- Modèle de colite
- Modèle animal de pancréatite aiguë
- Modèle de maladie diabétique
- Modèle de polyarthrite rhumatoïde
- Modèle d'hypertension
Modélisation de la colite
JE. Histoire de DSS moulage
À présent, là sont divers animal modèles largement utilisé à étude le étiologie et pathogénèse de inflammatoire intestin (MICI) et de tester l'efficacité des médicaments nouvellement développés, etc. En particulier, le sel de sodium de sulfate de dextrane (DSS) MW : 36 000 ~ 50 000) modèle de ulcéreux colite (UC) est le la plupart largement utilisé. Dans particulier, le Dextran Sulfate Sodium Sel (DSS MW:36000~50000) Le modèle de colite ulcéreuse (CU) est le plus largement utilisé.
II. Caractéristiques de le UC modèle construit par DSS
Deux modèles de colite aiguë et chronique peuvent être réalisés en donnant aux animaux différentes concentrations de DSS (MW : 36 000 à 50 000) solution aqueuse à volonté, selon le moment et le cycle d'administration. Les symptômes de cette maladie modèle étaient très similaire à ceux de humain UC, lequel étaient diarrhée, semblable à du mucus selles, fécale occulte sang, sanglant selles avec yeux nus, perte de poids, mobilité réduite et détérioration de la couleur du pelage.
Tableau 1 Histologique caractéristiques de DSS modèle de colite
DSS Colite Modèle Catégories | Aigu phase colite modèle | Chronique scène colite modèle |
histologique changement | Côlon congestion, œdème, raccourcissement, fragilité, augmenté rapport poids/longueur rapport | Significatif raccourcissement de le côlon |
Développement de variable degrés de colique ulcères | Muqueuse épaississant, agrandi lymphe nœuds | |
Muqueuse œdème, en coupe cellule perte, crypte gonflement perturbation | Absence de en coupe cellules, absence de fosse cryptique | |
Le muqueuse et sous-muqueuse montrer variable degrés de inflammatoire cellule infiltration, lésions des cellules épithéliales | Polypes adénomateux, ressemblant à des tumeurs changements dans un petit pourcentage de animaux |
III. Avantages de le DSS UC modèle
1, le symptomatique manifestations sont extrêmement similaire à humain UC, lequel peut être utilisé à étude le mécanisme de occurrence et le développement de la colite aiguë et chronique, ainsi que pour l'étude de l'efficacité des médicaments.
2. La modélisation méthode de gratuit boire DSS aqueux solution est simple et facile, avec haut modélisation taux et haut répétabilité.
3.Avec différentes concentrations de DSS, des temps de dosage et des fréquences de dosage, deux modèles de colite, aiguë et chronique, peuvent être réalisés. long durée de le modèle reflète le dynamique processus de aigu à chronique transformation et résout le problème de chronicisation et de maintien de la CU, ce qui est incomparable à de nombreux modèles précédents.
4, une variété de genres peuvent être modélisés : souris, rats, poissons zèbres, porcs, mouches des fruits, etc.
5. Combiné à l'azoxyméthane (AOM) (Cat# 60751ES), il peut être utilisé pour induire un cancer associé à la colite (CAC) dans un modèle animal, qui simule avec succès le processus de CAC induit par les MII.
IV. Exemple de DSS UC construction de modèles
1. Modélisation de la souris
1) BALB/c souris, femelle, 6-8 semaines, 25 g;
2)3% DSS boire eau était configuré avec stérile eau et alors filtré à travers un 0,22 μm membrane;
3) Le les souris étaient donné un boisson continue pour 7 jours et LUI coloré;
4) Expérimental résultats: le tissus de la les souris étaient œdémateux et encombré, et il y avait inflammation évidente.

Figue. 1 IL coloration résultats de DSS aigu colite section
2. Modélisation du poisson zèbre1) Poisson zèbre les embryons étaient cultivé en E3 milieu embryonnaire contenant bleu de méthyle à 28,5 ℃ jusqu'à 1 dpf;
2) 0,5% DSS boire eau était configuré avec E3 moyen et alors filtré à travers un 0,22 μm membrane filtrante;
3) Poisson zèbre étaient traité avec 0,5% DSS depuis 3 dpf à 6 dpf.
4) Expérimental résultats: tous 0,5 % DSS traitements médicamenteux a abouti à assombrissement de foie de poisson zèbre couleur et stress inflammatoire.
Fig. 2 Le DSS provoque une réponse inflammatoire dans le foie du poisson zèbre
3. Moulage de porc
1) Quatre à cinq jour vieux Yorkshire porcelets, expérimental groupe: perfusé avec DSS, contrôle groupe: perfusé avec saline
2) Quotidiennement admission de 1,25 g DSS/kg par porcelet, infusé pour 5 jours
3) Expérimental résultats: Après instillation de DSS, le plasma D-mannitol absorption taux de le expérimental groupe était de manière significative plus haut que que de le contrôle groupe, indiquant que le porcelets a montré symptômes de entérite visible à le nu œil.
Fig. 3 Le DSS a induit une concentration plus élevée de D-mannitol chez les porcelets que chez les témoins
4. Drosophile modélisation
1) Des drosophiles femelles âgées de 5 à 10 jours ont été placées dans un flacon vide contenant des flacons de 2,5 × 2,5 × 1 cm en culture avec 3.Papier chromatographique de 75 cm (Fisher) milieu d'alimentation humidifié avec une solution de saccharose à 5 % ;
2) Des milieux d'alimentation contenant différents composants ont été préparés séparément avec une solution de saccharose à 5 %, et les catégories comprenaient 3 % de DSS chacun et 25 μg/ml de bléomycine ;
3) Les drosophiles ont été placées dans des flacons contenant du papier chromatographique et incubées à 29°C pendant trois jours, pendant lesquels les drosophiles survivantes ont été transférées quotidiennement dans des flacons vides contenant du milieu frais ;
4) Résultats expérimentaux : le DSS a une fonction létale et le DSS induit la prolifération des cellules précurseurs de l'ISC.
Fig. 4 Le DSS induit la prolifération des cellules précurseurs de l'ISC chez la drosophile
IV. Comment à évaluer le succès de modélisation?
1. Activité de la maladie Indice (DAI score)Trois aspects étaient évalué et marqué: poids, fécale cohérence, et fécale occulte sang, et le DAI score était le somme de les trois indicateurs.
Tableau 2 Règles de notation DAI
score (de l'étudiant) travail) | Pourcentage de poids perte | fécale viscosité | fécale sang occulte |
0 | 0 | normalité | négatifs |
1 | 1 à 5 % | doux tabouret | bleu pâle |
2 | 5 à 10 % | semblable à du mucus tabouret | bleu (couleur) |
3 | 10-20% | lâche, selles liquides | Bleu profond |
4 | >20% | / | Selles sanglantes à l'œil nu |
2. Notation de histologique changements
Histologique changements étaient marqué comme le somme de le au-dessus de, et lymphe nœud formation était pas marqué dans le aigu colite modèle. La méthode standard pour l'analyse histologique était la coloration HE (Cat. NO : 60524ES60).
Tableau 3 Scores de changement histologique
score (de étudiant nt travail ) | Ulcères (nombre) | Épithélium changements cellulaires | infiltrat inflammatoire | Ganglions lymphatiques (n°) |
0 | 0 | Normale | Aucun | Aucun |
1 | 1 | Absence de en coupe cellules | Péricryptal infiltration | 1 |
2 | 2 | Grand suppression de cellules en coupe | Infiltration de le musculaire couche de le muqueuse | 2 |
3 | 3 | fosse cryptique | Infiltration généralisée du musculaire couche de le muqueuse avec épaississant de la muqueuse | 3 |
4 | >3 | Grande absence ou polypoïde régénération de la crypte fosse | sous-muqueuse infiltration | >3 |
3. Côlon longueur
colique longueur raccourcissement était détectable sur jour 8 dans le aigu colite modèle; il était plus prononcé dans le chronique colite modèle.
4.Résumé
DSS UC animal modèle construction devrait être précédé par pré-tests à sentir le modélisation conditions, et il est recommandé Des pré-tests doivent être réalisés avec 8 à 10 échantillons par groupe, et un groupe témoin doit être constitué. En général, l'apparition de perte de poids, selles molles, diarrhée, selles sanglantes ou sang occulte dans les selles, ulcération peuvent être considérés comme si le médicament DSS était efficace et la modélisation est réussie.
VI.Yeasen DSS Modélisation Cas Étude
DSS peut construire avec succès des modèles UC avec des résultats comparables à ceux des marques importées.
Objectif: À comparer le étendue de changement dans corps poids de souris affecté par induit par le DSS aigu colite depuis différent fabricants.
Souris type : souris BALB/c ;
Modélisation protocole: 2% DSS concentration, continu écoulement libre boire pour 1 semaine.
Conclusion: Le s'orienter de corps poids perte induit par
Et nous trouvé que le aigu colite modélisation temps est principalement concentré dans à propos 7 jours, le effet est très significatif. Le Le tableau suivant présente les données de retour de certains clients.
Tableau 4 Modélisation de différents types d'entérocolite avec DSS
Moule | Modèle | Moulage Solutions | Moulage résultats | Témoignages |
colite aiguë | BALB/c souris, femelle, 6-8 semaines, 25 g | 3%-5% DSS pour 7 jours de continu fluide consommation | Jour 5 présentation avec raccourci côlon longueur, coloration HE et marqué inflammation | Vitesse de modélisation rapide et courte temps. Conforme à la caractéristiques de le aigu colite modèle |
C57BL/6 souris, mâle, 8 semaines, 20 g | 3%-5% DSS par gavage, administration continue | Jour 5 présent, raccourci côlon longueur, perte de poids, sang dans les selles, diarrhée | Haut modélisation taux et court temps. Cohérent avec aigu colite caractéristiques du modèle | |
chronique colite | C57BL/6 souris, mâle, 8 semaines, 22 g | 1 à 2 % DSS par gavage, administration continue | Jour 40 présent, raccourci côlon longueur, poids perte, sang dans tabouret, diarrhée | Haut modélisation taux. Cohérent, avec chronique colite modèle caractéristiques |
cancer du côlon | C57BL/6 souris, mâle, 8 semaines, 21 g | 1%-2% DSS librement disponible pour 5 jours pour 3 semaines | 14 semaines Présent, raccourci côlon longueur, perte de poids, coloration HE, inflammation évident | Haut modélisation taux. Cohérent avec un modèle de cancer du côlon caractéristiques |
Caractéristiques du produit :
- Les symptômes sont très similaire à ceux de humain UC: il peut être utilisé à étude le mécanisme de colite et pharmacodynamique études.
- Haute formation de moisissures tarif : gratuit boire DSS aqueux solution, simple et facile,
- canconstructa variété de colite modèles: aigu colite, chronique colite, peut aussi être combiné avec AOM à construction colite- modèle de cancer associé (CAC).
- Il convient pour le modélisation de beaucoup types de animaux: souris, rats, poissons zèbres, cochons, fruit mouches et donc
- haute sécurité : DSS peut être dégradé par le naturel écosystème, sûr pour le environnement; 6, haute pureté : haute pureté (98 %), teneur en soufre 17-19 % ;
VII.Questions fréquemment posées
Si aigu DSS colite modèle ou chronique DSS colite modèle, le gravité et succès de entérite est en rapport à souris espèces (différents contextes génétiques), concentration de DSS et cycle de dosage.
Tableau 5 Questions fréquemment posées pour la modélisation de la colite DSS
Problèmes possibles | Causes possibles | Suggéré solutions |
Haut létalité dans souris | DSS concentration aussi haut | Réduit concentration de DSS administration |
Souris avec Non ou faible signes de entérite | DSS concentration aussi faible | Élevé DSS dosage concentration; réduit faire du vélo intervalle (10- 14 jours) |
Dans le même groupe de souris, les symptômes de entérite varié considérablement | Bouchon bouché | Vérifier souris buvant des biberons quotidiennement |
VIII.Produit Commande
Nom du produit | Numéro de catalogue | Spécification |
60316ES25 |
25 g | |
60316ES60 |
100 g | |
60316ES76 |
500 g | |
60316ES80 |
1 kg | |
Kit de coloration à l'hématoxyline et à l'éosine Kit de coloration à l'hématoxyline-éosine (H&E) |
60524ES60 |
2 x 100 ml |
Modélisation de la pancréatite aiguë chez les animaux
Céruléine est un gastrique réglementaire molécule fonctionnellement et compositionnellement similaire à cholécystokinine (CCK) que stimule sécrétion gastrique, biliaire et pancréatique.Rainfrogin peut être utilisé pour étudier les voies de signalisation médiées par NF-κB régulé à la hausse des protéines telles que la molécule d'adhésion intercellulaire (ICAM-1), des facteurs liés à l'inflammation tels que la NADPH oxydase et Janus kinase. Elle a été utilisée avec succès dans l'établissement de modèles de pancréatite aiguë (PA) chez le rat, la souris, le chien et syrien hamsters.
Avantage du moulage :
- opération facile
- coût inférieur
- prototypage rapide
- modes multiples de médicament livraison
Mécanismes de modélisation :
- Régulation à la hausse de intercellulaire adhésion molécule (ICAM-1) expression dans pancréatique alvéolaire cellules par stimulant intracellulaire NF-KB. La surface ICAM-1 favorise à son tour l'adhésion des neutrophiles aux cellules alvéolaires, améliorant ainsi l'inflammation pancréatique. effets;
- induite par la pancréatite par induisant dysrégulation de digestif enzyme sécrétion et cytoplasmique vacuolisation menant à la mort des cellules alvéolaires et de l’œdème pancréatique ;
- Activation de favorisant l'inflammation facteurs.
En rapport Réactifs
Nom du produit | Numéro de catalogue | Spécification |
60321ES03 | 1 mg | |
DMSO diméthylsulfoxyde (qualité culture cellulaire) | 60313ES60 | 100 mL |
Modélisation de la maladie du diabète
La streptozocine (STZ) est un antibiotique antitumoral produit à partir d'un certain type de champignon Streptomyces, Aureobasidium pullulans, et peut également être synthétisé. Elle est souvent utilisée dans le traitement du cancer du pancréas. Parallèlement, la STZ exerce un effet destructeur sélectif sur les cellules bêta des îlots pancréatiques de certaines espèces animales et peut induire un diabète chez de nombreux animaux, généralement des rats et des souris étant utilisés comme modèles animaux. Elle a été largement étudiée dans le traitement de la leucémie, de la méthylation de l'ADN et de la néphrite.
1. SOP standard pour la construction de modèles de diabète induit par STZ
1.1 Préparation des animaux
Privilégiez les mâles ; les femelles contiennent des hormones qui affectent l'efficacité de la modélisation. Certaines études ont montré que les femelles présentent de faibles taux de modélisation et peuvent connaître des taux de mortalité plus élevés que les mâles, notamment pour le type I.
Le diabète de type I (diabète de type I) peut généralement être sélectionné en fonction du poids corporel, recommandé 170-200 g pour les rats et 17-22 g pour les souris, et le taux de modélisation est relativement idéal lorsque le STZ est injecté à jeun après 1 à 2 semaines d'alimentation adaptative.
Pour le diabète de type II, des rats (par exemple SD/Wistar) sont sélectionnés à l'âge de 4 à 5 semaines, pesant entre 90 et 100 g, et nourris avec des régimes riches en graisses (riches en sucres) pendant 4 à 6 semaines pour atteindre un poids corporel d'environ 240 à 280 g. Pour les souris (par exemple C57/ICR/Kunming), elles sont sélectionnées à l'âge de 4 à 5 semaines, pesant entre 16 et 20 g, et nourries avec des régimes riches en graisses (riches en sucres) pendant 4 à 6 semaines pour atteindre un poids corporel d'environ 30 à 35 g.Pour les animaux nouvellement acquis ou ceux qui changent d'environnement alimentaire, il est nécessaire de les nourrir avec une alimentation régulière pendant une semaine avant de sélectionner l'âge/poids approprié pour passer à une alimentation riche en graisses (riche en sucres). Pour les souris (par exemple, les souris C57/ICR/Kunming), sélectionnez des animaux âgés de 4 à 5 semaines, pesant 16 à 20 g, et nourris avec une alimentation riche en graisses (riche en sucres) pendant 4 à 6 semaines pour atteindre un poids corporel d'environ 30 à 35 g. Pour les animaux nouvellement acquis ou ceux qui changent d'environnement alimentaire, il est nécessaire de les nourrir de manière adaptative avec une alimentation normale pendant une semaine, puis de sélectionner les animaux d'âge/poids hebdomadaires appropriés et de passer à une alimentation riche en graisses et en sucres. En termes de succès de modélisation, SD est recommandé pour les rats et C57 pour les souris.
1.2 Alimentation avant moulage
L'alimentation avant la modélisation, le modèle de diabète de type I est relativement rapide, généralement les rats peuvent commencer la modélisation après 2 semaines d'alimentation adaptative avec une alimentation normale ; modèle de diabète de type II : induction d'un régime riche en graisses plus une petite dose de STZ. une alimentation riche en graisses (riche en sucre) a été administrée avant la modélisation, ce qui a induit une résistance à l'insuline.
1.3 Préparation de réactifs
①Riche en matières grasses (riche en sucre) flux
Riche en matières grasses (riche en sucre) alimentation ingrédients: contient 10% saccharose, 10% saindoux, 5% cholestérol
Riche en matières grasses et riche en sucre flux étaient fait par combinant basique rat alimentation avec saccharose, condensé saindoux et œuf vitellus dans le rapport massique suivant : 18 % de saindoux, 20 % de saccharose, 3 % de jaune d'œuf et 59 % d'aliment de base.
② Préparation de STZ solvant - sodium citrate tampon
Préparation de Liquide UN et Liquide B: Peser 2,1 g de citrique acide (FW:210.14) et ajouter il à 100 ml de double distillation eau faire Liquide A. Peser 2,94 g de citrate de sodium (FW:294.10) et ajoutez-le à 100 ml d'eau bidistillée pour faire du liquide B.
Préparation de sodium citrate tampon: Mélanger UN et B liquide dans un certain proportion (1:1.32 ou 1:1), pH mètre à déterminer le Valeur du pH, ajustez la valeur du pH à 4,2-4,5, c'est-à-dire le tampon de citrate de sodium requis.
1.4 Préparation avant injection
Avant préparation STZ injection, STZ lyophilisé poudre était mis dans un sec stérilisé ampoule, enveloppé extérieurement avec aluminium déjouer ou du papier d'aluminium, pré-refroidi dans une glace bain avec sodium tampon citrate, et apporté au animal chambre pour la sauvegarde.
Note: Après suppression le STZ lyophilisé poudre depuis les -20°C réfrigérateur, partir il sec et protégé depuis lumière à chambre température pendant environ 10 minutes pour permettre il faut le décongeler complètement (très important).
1.5 Préparation de solution injectable
Les rats étaient pesé et sang glucose concentrations étaient mesuré après du jour au lendemain jeûne (Non eau). Les rats étaient groupés afin de préparer l'injection de STZ en fonction du nombre d'animaux et de la dose à injecter. Dissoudre la STZ à 1 % concentration (p/v), filtrer et stériliser, en gardant à l'esprit que le STZ est complètement dissous.
Attention:
1STZ est instable et facile à inactiver, le restant réactif après rapide pesée toujours nécessite séchage et lumière protection, et il est recommandé de l'envelopper dans du papier aluminium sec (ou du papier d'aluminium).
2Si toi sont pas qualifié dans injection, faire pas dissoudre le STZ à un temps, et il est recommandé que toi dissoudre le STZ dans groupes, tels que 10 ou 15 rats/groupe, selon votre niveau de compétence.
③Le STZ peut être aussi pesé à l'avance et dispensé dans le montant requis pour groupement animal.
1.6 Injection
Injecter par voie intrapéritonéale ou dans la veine caudale, selon le poids à jeun de l'animal. Si l'injection est nécessaire, technique est pas habile, deux groupes devrait être injecté alternativement, et le injection devrait être complété dans 30 minutes. Remarque : la plupart des injections nécessitent une injection rapide.
Attention:
Taper Modèle du diabète : dose pour rat 70-65 mg/kg
Taper II diabétique modèle: Les rats nourri avec haut sucre et haut graisse pour 1-2 mois étaient traité avec STZ à un dose de 25 à 40 mg/kg.
1.7 Après injection
Après l'injection de STZ, les animaux doivent recevoir suffisamment d'eau et de nourriture (les caractéristiques de vie de base des diabétiques). rats), et le literie besoins à être modifié tous les jours à garder le cage sec. Quand alimentation, prendre soins à éviter fort soleil. Stériliser aussi souvent que possible.
Note: Après STZ modélisation, fluctuations dans apparent sang glucose niveaux montrer 3 temporel phases, transitoire hyperglycémie (1- 2 h), hypoglycémie transitoire (6 à 10 h) et hyperglycémie persistante (> 72 h). L'insuline et le glucose doivent être administrés de manière appropriée. complété.
2. Indicateurs pour évaluer le modélisation effet de induit par STZ diabète modélisation
Le suivant indicateurs étaient dénombré en comparaison avec le contrôle groupe:
- Indicateurs généraux : les phénomène de excessif boire, manger et uriner, et poids perte;
- Autres indicateurs : jeûne sang glucose, jeûne sérum insuline niveau, sérum insuline niveau, insuline sensibilité, glucose tolérance et ainsi de suite;
- Indicateurs biochimiques sériques : T-Cho, TG, HDL-C, LDL-C, CR, CHIGNON, Alt, etc.
- Lames pathologiques : histopathologiques diapositives de le pancréas
3. Explication de le raisons pour le échec de le induit par STZ diabète modèle
- 1. la qualité de STZ est le clé, la pureté de STZ pour la modélisation devrait ne sois pas moins plus de 98% (Test HPLC).
- 2. Défaillance STZ : doit être stocké au sec, éviter l'humidité.Éviter de laisser la poudre à température ambiante pendant une durée prolongée. très instable, avec un demi-vie de 15 minutes à neutre Payer attention à dissoudre STZ avec acide pH, de préférence dans un glace bain.
- Que ce soit ou non le l'injection intrapéritonéale est injecté dans les intestins et d'autres organes.
Si le modèle est pas en haut à standard, il est recommandé que, si le modèle est pas en haut à standard, il devrait être réinjecté pour un autre 3 jours.
4. Explication de le causes de induit par STZ haut mortalité dans souris/rats
4.1. Le rats poids est aussi faible;
4.2. Assez boire l'eau doit être garanti (insuffisant boire eau peut facilement conduire à rats morts).
4.3. Une glycémie élevée ou basse peut entraîner la mort de rats. Évitez les rats morts en leur injectant de l'insuline ou du sucre temporaire. supplémentation, deux façons : 1 Communément haut sang sucre. Insuline supplémentation méthode, supplément quelques action moyenne insuline. Par exemple, administrez de la Novolin N ou de la NPH (insuline zinc neutre à base de protéines de poisson), 2 à 3 unités à chaque fois, après 3 à 5 jours, selon la posologie générale. le taux de mortalité des rats sera faible ; 2. Méthode de supplémentation en sucre : après le jeûne des rats, l'injection a été effectuée dans un état hypoglycémique état, le moulage de 4 heures après l'injection intrapéritonéale de glucose à 20 %, peut être évité grâce à l'injection de hypoglycémie mort des rats ;
4.4. Prévenir animaux depuis meurtre chaque autre. Manque de nourriture et insuffisant eau fournir volonté larme chaque autre à part et grignoter sur leur propre espèce, donc la nourriture et l'eau doivent être fournies en quantité suffisante, de préférence de deux manières.
4.5.Prévenir infection. Diabétique rats uriner un parcelle, le literie est humide et besoins à être modifié fréquemment, donc diabétique les rats sont plus sujet aux infections que les autres rats, notamment aux infections urinaires et abdominales. Avant et après une intervention invasive opérations telles que l'injection intrapéritonéale, l'injection sous-cutanée et la collecte de glycémie, une attention particulière doit être portée à stérilisation. Pour exemple, tétracycline (ou gentamycin ophtalmique pommade) peut être appliqué localement à traiter le blesser à prévenir infection après chaque prélèvement de glycémie.
5. Facteurs affectant diabète modélisation
Les facteurs influençant la modélisation de la maladie du diabète comprennent la qualité des réactifs de modélisation STZ, l'état de l'animal et administration méthode. Parmi eux, le principal propriétés de le réactifs sont pureté, stabilité, solubilité caractéristiques, etc. Le L'état de l'animal comprend principalement le contexte génétique, le sexe, le poids corporel, l'environnement alimentaire et le régime alimentaire. structure, etc., et le mode d'administration comprend le temps d'administration, l'intervalle d'administration et la voie d'administration. Les facteurs différenciés entraînent des effets de modélisation différenciés.
6. Le STZ modélisation méthodologie idées trié dehors
Standardisation de le influencer facteurs est un garantie de atteindre le modélisation but et modélisation de la stabilité.Théoriquement, tous modélisation animale expériences nécessitent une préexpérimentation.
Dans le cas d'un modèle de diabète induit par STZ, le dosage de STZ doit se référer aux résultats des pré-tests et essayer de ne pas le faire aveuglément. suivre le dosage dans la littérature ou d'autres à utiliser directement, comme le poids moyen des rats et à jeun (état de glucose bas) la résistance, la durée du jeûne, le moment des injections, ainsi que le processus d'alimentation précédent, le temps de glucose mesures, et donc sur, sont différent, et il est le la plupart scientifique à déterminer le dosage mesures dans conformité avec leur Nous avons testé nos propres souris expérimentales grâce à des pré-tests. La méthode la plus scientifique consiste à déterminer le dosage du médicament par des pré-tests.
7.Élevé Modélisation Succès Taux STZ Usage Lignes directrices
STZ préservation, dissolution, distribution et autres précautions pour utiliser, voir le officiel site web de la réactifs pertinents.
8. Produits
Taux de réussite élevé : pureté ≥ 98% (HPLC détermination); écurie qualité, rentable, approvisionnement ponctuel, après-vente garantie.
Nom du produit | Numéro de catalogue | Spécification |
60256ES60/76 | 100/500 mg | |
60256ES80 | 1 g | |
Acide citrique monohydraté Acide citrique monohydraté | 60347ES25 | 25 g |
Sel trisodique d'acide citrique, dihydraté | 60348ES25 | 25 g |
(Pour plus information sur le utiliser de STZ moulage, s'il te plaît vérifier le spécial article sur
[1] Li, , Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. L'acide valérique dérivé du commensal intestinal protège contre les lésions radiologiques. Gut Microbes,.2020 .1-18. IF=10.245
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Modélisation de la polyarthrite rhumatoïde
La polyarthrite rhumatoïde (PR) est une maladie inflammatoire chronique des articulations caractérisée par une synovite persistante, une inflammation systémique, accompagnée d'une érosion des os et du cartilage, qui peut éventuellement conduire à une ankylation et une déformation des articulations.
L'adjuvant de Freund a été inventé par Jules Freund dans les années 40 du XXe siècle. Il s'agit d'une émulsion antigénique qui mélange une quantité égale de solution aqueuse d'antigène avec une huile, puis ajoute un émulsifiant pour obtenir une émulsion eau-dans-huile. C'est l'adjuvant le plus couramment utilisé en expérimentation animale. L'adjuvant de Freund se divise en adjuvant complet de Freund (CFA) contenant Mycobacterium tuberculosis et en adjuvant incomplet de Freund (IFA) sans Mycobacterium tuberculosis, principalement utilisés pour induire l'arthrite induite par le collagène (modèle CIA) et l'arthrite induite par l'adjuvant (modèle AA) chez la souris.
1. Étapes de modélisation de l'arthrite induite par le collagène (CIA) (pour référence uniquement)1) Préparez les réactifs appropriés, faites attention à la mise en place du groupe expérimental et du groupe témoin.
2) Le collagène bovin de type 2 (CII.) a été dissous dans une solution d'acide acétique glacial à une concentration de 2 mg/mL à 4°C pendant la nuit.
3) L'adjuvant incomplet de Freund a été complété par Mycobacterium tuberculosis inactivé à une concentration de 2 à 5 mg/mL pour préparer l'adjuvant complet de Freund. La concentration de Mycobacterium tuberculosis dans l'adjuvant complet de Freund 60718ES fourni par Yisheng Biotech était inférieure à 10 mg/mL.
4) La solution d'acide acétique de collagène bovin de type 2 (CII.) est mélangée avec une quantité égale d'adjuvant complet de Freund et émulsifiée.
5) Injection sous-cutanée de 0,1 à 0,2 mL sur le dos de chaque souris expérimentale.
6) Après 3 semaines, la même quantité d'adjuvant incomplet Fund a été mélangée à une solution d'acide acétique de collagène bovin de type 2 (CII) et émulsifiée, et chaque souris a été injectée par voie sous-cutanée à la base de la queue pour un total de 0,1 à 0,2 mL.
7) Examen pathologique : les souris du groupe expérimental et du groupe témoin ont été retirées, fixées au formaldéhyde à 4 % pendant plus de 48 heures, décalcifiées au nitrate à 5 % pendant 2 heures, infiltrées au xylène et incluses en paraffine. Des coupes ont été réalisées, colorées à l’HE et observées au microscope optique conventionnel.
2. Étapes de modélisation de l'arthrite induite par adjuvant (AA) (pour référence uniquement)1) Préparez les réactifs appropriés, faites attention à la mise en place du groupe expérimental et du groupe témoin.
2) Registre d'observation : Généralement, 7 à 12 jours après la deuxième immunisation, plus de 80 % des souris présentent des symptômes d'arthrite.Selon la rougeur, le gonflement et l'activité des parties articulaires des souris, les symptômes cliniques ont été classés et les enregistrements d'observation ont été observés avant l'expérience et les 3e, 5e, 7e et 12e jours après l'expérience, respectivement, et la référence de classification des grades est la suivante :
Indice de qualité | Symptôme |
0 | L'activité est normale, aucun signe d'érythème et de gonflement |
1 | Activité normale, rougeur de la peau, mais pas de gonflement significatif |
2 | L'activité est légèrement affectée et on observe des rougeurs et des gonflements au niveau des pattes et des pieds ou des articulations des genoux. |
3 | L'activité est affectée et les pattes, les orteils ou les genoux sont légèrement déformés, rouges et enflés |
4 | Troubles du mouvement, rougeur et gonflement importants des orteils ou des genoux des pieds, des griffes, des orteils ou des genoux, et raideur ou déformation |
3) Mesure de la souris : Le volume des articulations des membres postérieurs des souris avant et après l'expérience a été mesuré à l'aide d'un appareil de mesure du volume des pattes en griffe de souris, et le volume des articulations du genou des pattes postérieures de chaque souris a été mesuré en dessous d'environ 5 mm, répété trois fois, la valeur moyenne a été enregistrée et le test a été effectué une fois tous les trois jours.
4) Examen pathologique : les souris du groupe expérimental et du groupe témoin ont été retirées, fixées au formaldéhyde à 4 % pendant plus de 48 heures, décalcifiées au nitrate à 5 % pendant 2 heures, infiltrées au xylène et incluses en paraffine. Des coupes ont été réalisées, colorées à l’HE et observées au microscope optique conventionnel.
3.FAQ
Problèmes pouvant survenir | Répondre |
Quelle est la différence entre l'adjuvant complet de Freund (CFA) 60718ES et l'adjuvant incomplet de Freund (IFA) 60719ES ? | L'adjuvant complet de Freund (CFA) contient des bacilles de Mycobacterium tuberculosis inactivés et tués par la chaleur qui stimulent une forte réponse immunitaire ; l'adjuvant incomplet de Freund (IFA) est dépourvu de Mycobacterium tuberculosis et stimule une réponse immunitaire plus faible. |
Quelle est la quantité spécifique de BCG dans l'adjuvant complet de Freund (CFA) 60718ES ? | La teneur en BCG est inférieure à 10 mg/mL. |
Lorsqu'il est utilisé pour la modélisation animale de la polyarthrite rhumatoïde, comment choisir l'adjuvant complet de Freund (CFA) et l'adjuvant incomplet de Freund (IFA) ? | Étant donné que les rats sont généralement plus sensibles que les souris, les souris sont généralement traitées avec du CFA, et les rats peuvent également être traités avec de l'IFA, mais le CFA sera mieux utilisé. |
Recommandations de produits connexes
Classer | Nom du produit | Numéro de catalogue | Spécification |
Modèle de polyarthrite rhumatoïde | Adjuvant complet de Freund (CFA) | 60718ES | 10 mL/5 x 10 mL |
Adjuvant incomplet de Freund (IFA) | 60719ES | 10 mL/5 x 10 mL |
Modélisation hypertensive
L'hypertension est caractérisée par une augmentation de la pression artérielle systémique (pression artérielle systolique et/ou diastolique)., qui se manifeste par la pression artérielle systémique (pression artérielle systolique ≥ 140 mmHg et/ou pression artérielle diastolique ≥ 90 mmHg), maladie chronique la plus fréquente et facteur de risque majeur de maladies cardiovasculaires et cérébrovasculaires, souvent accompagnée de syndromes cliniques avec lésions fonctionnelles ou organiques du cœur, des reins, du cerveau et d'autres organes. L'étude de la prévention et du traitement de l'hypertension revêt une importance pratique majeure, et la mise en place d'un modèle animal d'hypertension constitue un volet important de cette étude.
Modèles d'hypertension animale On distingue les modèles génétiquement apparentés des modèles non génétiquement apparentés. Les modèles génétiquement apparentés incluent les modèles animaux héréditaires et génétiquement modifiés, tandis que les modèles non génétiquement apparentés désignent généralement les modèles induits par des facteurs environnementaux, chirurgicaux et médicamenteux. Les sujets de recherche modélisés incluent généralement les porcs, les moutons, les lapins, les chiens, les souris et les rats, etc., mais la plupart des expériences sont modélisées sur des souris et des rats. Les modèles animaux d'hypertension couramment utilisés sont le modèle SHR de rats hypertendus spontanés et le modèle d'hypertension induite par des médicaments.
- Modèle animal d'hypertension héréditaire
1.1 Modèle SHR de rats spontanément hypertendus
Les rats hypertendus spontanés, également appelés rats SHR, présentent une incidence d'hypertension proche de 100 % et constituent les modèles animaux les plus utilisés. La pression artérielle systolique des rats normaux est de 110 à 120 mmHg, tandis que celle des rats SHR commence à augmenter après 4 à 6 semaines, et peut atteindre plus de 200 mmHg après la reproduction.
Avantages : L'incidence de l'hypertension est élevée, l'évolution de la maladie est courte et les changements pathologiques des organes cibles lors de son apparition peuvent être observés.
Inconvénients : Le cycle de reproduction est long, les conditions d'alimentation ont certaines exigences et le prix est légèrement plus cher que celui des rats ordinaires.
1.2 Modèle SHRsp de rats souffrant d'hypertension spontanée et prédisposés aux accidents vasculaires cérébraux
Les rats hypertendus spontanément sujets aux accidents vasculaires cérébraux (AVC), également appelés rats SHRsp, présentent une incidence d'hypertension de près de 100 % et d'AVC de près de 80 %. La pression artérielle chez ces rats a commencé à augmenter après 4 à 6 semaines et pouvait atteindre 200 mm Hg après 10 à 15 semaines.
Avantages : L’incidence de l’hypertension est proche de 100 % et l’incidence de l’accident vasculaire cérébral est de 80 %, ce qui en fait un modèle animal idéal pour la recherche sur les accidents vasculaires cérébraux.
Inconvénients : cycle de culture long, sélection génétique difficile, facile à muter, casse.
- Modèle d'hypertension induite par les médicaments
2.1 Induction de l'angiotensine II (AngII.)
2.1.1 Méthodes expérimentales (à titre indicatif uniquement)
Des souris mâles âgées de 8 à 12 semaines ont reçu une injection sous-cutanée d'angiotensine II et de sérum physiologique par pompe osmotique. La dose d'Angiotensine II était généralement de 100 ng/(kg·min) pendant 2 à 4 semaines. La durée d'administration peut être raccourcie ou prolongée selon la situation.
2.1.2 Images expérimentales (extraits de la littérature)
Application 1 : Angiotensine II. Les souris nourries avec une solution de NaCl pendant 28 jours, le groupe expérimental comparé au groupe témoin, la pression artérielle a augmenté de manière significative.
Fig.5 Modifications de la pression artérielle et de la fréquence cardiaque chez la souris (A est la pression artérielle systolique, B est la pression artérielle moyenne, C est la pression artérielle diastolique, D est la fréquence cardiaque)
2.2 Induction par l'acétate de désoxycorticostérone (DOCA)
L'acétate de désoxycorticostérone (DOCA) peut inhiber le système rénine-angiotensine, entraînant une faible activité rénine plasmatique, ce qui entraîne une augmentation de la pression artérielle, généralement en implantant une pompe sous-cutanée à libération prolongée de DOCA ou en injectant du DOCA et en ajoutant une solution de NaCl pour induire la formation d'hypertension.
Il est principalement applicable à la recherche sur le système rénine-angiotensine (RAS) et le métabolisme de l'eau et du sodium dans l'hypertension, et le modèle peut faire augmenter la pression artérielle de manière stable et la méthode est simple.
2.2.1 Méthodes expérimentales (à titre indicatif uniquement)
Le rein gauche de rats mâles normaux de 250 à 275 g a été réséqué et le milieu en caoutchouc composé de DOCA et de gel de silice a été placé sous la peau entre les omoplates des deux côtés du rat, ou après le retrait du rein gauche, le DOCA a été injecté par voie sous-cutanée à 50 mg/(kg·j) par jour, et il convient de noter que les rats DOCA devaient boire une solution de NaCl à 1 % pendant le processus d'alimentation, et la pression artérielle des rats a été mesurée après 3 à 5 semaines d'opération.
2.2.2 Images expérimentales (extraits de la littérature)
Application 1 : Après le retrait du rein unilatéral, du DOCA a été ajouté et les résultats ont montré que la pression artérielle des souris du groupe témoin était relativement constante, mais que la pression artérielle des souris du groupe expérimental a augmenté de manière significative.
Fig.6 Diagramme des variations de la pression artérielle chez la souris
2.3 Modèle animal d'hypertension induite par l'ester méthylique de N-nitro-L-arginine (L-NAME)
Le L-NAME est un inhibiteur compétitif de l'oxyde nitrique synthase, une substance active qui favorise la fonction endothéliale et diminue la pression artérielle lorsque le taux d'oxyde nitrique augmente. L-NAME, inhibiteur compétitif de l'oxyde nitrique synthase, peut affaiblir l'effet vasodilatateur de l'oxyde nitrique et entraîner l'apparition d'hypertension. Par conséquent, un modèle animal d'hypertension causée par un déficit prolongé en NO a pu être établi, principalement chez le rat.
Il est principalement adapté à l'étude du système d'oxyde nitrique et du système cardiovasculaire dans l'hypertension, et le modèle peut faire augmenter la pression artérielle de manière stable et continue, et la méthode est simple.
2.3.1 Méthodes expérimentales (à titre indicatif uniquement)
Des rats mâles âgés de 3 à 4 semaines ont reçu une injection intrapéritonéale (ou un aliment) de L-NAME à raison de 20 à 50 mg/(kg·j) et une administration une fois par jour pendant 4 semaines, et le groupe témoin a reçu uniquement une injection intrapéritonéale (ou un aliment) d'eau distillée, et les changements des rats ont été surveillés quotidiennement.
Après l'expérience, le poids corporel, la pression artérielle, la fréquence cardiaque, les indices biochimiques sériques et d'autres indices biochimiques du groupe expérimental et du groupe témoin ont été mesurés.
2.3.2 Tableaux et images expérimentaux (extraits de la littérature)
Application 1 : Après l'inscription, la pression artérielle du groupe modèle a progressivement augmenté avec l'allongement de la durée de prise de L-NAME et a atteint la norme d'hypertension à la 4e semaine, qui était significativement plus élevée que celle du groupe témoin correspondant.
Application 2 : Une hypertension s'est formée après 4 semaines d'irrigation chez les rats, ce qui était significativement plus élevé que celui des rats du groupe témoin correspondant, et l'extrait aqueux de graines de cassia pouvait réduire la pression et améliorer les lésions rénales.
2.4 Comparaison des modèles d'hypertension induite par les médicaments
Modèle d'hypertension induite par les médicaments | Angiotensine II. (AngⅡ) | Acétate de désoxycorticostérone (DOCA) | Ester méthylique de N-nitro-L-arginine (L-NAME) |
Description de la méthode | Injection sous-cutanée par pompe osmotique, AngII.la dose est généralement de 100 ng/(kg·min) | Tout d'abord, le rein unilatéral a été réséqué et 50 mg/(kg·j) de DOCA ont été injectés par voie sous-cutanée, et une solution de NaCl à 1 % a été bue en même temps. | L'injection intrapéritonéale (ou gavage) de 20 à 50 mg/(kg·j) de L-NAME, comme boire une solution de NaCl à 1 %, peut accélérer le moulage |
Cycle de moisissure | 2 à 4 semaines | 3 à 5 semaines | 4 à 5 semaines |
Scénarios d'application | Recherche sur les dommages causés par le stress oxydatif et le RAS | Études liées au RAS et à l'eau sodique Recherches liées au métabolisme | Système NO, recherche liée au système cardiovasculaire |
Recommandations de produits connexes (résumé)
Classifier | Nom du produit | Numéro de catalogue | Sspécification |
Modèle d'hypertension | Chlorhydrate de L-NAME (L-NAME HCl) | 52302ES | 100 mg |
Angiotensine II humaine | 54041ES | 10 mg | |
Acétate de désoxycorticostérone | 54344ES | 50 mg/500 mg | |
Modèle de polyarthrite rhumatoïde | Adjuvant complet de Freund (CFA) | 60718ES | 10 mL/5 x 10 mL |
Adjuvant incomplet de Freund (IFA) | 60719ES | 10 mL/5 x 10 mL | |
Modèle de colite | 60316ES | 25 g/100 g/500 g/1 kg | |
Modèle animal de pancréatite aiguë | 60321ES | 1 mg | |
Modèle de maladie diabétique | 60256ES | 100 mg/500 mg/1 g |
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