Êtes-vous toujours gêné par la faible efficacité de la recombinaison homologue de fragments multiples ou super longs et par le petit nombre de colonies ?

Toujours pour le support ou le fragment est plus précieux, faible rendement, afin d'économiser les matières premières, l'utilisation d'un petit système de ligature à faible concentration, mais l'efficacité de la ligature est faible et dérangée ?

Produit YEASEN : Amélioration significative, faible concentration, petit système et fragments ultra-longs de l'efficacité de la ligature, taux de clonage positif élevé, vous aident à terminer facilement le ligature.

Comparaison du clonage en une étape avec les méthodes traditionnelles de clonage par restriction enzymatique

Méthode

Préparation des fragments d'insertion

Restriction des sites de restriction

Propriété universelle

Temps de connexion

Taux positif

Technique de clonage recombinant rapide en une seule étape

Étape 1 purification

Aucun

★★★★★

Le temps le plus rapide était de 5 min

Jusqu'à 95%

La technique de digestion par restriction et de clonage par ligature

Étape 2 purification

Oui

★★

passer la nuit

Les différents gènes varient considérablement

Avantage du produit

Orientation: Clonage en une étape de 1 à 7 fragments d'ADN.

Simple : plusieurs fragments peuvent être ligaturés dans un tube.

Rapide : Ligature la plus rapide en 5 min.

Haute efficacité : taux de clonage positif élevé.

Petit système : Le système de ligature total peut être aussi petit que 6 μL.

Surlongueur : supérieure à 25 kb (porteur + longueur du fragment) pour la ligature.

Performance Afficher

  • Recombinaison efficace d'un seul fragment 6 μL petit système

Fig. 1 10 ng de fragments uniques à faible apport ont été ligaturés dans l'état de cellules non réceptives à la réanimation du petit système de 6 μL.Français Les résultats ont montré que le 10923ES avait de meilleures performances que les produits concurrents, avec une efficacité de ligature élevée, plus de colonies et un taux positif de 100 %. AB : plaque de conversion reconstituée. Le rapport molaire du support (10 kb) au fragment d'insertion (1 kb) était de 1:2. C : identification par PCR du fragment d'insertion. M : YEASEN 10505ES. Volume du support : 40 ng/6 μL Système réactionnel, conditions de réaction : 50℃, 15 min.

  • Recombinaison efficace multi-fragment

Fig. 2 Six fragments (7,6 kb) ligaturés. Français Les résultats ont montré que le 10923ES avait de meilleures performances que les produits concurrents, avec plus de colonies et un taux positif de 100 %. AB : plaque de conversion reconstituée. Le rapport molaire du support (11,6 kb) au fragment d'insertion (7,6 kb) était de 1:2. C : identification par PCR du fragment d'insertion. M : YEASEN 10505ES, longueur de PCR 2,6 kb. Volume du support : 200 ng/20 μL Système réactionnel, conditions de réaction : 50℃, 50 min.

  • Recombinaison efficace de fragments multiples à faible concentration

Fig. 3 Ligaturer les fragments à faible concentration cinq et six séparément. Les résultats ont montré que 10923ES présentait une connectivité stable à de faibles concentrations, avec un nombre élevé de bactéries et un taux de positivité de 100 %. AB : plaque de conversion recombinante. CD : image d'électrophorèse d'identification par PCR de fragment d'insertion, M : YEASEN 10505ES, longueur PCR 2,6 kb.

  • Stabilité des réactifs

Fig. 4 Après avoir été placé à 37℃ pendant 7 jours, les résultats ont montré que 10923ES restait stable en liant les cinq et six fragments à de faibles concentrations. AF : plaque de conversion recombinante. GH : image d'électrophorèse d'identification par PCR de fragment d'insertion, M : YEASEN 10505ES, longueur PCR 2,6 kb.

Étude de cas client

  • Réorganisation efficace des petits systèmes

Fig. 5 10923ES a été ligaturé à un seul fragment dans un Système de réaction de petite taille de 10 μL, avec un taux positif de 100 %. A : Plaque de conversion reconstituée. B : Identification par PCR du fragment d'insertion. Taille du support : 5 631 pb ; Taille du fragment cible : 1 384 pb.

Fig. 6 10 μL Petit système de jonction à fragment unique et clone de mutation ponctuelle, taux positif de 100 %. A & C : Plaques de transformation par recombinaison. B : Identification par PCR des fragments d'insertion, les voies 1 à 5 sont la colonie 1, la colonie 2, le contrôle négatif, le contrôle positif (génome comme modèle), le contrôle positif (fragment purifié par PCR comme modèle). D : Électrophorégramme de l'identification par PCR des fragments d'insertion.

  • Recombinaison efficace de fragments courts à faible concentration

Fig. 7 10923ES reliant le fragments à faible concentration. Comparé aux produits concurrents, le nombre de colonies était élevé et le taux positif (10/11) était supérieur à 90,9 %. AB : plaque de conversion reconstituée. C : identification par PCR du fragment d'insertion. Taille du support : 3 000 pb ; taille du fragment cible : 441 pb.

  • Ligature multi-segments efficace et rapide

Figue.8 La ligature à quatre segments 10923ES, la combinaison GC élevée et segment court, par rapport à la marque S, présente un nombre bactérien plus élevé de 10923ES et un taux positif de 100 %. D : Comprimé de conversion recombinante. E : Carte d'identification du séquençage du fragment d'insertion. F : Le séquençage de Sanger a confirmé la connexion réussie entre le vecteur et les fragments, et le séquençage au site de connexion était correct.

Recommandation de produit Strength Star

10923ES Canal de commande

Orientation produit

Nmoi

N° d'art.

Sspécifications

1 à 7 fragments ont été joints en une seule étape et la réaction de recombinaison a été achevée dans les 5 minutes les plus rapides

Clonage de HieffMT Kit de clonage universel II en une étape

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20 T/50 T

Rravi Pproduits

Orientation produit

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N° d'art.

Sspécifications

PCR haute fidélité

2× Hieff CanaceMT Master Mix PCR AdvanceFast (avec colorant)

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Mise à niveau rapide de la PCR, peut être une PCR de colonie et adaptée à l'amplification de modèles complexes

2×HieffMT Mélange maître PCR HotStart Ultra-Rapid II

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Enquête