PCR کمی فلورسنت یک آزمایش بسیار حساس است که به دقت بالایی در عملیات توسط پرسنل آزمایشگاه نیاز دارد. بنابراین، در طول فرآیند آزمایش qPCR، ناگزیر با مشکلاتی مواجه می شویم:
I. مسائل مربوط به عوامل غیر تجربی
- آزمایشگاه پروژههای آزمایش qPCR زیادی دارد و ابزارها اشغال شدهاند و مخلوطهای واکنشی که با دقت آماده شدهاند بدون روش دفع واضح باقی میمانند.
- نمونههای کمی متعددی وجود دارد، کار اضافه کردن نمونهها دشوار است و خطر خطاهای اضافهکردن نمونه به دلیل سرگیجه وجود دارد که منجر به نتایج تجربی غیرقابل اعتماد میشود.
- زمانهای طولانی کار ماشین، تعداد محدود اجرای آزمایشی، و کارهای آزمایشی را نمیتوان طبق برنامهریزی منظم انجام داد.
- تجهیزات آزمایشگاهی در حال جایگزینی با ابزار جدید است، ابزارهای کمی در آزمایشگاه وجود دارد و معرف های کمی با ابزار سازگار نیستند.
II. مسائل محدود شده توسط عوامل تجربی
مسائل کمی با ژن های کم فراوانی طراحی پرایمر پیچیده و فرآیندهای غربالگری، حساسیت و تکرارپذیری چاه های تکراری...
YEASEN به عنوان یک تولید کننده باتجربه که به تحقیق و توسعه معرف های qPCR اختصاص دارد یک محلول premix qPCR با کارایی بالا را به دقت توسعه داده است - Hieff UNICON™ یونیورسال آبی qPCR SYBR Green Master Mix، که می تواند مشکلات تجربی فوق الذکر را یکجا حل کند. یونیورسال ROX مورد استفاده در این محصول جایگزین ROX سنتی می شود و تفاوت مسیر نوری را در پلت فرم های مختلف دستگاه جبران می کند و آن را برای همه ابزارهای qPCR مناسب می کند. علاوه بر این، این محصول از روش اصلاح آنتیبادی استفاده میکند و شامل افزودنیهایی است که تقویت ژن را بهبود میبخشد و به طور قابلتوجهی عملکرد تقویت محصول را بهبود میبخشد. نیازهای با کارایی بالا محققان در جامعه علمی را با الزامات کارایی بالا شرکت های صنعتی کاملاً متعادل می کند.
ویژگی های محصول
- عریض ساز سازگاری: را پیش مخلوط شامل الف خاص نوع از مرجع رنگ، از بین بردن را نیاز دارند به تنظیم کنید را ROX تمرکز
- آسان ردیابی: را آبی پیش مخلوط اجازه می دهد برای مستقیم تجسم به متمایز کردن آیا را نمونه دارد بوده است اضافه شد، به سادگی توسط مشاهده کردن را رنگ
- بالا ثبات: را سیستم است آماده شده است در اتاق دما، و را مختلط سیستم می تواند باشد ذخیره شده است در 4 درجه سانتی گراد برای بالا به 24 ساعت بدون هر تغییر دهید در را تست کنید نتایج
- سریع راه اندازی: سازگار است با هر دو استاندارد و سریع برنامه ها، اجازه می دهد را کمی آزمایش به باشد تکمیل شد در به عنوان سریع به عنوان 46 دقیقه
- عالی تقویت عملکرد: بالا تقویت کارایی، خوب خاص بودن، توانا از تشخیص ژن ها در را مجرد کپی کنید شماره
اطلاعات سفارش
موقعیت یابی محصول | نام محصول | گربه# |
پیش میکس کمی جهانی با حساسیت بالا | 11184ES | |
ردیابی رنگ حساسیت بالا فلورسانس کمی پیش میکس | 11188ES | |
11189ES | ||
11190ES |
عملکرد محصول
1.حساسیت بالا: قابلیت تشخیص تا یک کپی را دارد

شکل 1. Hieff UNICON™ پیشمیکس آبی جهانی میتواند به طور موثر محدوده مقدار الگو را در 7 مرتبه بزرگی، با راندمان تقویت بالا و یک رابطه خطی خوب در محدوده خطی وسیع تشخیص دهد. الگوی مورد استفاده 2 میکرولیتر پلاسمید با غلظت 10^6 تا 10^0 کپی بود که ژن IL23R انسانی را تقویت می کرد.
2 تشخیص نرخ و خاص بودن هستند خوب: به طور گسترده قابل اجرا به تقویت کننده ها با 30-70٪ GC محتوا
شکل 2. Hieff UNICON™ پرمیکس یونیورسال آبی به طور گسترده برای آمپلیمرهایی با محتوای GC 30-70% قابل استفاده است و نرخ تشخیص ویژگی بسیار بالایی را تضمین می کند. با استفاده از 2 میکرولیتر cDNA 293T به عنوان الگو، 1000 جفت پرایمر برای آمپلیمرهای 200 جفت باز (محتوای GC% 30-70%) با نرم افزار Primer5 طراحی شد و 27 عدد از این آمپلیمرها به صورت تصادفی تکثیر شدند.
3. وضوح بالا: می تواند با دقت تفاوت در غلظت قالب را 2 برابر تشخیص دهد
شکل 3. Hieff UNICON™ پیش میکس آبی جهانی می تواند به دقت تفاوت ها را در غلظت قالب 2 برابر تشخیص دهد. الگوی مورد استفاده رقت شیب 2 برابری 2 میکرولیتر از محلول ذخیره cDNA 293T بود که ژن GAPDH را تقویت می کرد.
4. قابلیت تکرار خوب چاه های تکراری: 90 چاه تکراری
شکل 4. Hieff UNICON™ پرمیکس یونیورسال آبی تکرارپذیری عالی را نشان میدهد، با منحنیهای تقویت 90 چاه تکراری که همزمانی بالایی را نشان میدهند و انحراف استاندارد مقادیر Ct کمتر از 0.2 را نشان میدهند. با استفاده از 1 میکرولیتر cDNA 293T به عنوان الگو، ژن GAPDH تکثیر شد.
5.پایداری خوب: پیش مخلوط در عملکرد تقویتی حتی پس از 50 بار منجمد شدن و ذوب شدن بیتأثیر باقی میماند.
چرخه های انجماد و ذوب | 0 بار | 10 بار | 30 بار | 50 بار |
میانگین Ct | 23.11 | 23.17 | 23.18 | 23.25 |
▲Ct | - | 0.06 | 0.07 | 0.14 |
شکل 5. Hieff UNICON™ پرمیکس یونیورسال آبی پس از 50 بار منجمد شدن و ذوب شدن هیچ تغییری در عملکرد تقویت نشان نمی دهد. با استفاده از 1 میکرولیتر cDNA 293T به عنوان الگو، ژن C2orf68 با پیش مخلوطی که تعداد متفاوتی از چرخه های انجماد و ذوب را پشت سر گذاشته بود، تقویت شد.
مشتری افeedback
منبع نمونه: رده سلولی سرطان تخمدان موش ID8، HM1
منبع نمونه: RNA چربی اپیدیدیم موش
منبع نمونه: RNA برگ Arabidopsis thaliana
ادبیات با ضریب تاثیر بالا تا حدی با استفاده از YEASEN qPCR Mix منتشر شده است
[1] Li Y، Wang D، Ping X، و همکاران. درمان هایپرترمی موضعی باعث قهوه ای شدن چربی سفید و درمان چاقی می شود. سلول 2022; 185(6):949-966.e19.doi:10.1016/j.cell.2022.02.004.IF=66.850)
[2] Seki T، Yang Y، Sun X، و همکاران. سرکوب تومور با واسطه چربی قهوه ای توسط متابولیسم جهانی تغییر یافته توسط سرما. طبیعت. 2022؛ 608 (7922): 421-428. doi:10.1038/s41586-022-05030-3. (IF=69.504)
[3] چن پی، وانگ دبلیو، لیو آر، و همکاران. تجربه حسی بویایی گلیوموژنز را از طریق IGF1 عصبی تنظیم می کند. طبیعت. 2022؛ 606 (7914): 550-556. doi:10.1038/s41586-022-04719-9.(IF=69.504)
[4] Dong W، Zhu Y، Chang H، و همکاران. یک ماژول SHR-SCR سرنوشت سلول های قشر مغز حبوبات را مشخص می کند تا ندولاسیون را فعال کند. طبیعت. 2021؛ 589 (7843): 586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z.(IF=69.504)
[5] Lu XY، Shi XJ، Hu A، و همکاران. تغذیه از طریق محور mTORC1-USP20-HMGCR باعث بیوسنتز کلسترول می شود. طبیعت. 2020؛ 588 (7838): 479-484. doi:10.1038/s41586-020-2928-y.(IF=69.504)
[6] بی ایکس، وانگ کی، یانگ ال، و همکاران. ردیابی ردپای ژنتیکی فرود مهرهداران در ماهیهای باله پرتوی غیر تلهآست. سلول 2021؛ 184 (5): 1377-1391.e14. doi:10.1016/j.cell.2021.01.046.(IF=66.850)
[7] لیو اس، هوآ وای، وانگ جی، و همکاران. RNA پلیمراز III برای ترمیم شکستگی های دو رشته ای DNA با نوترکیبی همولوگ مورد نیاز است. سلول 2021؛ 184 (5): 1314-1329.e10. doi:10.1016/j.cell.2021.01.048.(IF=66.850)
[8] لیو سی ایکس، لی ایکس، نان اف، و همکاران. ساختار و تخریب RNA های حلقوی فعال سازی PKR را در ایمنی ذاتی تنظیم می کند. سلول 2019؛ 177 (4): 865-880.e21. doi:10.1016/j.cell.2019.03.046.(IF=66.850)
[9] Han X، Wang R، Zhou Y، و همکاران. نقشه برداری اطلس سلولی موش توسط Microwell-Seq. سلول 2018؛ 172 (5): 1091-1107.e17. doi:10.1016/j.cell.2018.02.001.(IF=66.850)
[10] Chai Q، Yu S، Zhong Y، و همکاران. یک فسفولیپید فسفاتاز باکتریایی با ربودن یوبیکوئیتین، پیروپتوز میزبان را مهار می کند. علم. 2022;378(6616):eabq0132.doi:10.1126/science.abq0132.(IF=63.714)
[11] یو کیو، لیو اس، یو ال، و همکاران. دی متیلاسیون RNA باعث افزایش عملکرد و زیست توده گیاهان برنج و سیب زمینی در آزمایشات مزرعه می شود. Nat Biotechnol. 2021؛ 39 (12): 1581-1588. doi:10.1038/s41587-021-00982-9.(IF=68.164)
[12] هان اف، لیو ایکس، چن سی، و همکاران. GPR146 مرتبط با خطر هیپرکلسترولمی یک گیرنده یتیم همراه با پروتئین G است که سطح کلسترول خون را در انسان و موش تنظیم می کند. Cell Res. 2020؛ 30 (4): 363-365. doi:10.1038/s41422-020-0303-z.(IF=46.297)
[13] وانگ زی، لو زی، لین اس، و همکاران. سلولهای B بیانکننده لوسین-tRNA-سنتاز-2 به فرار ایمنی سرطان کولورکتال کمک میکنند. مصونیت. 2022؛ 55 (6): 1067-1081.e8. doi:10.1016/j.immuni.2022.04.017.(IF=43.474)
[14] بی کیو، وانگ سی، چنگ جی، و همکاران. PDGFB مشتق شده از میکروگلیا جریان های پتاسیم عصبی را برای سرکوب تونیک سمپاتیک پایه و محدود کردن فشار خون بالا تقویت می کند. مصونیت. 2022؛ 55 (8): 1466-1482.e9. doi:10.1016/j.immuni.2022.06.018.(IF=43.474)
[15] Wang X، Ni L، Wan S، و همکاران. دمای تب به طور بحرانی تمایز و بیماری زایی سلول های T Helper 17 را کنترل می کند. مصونیت. 2020؛ 52 (2): 328-341.e5. doi:10.1016/j.immuni.2020.01.006.(IF=43.474)
[16] Xiao J، Li W، Zheng X، و همکاران. هدف قرار دادن 7-دهیدروکلسترول ردوکتاز متابولیسم کلسترول و فعال سازی IRF3 را برای از بین بردن عفونت ادغام می کند. مصونیت. 2020؛ 52 (1): 109-122.e6. doi:10.1016/j.immuni.2019.11.015.(IF=43.474)
[17] Zhang X، Zhang C، Qiao M، و همکاران. کاهش BATF در سلول های CAR-T با ایجاد مقاومت در برابر خستگی و تشکیل سلول های حافظه مرکزی، فعالیت ضد توموری را افزایش می دهد. سلول سرطانی 2022؛ 40 (11): 1407-1422.e7. doi:10.1016/j.ccell.2022.09.013.(IF=38.585)
[18] Wang XY، Wei Y، Hu B، و همکاران. گلیکولیز مبتنی بر c-Myc سلولهای B تنظیمکننده عملکردی را قطبی میکند که پاسخهای التهابی بیماریزا را تحریک میکنند. هدف انتقال سیگنال در آنجا. 2022؛ 7 (1): 105. منتشر شده در 18 آوریل 2022. doi:10.1038/s41392-022-00948-6.(IF=38.104)
[19] فن اچ، هونگ بی، لو وای و همکاران. تأثیر پروتئین آب پنیر بر عفونت ویروسی و تکثیر SARS-CoV-2 و کروناویروس پانگولین در شرایط آزمایشگاهی. هدف انتقال سیگنال در آنجا. 2020؛ 5 (1): 275. منتشر شده در 24 نوامبر 2020. doi:10.1038/s41392-020-00408-z.(IF=38.104)
[20] Ren Y، Wang A، Wu D، و همکاران. مهار دوگانه ایمنی ذاتی و آپوپتوز توسط پروتئین سیتومگالوویروس انسانی UL37x1 تکثیر موثر ویروس را امکان پذیر می کند. Nat Microbiol. 2022؛ 7 (7): 1041-1053. doi:10.1038/s41564-022-01136-6.(IF=30.964)