شرح
هیفر™ کیت پروب مولتی پلکس یک مرحله ای RT-qPCR (UDG به علاوه) یک کیت PCR کمی چندگانه مبتنی بر RNA به عنوان الگو است. در فرآیند آزمایش، رونویسی معکوس و PCR کمی در همان لوله انجام شد که عملیات آزمایشی را ساده کرد و خطر آلودگی را کاهش داد.
در این کیت، اولین رشته cDNA به طور موثر توسط Hifair مقاوم در برابر حرارت سنتز شد.TM V ترانس کریپتاز معکوس و به صورت کمی توسط UNICON تقویت شد™ HotStart Taq DNA Polymerase. این کیت عمدتاً حاوی بافر MP بهینه شده، مخلوط آنزیم‌ها و غیره است. محلول بافر از قبل حاوی منیزیم است2+ و dNTP. علاوه بر این، عواملی که می توانند به طور موثری تقویت غیر اختصاصی PCR را مهار کنند و راندمان تقویت چندین واکنش qPCR را بهبود بخشند، اضافه می شوند که می توانند کارایی تقویت را تضمین کنند و تا واکنش تقویت چندگانه را انجام دهند. سیستم dUTP/UDG برای جلوگیری موثر از خطر آلودگی آئروسل اضافه شد.
ویژگی ها
1. جیتطبیق پذیری: برای تقویت qPCR و تشخیص اسیدهای نوکلئیک میکروارگانیسم های بیماری زا، ژنوم انسان، گیاهان و سایر گونه ها مناسب است..
2. حساسیت بالا: سیستم بافر با دقت بهینه سازی شده، حساسیت تشخیص الگوهای کم غلظت را تا 250 کپی در میلی لیتر بهبود می بخشد..
3. سیستم dUP/UDG: dUTP/ سیستم ضد آلودگی UDG حساس به حرارت برای کاهش آلودگی آئروسل محصولات به طور موثر، کاهش مثبت کاذب و اطمینان از نتایج معتبر معرفی شده است..
4. پشتیبانی کنیدing برنامه سریع: سازگار با برنامه سریع 40 دقیقه.
5. پایداری فوق العاده: پایداره در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 14 روز، انجماد و ذوب را 10 بار تکرار کنید.
اجزاء
| اجزاء | نام | 16630ES60 (100 T) | 16630ES80 (1000 T) | 16630ES92 (10000 T) |
| 16630-A | 5×Hifair MP Buffer | 500 μL | 5 میلی لیتر | 50 میلی لیتر |
| 16630-B | آنزیم هایفیر مخلوط کنید | 100 μL | 1 میلی لیتر | 10 میلی لیتر |
| 16630-C | GC-Enhancer | 500 μL | 5 میلی لیتر | 50 میلی لیتر |
توجه داشته باشید: 1) 5×هیفرTM بافر MP مخفف است هیفرTM V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer، که شامل dNTPs، dUTP، Mg می باشد2+، تثبیت کننده ها، تقویت کننده ها و موارد دیگر.
2) مخلوط آنزیم هایفیر عمدتا شامل هایفیر مقاوم در برابر حرارتTM V رونوشت معکوس، UNICONTM HotStart Taq DNA پلیمرها و UDGase.
3) تقویت کننده GC اختیاری است. لطفاً نسخه رایگان GC enhancer را پیدا کنید: گربه: 16901ES.
4) 16630-A و 16630-B معادل 16901-A و 16901-B، به ترتیب.
مشخصات
| روش PCR | RT-qPCR یک مرحله ای |
| نوع نمونه | RNA |
ذخیره سازی
تیاو محصول باید باشد ذخیره شده است در -25 درجه سانتیگراد ~ -15 درجه سانتیگراد برای 1 سال
ارقام
شکل 1. نرخ تشخیص بالا
دستورالعمل ها
1. واکنش ترکیب
| اجزاء | حجم (میکرولیتر) | غلظت نهایی |
| 5×Hifair™ بافر MP | 5 | 1× |
| مخلوط آنزیم هایفیر | 1 | - |
| GC-Enhancer | 0-5 | - |
| مخلوط پرایمر (10 میکرومولار) | 0.4 هر کدام | 0.16 میکرومولار |
| مخلوط پروب (10 میکرومولار) | 0.2 هر کدام | 0.08 میکرومولار |
| RNA | 1-5 | - |
| RNase Free H2O | تا 25 | - |
توجه داشته باشید：حتما قبل از استفاده خوب مخلوط کنید، از ایجاد حباب بیش از حد ناشی از لرزش شدید اجتناب کنید.
الف) غلظت پرایمر: پرایمر مخلوط شامل پرایمر مالتی پلکس، بسته به موقعیت، غلظت بهینه پرایمر ممکن است بین 0.1 تا 1.0 میکرومولار باشد.
ب) غلظت پروب: مخلوط پروب شامل گروه فلورسنت تفاوت برچسب زدن پروب چندگانه، بسته به موقعیت غلظت پروب بهینه ممکن است بین 0.05 و 0 باشد.5 μM.
ج) رقیق سازی الگو: qPCR بسیار حساس است و توصیه می شود که قالب را رقیق کنید. مقدار Ct کنترلی بین 20 تا 35 مناسب است.
د) آماده سازی سیستم: un head با عنصر فیلتر. از آلودگی متقاطع و آلودگی آئروسل خودداری کنید.
2. پروتکل دوچرخه سواری بهینه شده
| مرحله واکنش | دما | زمان | چرخه | |
| 1 | رونویسی معکوس | 50 درجه سانتی گرادالف | 15 دقیقه | 1 |
| 2 | دناتوراسیون اولیه | 95 درجه سانتی گراد | 5 دقیقه | 1 |
| 3 | واکنش تقویت | 95 درجه سانتی گراد | 15 ثانیه | 45 سیکل |
| 60 درجه سانتی گرادب | 30 ثانیهج |
توجه داشته باشید：الف) ررونویسی همیشگی: دما می تواند 42 را انتخاب کنددرجه سانتی گراد یا 50درجه سانتی گراد به مدت 10-15 دقیقه.
ب) واکنش تقویت: درجه حرارت با توجه به مقدار Tm پرایمرهای طراحی شده تنظیم می شود.
ج) دریافت سیگنال فلورسانس: لطفاً رویه آزمایشی را مطابق با الزامات کتابچه راهنمای ابزار تنظیم کنید.
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.