Avancée technologique de l'ARNm : Yeasen Révèle le secret de la faible toxicité et de la traduction élevée des mutants de l'ARN polymérase T7

Une enzyme conçue pour réduire les effets nocifs L'ARNdb ouvre la voie à des thérapies à base d'ARNm plus sûres

Des chercheurs de Yeasen Biotechnologie et sa filiale Molefuture Biotechnology ont réalisé une avancée décisive dans la technologie de l'ARNm. En concevant ARN polymérase T7 (T7 RNAP), l'équipe a considérablement réduit la génération d'ARN double brin (dsRNA) au cours in vitro transcription in vitro (IVT), offrant une nouvelle approche pour améliorer la sécurité et l'efficacité des vaccins et des thérapies à ARNm. Cette recherche, intitulée «L'ARN polymérase T7 modifiée réduit la formation d'ARNdb en diminuant les activités de la transférase terminale et de l'ARN polymérase dépendante de l'ARN," a été publié dans Le Journal de la FEBS le 3 mars 2024. La percée a été appliquée à Yeasenest récemment lancé ARN polymérase Cleascrip™ T7 de qualité GMP (Cat#10629), validé par plusieurs partenaires de l'industrie de l'ARNm.

Défis et avancées de la frontière Technologie de l'ARNm

La technologie de l'ARNm a suscité un intérêt considérable en raison de son vaste potentiel dans les vaccins, l'immunothérapie du cancer et la thérapie génique. Cependant, les sous-produits d'ARNdb générés par l'ARNm T7 lors de la TVI constituent depuis longtemps un défi persistant pour l'industrie. En tant que facteur immunostimulant, l'ARNdb déclenche des réponses immunitaires innées, inhibe la traduction des protéines et accroît les risques pour la sécurité des produits d'ARNm. Les méthodes traditionnelles reposent sur des procédés de purification complexes pour éliminer l'ARNdb, mais ces approches sont à la fois coûteuses et inefficaces.

YeasenL'équipe de recherche de a résolu ce défi grâce à des méthodes innovantes. En combinant évolution dirigée et conception semi-rationnelleIls ont développé avec succès une série de mutants de l'ARNm T7 hautement efficaces et peu toxiques. Parmi ceux-ci, le mutant combinatoire M17 ont montré des niveaux d'ARNdb de seulement 1,8 % du type sauvage, réduisant considérablement l'immunogénicité tout en améliorant considérablement l'efficacité de la traduction de l'ARNm.

Des technologies innovantes à l'origine de percées dans la recherche

L'équipe de recherche a utilisé la technologie de tri de gouttelettes activées par fluorescence (FADS) combinée à des sondes moléculaires pour réaliser un criblage à très haut débit. Ils ont construit des échantillons aléatoires. bibliothèques de mutants et bibliothèques de mutants à saturation à point unique, identifiant les mutants clés grâce au criblage sur microplaques.

Figure 1 : Criblage à très haut débit via FADS et balise moléculaire

Figure 2 : Variantes mutantes clés identifiées par criblage

Finalement, le mutant M17 optimisé par remaniement de l'ADN a démontré les meilleures performances. Des simulations informatiques et des expériences fonctionnelles ont également révélé que le mutant M17 réduit efficacement la production d'ARNdb en diminuant ARN polymérase dépendante de l'ARN (RDRP) activité et terminale transférase activité.

Figuree 3: M17 Mutant réduit l'ARNdb via des activités RDRP et terminales transférases supprimées

Les résultats de la validation expérimentale ont montré :

• En RAW264.7 cellules, ARNm transcrit par M17 induit interféron bêta (IFN-β) expression à seulement 9,7% du niveau de type sauvage, indiquant une réduction significative de l'immunogénicité.
• Dans les cellules HEK293, le nombre de exprimant l'EGFP les cellules ont augmenté et l'intensité de la fluorescence est restée stable, démontrant une efficacité de traduction nettement améliorée.

Figure 4 : M17 réduit l'immunogénicité dans la PRW264.7 Cellules et améliore la traduction dans les cellules HEK293

Implications profondes pour l'industrie de l'ARNm

Cette avancée marque une étape importante dans le développement de la technologie de l'ARNm. D'ici 2030, le marché de l'ARNm devrait dépasser les 100 milliards de dollars, couvrant les vaccins, les thérapies contre le cancer et les traitements des maladies rares.

Les mutants T7 RNAP développés par Yeasen réduire la génération d'ARNdb à la source, réduisant ainsi les coûts de production et les exigences de purification tout en améliorant la sécurité et l'efficacité des produits d'ARNm.

Un scientifique en chef de l'entreprise a déclaré : «Nos recherches démontrent que prévenir la génération d'ARNdb pendant la phase de transcription est plus efficace que les méthodes de purification traditionnelles. Le mutant M17 établit une nouvelle référence pour la production d'ARNm plus sûrs et plus efficaces, accélérant ainsi la traduction des thérapies à base d'ARNm en applications cliniques.

YeasenLeadership en matière d'innovation

En tant que fournisseur leader de réactifs de biologie moléculaire,Yeasen et Molefuture se concentrent depuis longtemps sur l'ingénierie enzymatique et le développement de technologies IVT. Cette collaboration renforce leur position de leader dans la technologie de l'ARNm. Yeasen a lancé l'ARN polymérase Cleascrip T7 de qualité GMP (Cat#10629), qui réduit considérablement la teneur en ARNdb et est idéale pour le développement de vaccins et de médicaments à ARNm.

Yeasen prévoit d'intégrer ces mutants dans ses kits de réactifs IVT et de collaborer activement avec des développeurs d'ARNm internationaux. Un cofondateur de l'entreprise a déclaré : « Ce n'est qu'un début. Nous continuerons d'optimiser la protéine T7 RNAP afin de proposer des solutions sur mesure répondant à divers besoins thérapeutiques. »

Perspectives d'avenir : le potentiel illimité de la technologie de l'ARNm

Alors que la technologie de l’ARNm s’étend au traitement des maladies chroniques et à la médecine personnalisée, YeasenLes innovations de insufflent un nouvel élan au secteur. En minimisant les risques immunitaires associés à l'ARNdb, les thérapies à ARNm sont en passe d'atteindre des applications cliniques plus larges. Yeasen appelle à une collaboration entre le monde universitaire et l’industrie pour conduire la prochaine phase des percées en matière d’ARNm sur la base de cette recherche.

À propos Yeasen Biotechnologie

Yeasen Biotechnology (Shanghai) est un fournisseur leader de réactifs de biologie moléculaire, d'enzymes et de services personnalisés, dédié à l'avancement de la recherche en sciences de la vie et du développement thérapeutique. Axé sur la qualité, l'innovation et la collaboration avec ses clients, Yeasen aide les scientifiques et les entreprises du monde entier à libérer le potentiel de la biotechnologie.

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Voici les produits représentatifs offerts par YeasenDes tailles supplémentaires sont disponibles.Nos produits sont optimisés pour fonctionner ensemble et garantir des performances et une reproductibilité optimales. Nous proposons également des services personnalisés. Si un produit non présenté vous intéresse, contactez-nous ; nous collaborerons avec vous pour répondre à vos besoins.