شرح
RNA پلیمراز T7 از DNA دو رشته ای حاوی توالی پروموتر T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') به عنوان الگو و NTPs به عنوان بستر برای سنتز RNA مکمل رشته معکوس DNA در پایین دست پروموتر استفاده می کند. هر دو DNA دو رشته ای خطی با انتهای صاف یا اورهانگ 5' می توانند به عنوان بسترهای الگو برای RNA پلیمراز T7 عمل کنند، به این معنی که پلاسمیدهای خطی شده یا محصولات PCR می توانند به عنوان الگوهایی برای سنتز RNA آزمایشگاهی استفاده شوند.
این کیت از یک روش سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) برای تشخیص باقیمانده RNA پلیمراز T7 استفاده می کند. استانداردهای T7 RNA پلیمراز و نمونه های آزمایشی به چاه های میکروپلیتی که از قبل با آنتی بادی های آنتی-T7 RNA پلیمراز پوشش داده شده اند (36705-A) اضافه می شوند. سپس آنتی‌بادی‌های شناسایی RNA پلیمراز T7 نشاندار شده با بیوتین (36705-C) و به دنبال آن استرپتاویدین-HRP (SA-HRP) (36705-D) اضافه می‌شوند و یک آنتی‌بادی + آنتی‌ژن + آنتی‌بادی-بیوتین + مجموعه SA-HRP را تشکیل می‌دهند. پس از شستشو، بستر TMB (36705-H) برای توسعه رنگ اضافه می شود. TMB توسط HRP کاتالیز می شود تا با افزودن محلول توقف (36705-I) از بی رنگ به آبی و در نهایت به زرد تبدیل شود. شدت رنگ زرد با مقدار T7 RNA پلیمراز شناسایی شده در نمونه همبستگی مثبت دارد.
اجزاء
| خیر | نام | 36705ES48 | 36705ES96 |
| 36705-A | نوارهای میکروتیتر پوشش داده شده با RNA پلیمراز ضد T7 | 48 تی | 96 ت |
| 36705-B* | استاندارد: T7 RNA پلیمراز | 1 ویال | 2 ویال |
| 36705-C | تشخیص آنتی بادی：بیوتین-مزدوج آنتی بادی ها | 60 μL | 120 μL |
| 36705-D | استرپتاویدین-HRP | 30 μL | 60 μL |
| 36705-E | بافر رقیق 1 | 25 میلی لیتر | 45 میلی لیتر |
| 36705-F | غلظت بافر شستشونرخ (20×) | 25 میلی لیتر | 50 میلی لیتر |
| 36705-G | بافر رقیق 2 | 15 میلی لیتر | 30 میلی لیتر |
| 36705-H | بستر TMB | 8 میلی لیتر | 15 میلی لیتر |
| 36705-I | راه حل توقف | 5 میلی لیتر | 10 میلی لیتر |
| 36705-J | مهر و موم بشقاب | هر کدام 3 عدد | هر کدام 5 عدد |
* استاندارد 36705-B یک پودر لیوفیلیزه است.
سازگار با RNA پلیمراز T7: 10625، 10628 و 10629.
داده های اعتبارسنجی
جدول 1. محدوده خطی: 1 تا 32 نانوگرم در میلی لیتر ،R2=0.999 ،CV≤5%.
| Std | ارتباط( ng/mL) | AVG( ng/mL) | بازیابی(٪) | CV% |
| Std1 | 32 | 31.965 | 99.9٪ | 2.2٪ |
| Std2 | 16 | 16.070 | 100.5% | 5.0٪ |
| Std3 | 8 | 7.812 | 97.7٪ | 2.1٪ |
| Std4 | 4 | 4.192 | 104.8٪ | 0.8٪ |
| Std5 | 2 | 2.020 | 101.8٪ | 3.5٪ |
| Std6 | 1 | 1.173 | 117.3٪ | 0.0٪ |
| NC | 0 | / | / | / |
جدول 2. ویژگی بالا
| نام پروتئین | ارتباط | شناسایی شده یا نه |
| پمثبت سیکنترل کنید | 1 نانوگرم در میلی لیتر | شناسایی شد |
| نمنفی سیکنترل کنید | 0 نانوگرم در میلی لیتر | nd |
| اولترا نوکلئاز | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| نمک اولترا نوکلئاز فعال | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| DNase من | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| مهارکننده RNase موشی | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| آنزیم درپوش واکسینیا | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| پیروفسفاتاز غیر آلی | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase | 10 میکروگرم در میلی لیتر | nd |
| 1٪ BSA | 10 مترگرم در میلی لیتر | nd |
جدول 3. LOQ: حد کمیت برای این محصول با رقیق کردن پایین ترین نقطه غلظت منحنی استاندارد تعیین می شود، جایی که ضریب تغییرات (CV) در کمترین غلظت کمتر از 20٪ است. این به عنوان حد کمیت تعریف می شود که 1 نانوگرم در میلی لیتر است.
| اسtd6 ارزش نظری (نانوگرم در میلی لیتر) | مقدار میانگین آزمون Std 6 (نانوگرم در میلی لیتر) | تیest تکرارها | CV% | بازیابی |
| 1 | 0.858 | 24 | 12.6٪ | 85.8٪ |
جدول 4. LOD: حد تشخیص این محصول به عنوان غلظت استاندارد مربوط به میانگین مقدار تشخیص کنترل منفی (NC) به اضافه دو برابر انحراف استاندارد تعریف می شود. با اندازه گیری 24 استاندارد NC، با محاسبه میانگین و انحراف معیار، حد تشخیص 0.318 نانوگرم بر میلی لیتر تعیین می شود.
| مقدار متوسط(OD) | SD(OD) | مقدار میانگین +2SD (OD) | مقدار میانگین +2SD (ng/ml) |
| 0.0527 | 0.0038 | 0.0604 | 0.3176 |
حمل و نقل و ذخیره سازی
در دمای 8-2 درجه سانتی گراد نگهداری شود. ماندگاری در باز نشدن 1 سال و پس از باز شدن 6 ماه است.
پس از دریافت محصول، لطفاً بررسی کنید که آیا تمام اجزاء کامل هستند یا خیر و بلافاصله آنها را در دمای ذخیره سازی مربوطه نگهداری کنید.
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.