تر است، استفاده از آن برای مشتریان در تولید محصولات منجمد خشک شده راحت است.

شکل 1: 14405ES-Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (60 U/μL، بدون گلیسرول)

3. ویژگی محصول Lyophilized چیست Bst به علاوه DNA پلیمراز (14405ES)؟

  • آنزیم بدون گلیسرول، مناسب برای لیوفیلیزاسیون
  • حمل و نقل در دمای معمولی برای کاهش هزینه ها
  • فعالیت جابجایی رشته قوی، حساس و پایدار
  • انحلال مجدد سریع و عملکرد راحت

4. عملکرد محصول Lyophilized چگونه است Bst به علاوه DNA پلیمراز (14405ES)؟

4.1 شکل پودر خشک شده یخ زده: در مقایسه با لحظه T0، شکل پودر پس از 45 ℃ - 15 روز خشک کردن انجماد بدون تغییر باقی می ماند.

شکل 2. شکل پودر خشک شده در انجماد

4.2 پایداری

عملکرد پودر خشک انجمادی پس از شتاب حرارتی همچنان می تواند با عملکرد معرف مایع مطابقت داشته باشد و پودر خشک شده یخ زده (14405ES)
جهانی و می تواند برای روش رنگ فلورسنت و روش نشانگر pH استفاده شود.

4.2.1 روش رنگ فلورسنت - پایداری

در سیستم تقویت رنگ فلورسنت RT-LAMP، عملکرد پودر خشک شده بدون گلیسرول Bst پس از T0، 45-7 روز و 45-15 روز شتاب حرارتی با عملکرد نسخه مایع آنزیم Bst بدون گلیسرول مطابقت دارد، و NTC peak.

شرایط آزمایشی:

سیستم رنگ فلورسنت RT-LAMP روش ابزار Q5، SLAN
الگو RNA COVID-19 تمرکز 50 نسخه / T
رویه 37 درجه سانتیگراد، 2 دقیقه. 65 درجه سانتیگراد، 60 دقیقه

توجه: گروه کنترل یک نسخه مایع بدون آنزیم گلیسرول Bst با همان غلظت است.

شکل 3. نتایج پایداری

4.2.2 روش رنگرزی فلورسنت - عملکرد آنزیم Bst پس از خشک کردن انجمادی سیستم RT-LAMP

در سیستم تقویت رنگ فلورسنت RT-LAMP، عملکرد محصول پودر انجمادی خشک شده بدون گلیسرول Bst در سیستم RT-LAMP پس از 45 درجه سانتیگراد - 15 روز با عملکرد نسخه مایع آنزیم Bst بدون گلیسرول سازگار بود. میزان تشخیص محصول در گروه کنترل و سیستم RT-LAMP پس از خشک کردن انجمادی به ترتیب 100% (16/16) و 94% (15/16) بود.

شرایط آزمایشی:

سیستم رنگ فلورسنت RT-LAMP روش ابزار Q5، SLAN
الگو RNA COVID-19 تمرکز 50 نسخه / T
رویه 37 درجه سانتیگراد، 2 دقیقه. 65 درجه سانتیگراد، 60 دقیقه

توجه: گروه کنترل یک نسخه مایع بدون آنزیم گلیسرول Bst با همان غلظت است.

شکل 4. عملکرد آنزیم Bst پس از خشک کردن انجمادی سیستم RT-LAMP

4.2.3 روش نشانگر PH ——پایداری

در سیستم تقویت نشانگر pH RT-LAMP، در مقایسه با زمان T0، میزان تشخیص پودر خشک شده یخ زده Bst 88٪ (7/8) پس از 45 ℃ - 15 روز شتاب حرارتی بود.

شرایط آزمایش:

سیستم روش نشانگر PH RT-LAMP الگو RNA COVID-19
رویه 37 درجه سانتیگراد، 2 دقیقه. 65 درجه سانتیگراد، 60 دقیقه تمرکز 50 نسخه / T

توجه: گروه کنترل یک نسخه مایع بدون آنزیم گلیسرول Bst با همان غلظت است.

شکل 5. نتایج پایداری

4.2.روش نشانگر PH 4——پایداری انجماد مجدد

در سیستم تقویت نشانگر pH RT-LAMP، پس از 45 ℃ - 7 روز انجماد مجدد، عملکرد پایدار است. گروه کنترل آنزیم Bst مایع است. در مقایسه با گروه کنترل، نرخ تشخیص 14405ES پس از شتاب حرارتی 94٪ (30/32) است.

شرایط آزمایشی:

سیستم روش نشانگر PH RT-LAMP الگو RNA COVID-19
رویه 37 درجه سانتیگراد، 2 دقیقه. 65 درجه سانتیگراد، 60 دقیقه تمرکز 50 نسخه / T

توجه: گروه کنترل یک نسخه مایع بدون آنزیم گلیسرول Bst با همان غلظت است.

شکل 6. نتایج پایداری انجماد مجدد

4.3 ویژگی

در سیستم تقویت رنگ فلورسنت RT-LAMP، NTC 48 چاهی به اوج خود نرسید و ویژگی 14405ES 100٪ بود.

شرایط آزمایشی:

سیستم رنگ فلورسنت RT-LAMP روش ابزار Q5، SLAN
الگو RNA COVID-19 تمرکز 50 نسخه / T
رویه 37 درجه سانتیگراد، 2 دقیقه. 65 درجه سانتیگراد، 60 دقیقه

توجه: گروه کنترل یک نسخه مایع بدون آنزیم گلیسرول Bst با همان غلظت است.

شکل 7. نتایج خاص

5. محصولات مرتبط

محصولات مرتبطی که Yeasen می تواند ارائه دهد در جدول 1 نشان داده شده است.

جدول 1.محصولات مرتبط

موقعیت یابی محصول نام محصول گربه#
آنزیم Bst بسیار حساس Hieff™ Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 14402ES
Hieff™ Bst Plus DNA Polymerase (2000 U/μL) (پرس و جو کنید) 14403ES
لیوفیلیز شده Bst به علاوه DNA پلیمراز ( 60 U/μL، بدون گلیسرول) 14405ES
روش رنگ فلورسنت کیت سنجش رنگ RT-LAMP (UDG plus) 13762ES
روش نشانگر PH RT-LAMP pH حساس رنگ کروموژنیک نسخه منجمد خشک معرف (پرس و جو کنید) سال 13920
کووید 19 RT-LAMP کووید 19 (pH شاخص روش) لیوفیلیز شده مهره ها (پرس و جو کنید) 13919 E.S
RT-LAMP کووید 19 پرایمر استاد مخلوط کنید (N) (پرس و جو کنید) 13995 E.S
رونوشت معکوس مناسب برای RT-Lamp Hifair™ Ⅲ ترانس کریپتاز معکوس (پرس و جو کنید) 11111ES
Hifair™ Ⅲ ترانس کریپتاز معکوس، بدون گلیسرول (پرس و جو کنید) 11297ES
مهارکننده RNase موشی مهارکننده RNase موشی (40 U/μL) 10603ES
مهارکننده RNase موشی (U/μL 200، بدون گلیسرول) 10703ES
UDG حساس به حرارت Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG)، حساس به حرارت، 1 U/μL (پرس و جو کنید) 10303ES
dUTP با خلوص بالا dUTP (محلول 100 میلی‌مولار) 10128ES

6. در مورد خواندن

انتخاب مواد خام آنزیمی کلیدی مناسب برای حساس تر و سریعتر کردن LAMP /RT-LAMP!

راهنمای انتخاب ترانس کریپتاز معکوس

YEASEN UDG: "متخصص ضد رسوب" در واکنش های PCR

تحقیق