راه حل کلی برای تشخیص ویروس آبله میمون YEASEN
اولین مورد تایید شده آبله میمون در اوایل ماه مه در بریتانیا گزارش شد و به سرعت در کشورها و مناطق غیر بومی شیوع یافت. تا 21 سپتامبر 2022، 106 کشور/منطقه در سراسر جهان با مجموع 63117 مورد تایید شده است. در 16 سپتامبر، چونگ کینگ یک مورد وارداتی آبله میمون را تایید کرد، اولین مورد در سرزمین اصلی چین، که نگرانی اجتماعی را برانگیخت.
شکل 1. نقشه جهانی شیوع آبله میمون 2022 (از CDC)
1. آبله میمون چیست؟
2. تاریخچه آبله میمون
3. چگونه گسترش می یابد
4. علائم و نشانه ها
5. روش تشخیص
6. مطابقت محصول
7. سفارش محصول
1. آبله میمون چیست؟
ویروس آبله میمون یک ویروس DNA دو رشته ای با طول کل حدود 197 کیلوبایت است. متعلق به جنس Orthopoxvirus از خانواده Poxviridae است. ویروس). ویروس آبله میمون دو شاخه دارد (شاخه آفریقای غربی و شاخه حوضه کنگو). در این میان، میزان مرگ و میر در شاخه غرب آفریقا حدود 3.6٪ است و میزان مرگ و میر در شاخه حوضه کنگو می تواند به 10.6٪ برسد. نمونههایی از موارد آبله میمون که از ماه مه 2022 در مناطق غیر بومی یافت شدهاند، تجزیه و تحلیل توالییابی کلاد غرب آفریقا را نشان داد.[1].
شکل 2. تصویر آبله میمون (تصویر از CCDC)
2. تاریخچه آبله میمون
آبله میمون در سال 1958 زمانی که دو شیوع یک بیماری آبله مانند در کلنی های میمون هایی که برای تحقیق نگهداری می شدند، کشف شد. با وجود نامگذاری "آبله میمون"، منبع بیماری ناشناخته باقی مانده است. با این حال، جوندگان آفریقایی و نخستیهای غیر انسانی (مانند میمونها) ممکن است حامل ویروس باشند و مردم را آلوده کنند.[2].
اولین مورد انسانی آبله میمون در سال 1970 ثبت شد. قبل از شیوع سال 2022، آبله میمون در چندین کشور آفریقای مرکزی و غربی گزارش شده بود. پیش از این، تقریباً تمام موارد آبله میمون در افراد خارج از آفریقا با سفرهای بین المللی به کشورهایی که این بیماری معمولاً در آنها رخ می دهد یا از طریق حیوانات وارداتی مرتبط بود. این موارد در چندین قاره رخ داده است[2].
3. چگونه گسترش می یابد
می تواند از حیوانات به انسان، از انسان به انسان و از محیط به انسان سرایت کند.
اکنون مشخص شده است که آبله میمون می تواند انسان را از 3 طریق آلوده کند: یکی از حیوانات آلوده به افراد. ویروس ممکن است از طریق پوست شکسته، دستگاه تنفسی یا غشاهای مخاطی (چشم، بینی یا دهان) وارد بدن شود. دومی از طریق تماس نزدیک بین افراد، از جمله آمیزش جنسی، بوسیدن، در آغوش گرفتن، یا لمس اعضای بدن آبله میمون، و تماس با لباس، ملافه، حوله یا ظروف آلوده به ویروس و سایر مواردی که می توانند آلوده شوند، منتقل می شود. سومین مورد، انتقال قطرات تنفسی است[3].
4. علائم و نشانه ها
تظاهرات بالینی اصلی تب، بثورات پوستی و لنفادنوپاتی است.
شایع ترین علائم در مراحل اولیه شامل تب، سردرد، دردهای عضلانی و تورم غدد لنفاوی است. بثورات 1 تا 3 روز پس از شروع بیماری ظاهر می شوند. بثورات معمولی ابتدا روی صورت ظاهر می شود و به تدریج به اندام ها و سایر قسمت ها گسترش می یابد. بثورات عمدتاً گریز از مرکز هستند.بثورات روی صورت و اندامها شایعتر از تنه است، راشها میتوانند در کف و کف پا ظاهر شوند و تعداد راشها از چندین تا هزاران متغیر است. همچنین می تواند مخاط دهان، دستگاه گوارش، اندام تناسلی، ملتحمه و قرنیه را درگیر کند.
علائم معمولاً 14 تا 21 روز طول می کشد و بیماران معمولاً خود به خود برطرف می شوند. اریتم یا هیپرپیگمانتاسیون یا حتی اسکار ممکن است پس از افتادن دلمه باقی بماند. شایان ذکر است که دلمه تا زمانی که دلمه از بین برود و لایه جدیدی از پوست در زیر آن تشکیل شود مسری باقی می ماند.[3].
5. روش تشخیص
برای جلوگیری و کنترل موثر همهگیری آبله میمون و جلوگیری از واردات و گسترش ویروس، شرکتهای جهانی IVD فعالانه واکنش نشان دادهاند. به عنوان تامین کننده مواد اولیه تولید معرف تشخیص IVD و محلول های معرف، YEASEN یک راه حل کامل برای کمک به شناسایی موثر ویروس آبله میمون ارائه می دهد. از استخراج اسید نوکلئیک گرفته تا اجزای معرف (معرف های آنزیمی و شبه ویروس ها) و کیت های نیمه تمام (پرایمرهای پرایمر، معرف های آنزیمی و کنترل های پلاسمید)، YEASEN می تواند به طور پایدار به شما عرضه کند.
شکل 3. روش تشخیص ویروس
5.1 مزیت روش
- عملکرد کارآمد و راحت - مجموعه ای از کیت ها، شامل تمام اجزاء، بدون عملیات دست و پا گیر، اضافه کردن یک مرحله ای
- حساسیت تشخیص بالا - روش آنتی بادی اصلاح شده ژنتیکی آنزیم شروع داغ Taq، 1 نسخه/واکنش نیز قابل تشخیص است.
- پایداری معرف قوی - در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 1 هفته نگهداری شود، عملکرد پایدار پس از انجماد و ذوب مکرر
- جلوگیری از آلودگی UDG - سیستم dUTP/UDG به سیستم اضافه می شود تا به طور موثر از خطر آلودگی آئروسل جلوگیری کند.
- قابل اجرا بر روی چندین پلتفرم - مناسب برای Bio-Rad CFX96، ABI Q5 و Slan
5.2 مطابقت محصول
- معرف های استخراج اسید نوکلئیک: MolPure™ کیت DNA/RNA ویروسی سواب مغناطیسی (Cat#18300ES)
- معرف تشخیص آبله میمون: کیت qPCR Real Time Virus Monkeypox(Cat#13862ES/Cat#13863ES)
- شبه ویروس آبله میمون: شبه ویروس آبله میمون (Cat#12099ES/Cat#12100ES)
6. محصولات توصیه شده
6.1 کیت qPCR Real Time Virus Monkeypox (Cat#13862ES)
مزایای محصول:
عملکرد کارآمد و راحت
حساسیت بالا و ویژگی خوب
ثبات فوق العاده
تکرارپذیری خوب
6.1.1 نمایش مورد:
-
پایداری حرارتی فوق العاده برای 37 ℃
MPXV با قرار دادن Cat#13862ES در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 7 روز تقویت شد. نتایج نشان داد که مقدار Ct و مقدار فلورسانس به طور قابل توجهی تحت تأثیر 7 روز در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار نگرفت و پایداری حرارتی قوی بود.
شکل 4. تأیید ثبات 7 روزه تسریع شده Yeasen (Cat#13862ES) 37 ℃
-
پایداری فوق العاده یخ-ذوب
MPXV با انجماد و ذوب Cat#13862ES در دمای -20 درجه سانتیگراد به ترتیب 10 بار، 20 بار و 50 بار تقویت شد.نتایج نشان داد که انجماد و ذوب 10 بار، 20 بار و 50 بار در دمای 20- درجه سانتیگراد تأثیر معنی داری بر مقدار Ct و مقدار فلورسانس نداشت و پایداری انجماد و ذوب قوی بود.
شکل 5. تأیید پایداری یخ-ذوب Yeasen (Cat#13862ES) -20 ℃
-
حساسیت فوق العاده بالا، 1 کپی در میکرولیتر نیز قابل تشخیص است
با استفاده از محصول Yeasen monkeypox (Cat#13862ESES)، 1000 کپی/μL، 100 کپی/μL، 10 کپی/μL، 1 کپی/μL، و خالی منفی (NTC) برای تشخیص MPXV استفاده شد. مشاهده می شود که یک کپی نیز قابل تشخیص است (مقدار Ct حدود 38 است) و آزمایش NTC 48 چاهی با خط پایه پایدار، پیک های NTC منفی و بدون پدیده باطله، با حساسیت بالا و ویژگی بالا تکرار شد.
شکل 6. تشخیص حساسیت MPXV
شکل 7. تشخیص ویژگی MPXV
-
معرف ها پایدار و قابل تکرار هستند
کیت تشخیص آبله میمون Yeasen (Cat#13862ESES) برای انجام 10 آزمایش مکرر برای غلظتهای پایین، متوسط و بالا نمونههای مثبت انتخاب شد. نتایج نشان داد که رزومه نمونههای مثبت در کانال FAM کمتر یا مساوی 2 درصد بوده و شاهد بلانک فاقد پدیده پیکینگ و باطله است. ، تکرارپذیری خوب
شکل 8. آزمون تکرارپذیری
6.2 کیت qPCR Real Time Virus Monkeypox (UDG Plus)(Cat#13863ES)
مزایای محصول:
⑴ عملکرد کارآمد و راحت
⑵ حساسیت بالا و ویژگی خوب
⑶ ثبات فوق العاده
⑷ تکرارپذیری خوب
⑸ پیشگیری از آلودگی UDG
6.2.1 نمایش مورد:
-
پایداری حرارتی فوق العاده برای 37 ℃
MPXV با قرار دادن Cat#13863ES در دمای 37 درجه سانتیگراد به ترتیب به مدت 7 روز و 14 روز تقویت شد. نتایج نشان می دهد که پس از 7 روز و 14 روز در دمای 37 درجه سانتیگراد، تأثیر معنی داری بر مقدار Ct و مقدار فلورسانس وجود ندارد و پایداری حرارتی قوی است.
شکل 9. Yeasen (Cat#13863ES) 37 ℃ تسریع تایید ثبات 7 روزه 14 روزه
-
پایداری فوق العاده یخ-ذوب
Cat#13863ES برای تقویت MPXV در دمای -20 درجه سانتیگراد 50 بار منجمد و ذوب شد. نتایج نشان داد که انجماد و ذوب در دمای -20 درجه سانتیگراد به مدت 50 بار تأثیر معنیداری بر مقدار Ct و مقدار فلورسانس نداشت و پایداری انجماد و ذوب قوی بود.
شکل 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ تأیید پایداری یخ زدگی-ذوب شدن
-
حساسیت و ویژگی بالا
5 کپی / میکرولیتر MPXV و خالی منفی (NTC) با استفاده از محصول Yeasen monkeypox (Cat#13863ESES) مورد آزمایش قرار گرفت. نتایج نشان داد که خط پایه پایدار بود، نرخ تشخیص FAM 100 درصد، حداقل حد تشخیص 5 کپی بر میکرولیتر بود و در طول آزمایش مکرر 48 چاهی NTC، خط پایه کانالهای FAM و VIC پایدار بود، پیک منفی NTC هیچ پدیده باطلهای نداشت و دارای حساسیت و ویژگی بالا بود.
شکل 11. تشخیص حساسیت MPXV
شکل 12. تشخیص ویژگی MPXV
-
خطی بودن خوب معرف ها
الگوی مثبت 10 بار از غلظت 105×1 کپی بر لیتر رقیق شد و کیت Yeasen qPCR آبله میمون (Cat#13863ES) برای تکرار تشخیص دو بار استفاده شد. لگاریتم شماره کپی اولیه ابسیسا و مقدار Ct مختصات است. منحنی استاندارد ساخته شد و نتایج نشان داد که کانال FAM ژن آبله میمون دارای محدوده خطی 10×105×10 کپی بر لیتر و R2> 0.99 است که رابطه خطی خوبی دارد.
شکل 13. آزمون خطی
-
معرف های پایدار و قابل تکرار
کیت Yeasen qPCR میمون آبله (Cat#13863ES) برای انجام 10 آزمایش مکرر برای غلظتهای کم، متوسط و بالا مثبت و 20 آزمایش تکراری برای کنترل منفی (NC) و کنترل خالی (NTC) انتخاب شد. نتایج نشان می دهد که: کانال FAM CV نمونه های مثبت کمتر از 3% است و شاهد منفی و شاهد بلانک فاقد پدیده پیکینگ و بدون باطله هستند. مقادیر Ct کانال VIC NC همه کمتر از 35، CV کمتر از 0.3٪ است و NTC هیچ پدیده پیکینگ و باطله ای ندارد و تکرارپذیری خوب است.
شکل 14. تست تکرارپذیری (FAM)
شکل 15. تست تکرارپذیری (VIC)
7. سفارش محصول
Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd. که در سال 2014 تأسیس شد، یک شرکت با فناوری پیشرفته است که در تحقیق و توسعه و تولید مواد خام آنزیم ابزار و آنتی بادی های آنتی ژن مشغول است. محصولات آن شامل آنزیم های تشخیصی مولکولی، پروتئین ها و آنتی بادی های مورد استفاده در داروسازی، آزمایش ایمنی مواد غذایی، اصلاح نژاد، دادگستری و سایر صنایع است. ما متعهد به ارائه محصولات و خدمات با کیفیت به مشتریان در زمینه علوم زیستی هستیم. دستورالعمل خرید محصول برای ویروس Monkeypox به شرح زیر است:
جدول 1.محصولات مرتبط
نوع محصول | محصول توضیحات | محصول نام | شماره مقاله | مشخصات |
کیت | مخلوط آنزیمی | کیت qPCR Real Time Virus Monkeypox (پرس و جو) | 13862ES03 | 24T |
13862ES48 | 48T | |||
13862ES59 | 96T | |||
13863ES25 | 25T | |||
13863ES60 | 100T | |||
13863ES80 | 1000 تن | |||
شبه ویروس | ژن F3L | ویروس آبله میمون F3L-Pseudovirus (پرس و جو) | 12099ES03 | 1 میلی لیتر |
12099ES08 | 5 × 1 میلی لیتر | |||
B6R ژن | ویروس آبله میمون B6R-Pseudovirus (پرسش) | 12100ES03 | 1 میلی لیتر | |
12100ES08 | 5 × 1 میلی لیتر |
مراجع
[1] مرکز چینی برای کنترل و پیشگیری از بیماری: نکات بهداشتی آبله میمون
[2] CDC:درباره آبله میمون | آبله میمون | ویروس پوکس | CDC
[3] Yulin Evening News: منبع اولین مورد آبله میمون در سرزمین اصلی چین شناسایی شد! یادآوری اضطراری کنترل بیماری گوانگشی