La culture cellulaire est la pierre angulaire de nombreuses applications de recherche, du développement de médicaments à la thérapie génique. Cependant, maintenir des cultures saines et proliférantes peut s'avérer difficile sans la bonne approche et les bons outils. Que vous soyez un scientifique chevronné ou un novice en culture cellulaire, l'optimisation de chaque étape du processus peut faire toute la différence. Dans ce guide, nous vous présenterons cinq conseils essentiels pour garantir le succès de vos cultures cellulaires, de la digestion à la prévention de la contamination.
1. Perfectionnez votre digestion cellulaire
La digestion cellulaire est une étape cruciale dans les expériences de culture cellulaire, facilitant le détachement des cellules de la surface de culture et leur séparation en une suspension cellulaire unique pour la sous-culture et les analyses ultérieures. Le choix de la bonne enzyme de digestion peut améliorer l'efficacité de la séparation cellulaire, réduire les dommages cellulaires et assurer une progression expérimentale fluide. Pour vous aider à sélectionner l'enzyme de digestion la mieux adaptée à vos besoins, nous avons compilé un guide sur plusieurs produits enzymatiques couramment utilisés et leurs caractéristiques. Vous pouvez choisir le produit le plus approprié en fonction du type de cellule, des exigences expérimentales et des applications en aval.
Enzymes digestives courantes
- Trypsine (utilisée pour hydrolyser les protéines intercellulaires)
- Trypsine recombinante (exempte de contamination d'origine animale, adaptée aux applications biopharmaceutiques)
- Collagénase (utilisée pour dégrader les fibres de collagène, idéale pour la digestion des tissus)
- Trypsine composite (comme l'Accutase, qui préserve mieux les antigènes de surface cellulaire)
- Alternatives à la trypsine (comme TrypLE™, parfait pour les cultures cellulaires sans sérum)
- Dispase II (pour la séparation de divers tissus et cellules).
Chaque enzyme a ses applications et ses avantages uniques, et sélectionner la bonne peut améliorer considérablement l’efficacité expérimentale et la qualité de vos résultats.
| Nom du produit | Numéro de chat | Spécification |
| PerfCel™l Trypsine-EDTA (0,25 %), Non Rouge de phénol | 40123ES60 | 100 ml |
| Cellule de performance™ Trypsine sans EDTA (0,25 %), sans rouge de phénol | 40124ES60 | 100 ml |
| Cellule de performance™ Trypsine (0,25 %), rouge de phénol | 40126ES60 | 100 ml |
| Cellule de performance™ Trypsine-EDTA (0.25%), rouge de phénol | 40127ES60 | 100 ml |
| Trypsine 1:250 (poudre) | 40101ES25 | 25 g |
| Cellule de performance™ Trypsine recombinante（poudre） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | 100 μg | |
| Enzyme PerfCel Tryzyme™ Express (1X), rouge de phénol | 40134ES60 | 100 ml |
| Enzyme PerfCel Tryzyme™ Express (1X), Non Rouge de phénol | 40135ES60 | 100 ml |
| Solution de dissociation cellulaire ACCUTASE | 40506ES60 | 100 ml |
| Dispase II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 g |
2. Créer l’environnement de culture idéal
Une culture saine commence par un environnement adapté. Cela comprend une température, un pH et un milieu de culture adaptés à votre type de cellule. Yeasen propose une gamme de milieux de culture cellulaire spécialement formulés pour soutenir une variété de lignées cellulaires, en leur fournissant les nutriments essentiels et les facteurs de croissance dont elles ont besoin.
Culture cellulaire sans sérum est devenue une technologie essentielle dans la recherche biologique, garantissant la répétabilité, la cohérence et les normes éthiques. Les cultures cellulaires traditionnelles reposent sur le sérum fœtal bovin (SVF), ce qui entraîne une certaine variabilité des résultats expérimentaux et des risques éthiques liés à l'origine animale. Pour relever ces défis, de nombreux chercheurs optent de plus en plus pour des milieux de culture sans sérum.
Dans la recherche immunologique, culture de lymphocytes Les lymphocytes jouent un rôle crucial, notamment dans les domaines de la réponse immunitaire, du développement de vaccins et de l'immunothérapie contre le cancer. En tant que composants centraux du système immunitaire, les lymphocytes nécessitent des conditions de culture spécifiques pour proliférer et s'activer in vitro. Yeasen fournit des milieux de culture conçus spécifiquement pour la prolifération et l'activation des lymphocytes, qui peuvent simuler avec précision les réponses immunitaires in vivo et aider les chercheurs à obtenir des données plus fiables dans l'activation des lymphocytes T, la production d'anticorps et la recherche en immunologie cellulaire.
En outre, culture d'organoïdes représente une autre avancée importante dans la technologie de la culture cellulaire. Les organoïdes sont des structures cellulaires tridimensionnelles qui peuvent simuler les tissus humains et les fonctions des organes in vitro, offrant une nouvelle plate-forme de recherche pour la modélisation des maladies, le criblage de médicaments et la médecine régénérative. La structure tridimensionnelle des organoïdes reproduit mieux la complexité et les fonctions physiologiques des organes humains et est devenue un outil important pour étudier le développement des organes, les mécanismes des maladies et les réponses thérapeutiques.
| Nom du produit | Numéro de chat | Spécification |
| Milieu de culture de cellules d'insectes CelCulSF™（Sans sérum） | 40140ES | 1000 ml |
| Milieu de culture cellulaire CelCulSF™ 293（Sans sérum） | 40141ES | 1000 ml |
| Milieu de culture de lymphocytes CelCulSF™（Sans sérum） | 40142ES | 1000 ml |
| Milieu de culture cellulaire pour hybridomes CelCulSF™（Sans sérum） | 40143ES | 1000 ml |
| Cellule souche mésenchymateuse CelCulSF（MSC）Milieu de culture（Sans sérum） | 40144ES | 500 ml |
| Milieu de culture cellulaire adhérent CelCulSF™（Sérum réduit） | 40145ES | 1000 ml |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes intestinaux (souris) | 41426ES60/76 | l00/500 mL |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes du cancer intestinal (humain) | 41427ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes du cancer gastrique (humain) | 41428ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes du cancer du foie (humain) | 41429ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes du cancer du sein (humain) | 41430ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes du cancer du poumon (humain) | 41431ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Cebrary® Œsophagien Milieu de croissance des organoïdes cancéreux (humain) | 41432ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Cebrary® Milieu de croissance des organoïdes du cancer de l'ovaire (humain) | 41433ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
| Milieu de croissance des organoïdes du cancer du pancréas Cebrary® (humain) | 41434ES50/60/76 | 50/l00/500 mL |
3.Transfection efficace pour une expression génétique de haute qualité
La transfection cellulaire est une technique essentielle dans la recherche biomédicale, permettant l'introduction d'acides nucléiques exogènes (tels que l'ADN, l'ARNm, l'ARNsi et l'ARNmi) dans les cellules pour l'expression génétique, le silençage ou les études fonctionnelles. Avec divers types de cellules et d'acides nucléiques, la sélection du bon réactif de transfection est essentielle pour des expériences réussies.
Réactifs de transfection chimique, y compris formulations à base de liposomes, de PEI et de phosphate de calcium, chacun offre des avantages uniques. Yeasen Biology a développé une gamme de produits diversifiée optimisée pour diverses applications de transfection, notamment la transfection à haute efficacité pour l'ADN, l'ARNsi, l'ARNmi et l'ARNm, avec un succès vérifié sur plus de 40 lignées cellulaires. Ces réactifs offrent une efficacité de transfection élevée, de vastes scénarios d'application et des produits de qualité GMP pour la production commerciale, garantissant des résultats fiables et efficaces dans la recherche et les applications industrielles.
| Numéro de chat | Nom du produit | Acide nucléique | Application |
| 40802ES | ADN | Réactif de transfection de liposomes à haute performance | |
| 40804ES | LV | Améliorer la capacité d’infection lentivirale. | |
| 40806ES | siARN, miARN, ASO | Réactifs de transfection spécifiques siRNA et miRNA avec une efficacité de knockdown élevée. | |
| 40808ES | ADN, siRNA, miRNA | Réactif de transfection de liposomes amélioré qui peut effectuer des transfections d'ADN et d'ARN dans divers types de cellules, montrant toujours de bons effets sur les cellules difficiles à transfecter. | |
| 40809ES | ARNm | Réactif de transfection spécifique de l'ARNm avec une efficacité de transfection élevée dans une variété de types de cellules. | |
| 40815ES | ADN | Largement applicable pour l’expression des protéines et l’emballage viral (sous forme de poudre). | |
| 40816ES | Hieff Trans®Polyéthylèneimine Linéaire (PEI) MW40000（lyse rapide） | ADN | |
| 40820ES | ADN | Réactifs de transfection dédiés à l'emballage viral, capables d'atteindre des rendements plus élevés pour l'emballage viral AAV et LV | |
| 40821ES | ADN | ||
| 40823ES | ADN | Efficacité de transfection la plus élevée. Particulièrement adapté à la production d'AAV en culture en suspension, pour des rendements plus élevés. |
4. Cryoconservation de vos cellules pour une utilisation à long terme
La congélation des cellules est une technique essentielle pour la conservation à long terme des cellules, car elle permet de prévenir la contamination, de maintenir la cohérence expérimentale, de faciliter l'expédition et de créer des banques de cellules. Les principaux risques liés à la congélation sont les suivants : formation de cristaux de glace et dommages causés par la solutionPour atténuer ces risques, il est essentiel d'utiliser des protocoles de congélation lente et de décongélation rapide. Les cryoprotecteurs comme le glycérol ou le diméthylsulfoxyde (DMSO) sont couramment utilisés pour réduire la formation de cristaux de glace et le stress osmotique.
Yeasen propose deux solutions de cryoconservation spécialisées : CellStore Freezing pour les cellules de mammifères et Insect Cell Store Freezing pour les cellules d'insectes. Les deux produits présentent des formulations uniques qui permettent une congélation directe à -70 °C sans procédures de refroidissement complexes et offrent des taux de survie cellulaire élevés après décongélation, en particulier pour les cellules sensibles au DMSO ou qui ont tendance à s'agglutiner. Ces solutions sont exemptes de composants sériques ou protéiques, ce qui garantit l'absence de contamination par des sources bovines et sont idéales pour les cultures sans sérum.
| Nom du produit | Numéro de chat | Spécification |
| Congélation des cellules de mammifères | 40128ES50 | 5×10 mL |
| Congélation des cellules de mammifères | 40128ES60 | 100 ml |
| Stockage des cellules d'insectes Congélation | 40129ES50 | 5×10 mL |
| Stockage des cellules d'insectes Congélation | 40129ES60 | 100 ml |
| Milieu de congélation de cellules sans sérum | 40151ES | 50 mL/100 mL |
| Milieu de congélation cellulaire sans sérum (sans DMSO) | 40152ES | 100 ml |
| Milieu de congélation cellulaire sans sérum (pour cellules souches) | 40153ES | 100 ml |
| Milieu de congélation cellulaire sans sérum (pour cellules souches, sans DMSO) | 40154ES | 100 ml |
5. Prévenir la contamination pour des cultures saines
La contamination est un problème courant dans la culture cellulaire, entraînant souvent des résultats compromis et une perte de temps de recherche. Reconnaître les différents types de contamination est essentiel pour une prévention et une élimination efficaces.
Cellule commune contaminants
- Bactéries
- Champignons
- Mycoplasme
- Protozoaires
- taches noires
- Virus
- inter-espèces
Les mesures préventives comprennent l'utilisation d'antibiotiques, la désinfection régulière du matériel, le respect des techniques stériles et le maintien de la propreté des zones de travail. En cas de détection d'une contamination, il est généralement conseillé de jeter les cultures concernées, à moins qu'elles ne soient rares ou précieuses. Dans de tels cas, des mesures doivent être prises pour éliminer le contaminant. Il est recommandé d'établir des lignées cellulaires de secours ou d'acquérir de nouvelles cultures.Dans certaines situations, des traitements spécialisés ciblant des contaminants spécifiques peuvent aider à restaurer les cultures cellulaires. Le maintien d'une hygiène adéquate, la séparation stricte des équipements et le maintien d'un environnement stérile sont essentiels pour prévenir la contamination et garantir le succès des expériences de culture cellulaire.
| Taper | Nom du produit | Numéro de chat | Spécification |
| Antibactérien | Pénicilline-Streptomycine (100×), Adapté à la culture cellulaire | 60162ES76 | 100 ml |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 g | ||
| Sel de sulfate de gentamicine | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
| Métronidazole | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
| Antifongique | Amphotéricine B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g |
| Nystatine | 60219ES08 | 5 g | |
| 60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
| Détection de mycoplasmes | 40601ES10/20 | 10/20 essais | |
| Kit de détection de mycoplasmes en une étape MycAway™ Plus-Color | 40612ES25/60 | 25/100 T | |
| Élimination des mycoplasmes | MonAway™ Spray (prêt à l'emploi) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 ml |
| MonAway™ Traitement (1000×) - Réactif d'élimination des mycoplasmes | 40607ES03/08 | 1/5 mL | |
| MonAway™ Prophylactique (2000×) - Réactif de prévention des mycoplasmes | 40608ES03/08 | 1/5 mL | |
| 40609ES60 | 100 ml | ||
| 40610ES60 | 100 ml |
Conclusion
L’optimisation des processus de culture cellulaire est essentielle pour produire des résultats fiables et reproductibles.De la sélection des enzymes adaptées à la digestion à la prévention de la contamination, chaque étape du processus de travail est importante. En intégrant des réactifs et des techniques de haute qualité de Yeasen, vous pouvez obtenir des cultures cellulaires plus saines et plus productives, conduisant à des expériences et des résultats de recherche plus réussis.
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