L'acide nucléique est la base de toutes les recherches en biologie moléculaire. De plus, la qualité de l'acide nucléique extrait est également l'un des facteurs clés qui déterminent le succès ou l'échec des expériences en aval. Lors du développement de réactifs d'extraction d'acide nucléique, en plus des composants chimiques classiques, certains acides nucléiques ou enzymes à petites molécules peuvent améliorer considérablement l'efficacité de l'extraction ou éliminer l'interférence de substances non ciblées et devenir des composants importants dans l'extraction d'acide nucléique.
Sur les substances auxiliaires pour la précipitation des acides nucléiques
ARN porteur
- Concept et fonction de ARN porteur
L'ARN porteur, également connu sous le nom d'aide à la précipitation des acides nucléiques en chinois. Dans le processus d'extraction des acides nucléiques, les tubes à centrifuger utilisés pour l'extraction sont principalement en polypropylène. Il y a de l'électricité statique sur la paroi du tube, qui adsorbera les acides nucléiques. L'utilisation d'ARN porteur dans le processus d'extraction et de purification peut aider les acides nucléiques à éliminer l'effet électrostatique, garantir que les acides nucléiques peuvent être bien adsorbés sur la colonne de purification, améliorer l'efficacité de l'élution et ainsi obtenir la récupération des acides nucléiques dans l'échantillon autant que possible.
- Types courants d'ARN porteur
En tant que substance auxiliaire pour la précipitation des acides nucléiques, l'ARN porteur a plusieurs types, tels que le sel de potassium PolyA, l'ARN total d'E. coli, l'ARN total de levure, l'ARNt, etc.
- Problèmes courants dans l'utilisation de ARN porteur
L'ARN transporteur peut-il encore être utilisé après avoir été placé à température ambiante pendant un certain temps ? La dégradation de l'ARN transporteur affecte-t-elle son utilisation ? L'ARN transporteur affecte-t-il les expériences en aval ?
L'ARN porteur est dissous dans un agent protecteur d'ARN. L'ARN porteur liquide a peu d'impact lorsqu'il est placé à 37 °C ou à température ambiante pendant une courte période (dans les 7 jours). Essentiellement, l'ARN porteur est un fragment compris entre 500 et 1 000 nt. Une légère dégradation n'affecte pas l'utilisation normale. Pour les applications en aval telles que la PCR quantitative fluorescente, l'ARN porteur n'a aucun effet sur la valeur Ct. Pour les applications en aval telles que le NGS, il peut être ajouté en fonction des besoins réels.
- Présentation du produit ARN porteur
L'ARN porteur de Yeasen est un ARN dérivé de la levure. Il ne contient pas d'enzymes DNase ou RNase résiduelles et la teneur résiduelle en protéines et en ADN est extrêmement faible. Il peut être utilisé dans des expériences telles que l'extraction d'acides nucléiques viraux et l'extraction de traces d'ADN. Les acides nucléiques extraits peuvent être utilisés dans des expériences ultérieures telles que la RT-PCR et la RT-qPCR. Le produit est disponible sous forme de formulations liquides et de poudre lyophilisée pour une utilisation directe pratique, un transport longue distance et un stockage.
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
ARN porteur, 6 μg/μL | 19701ES | 1 mL / 5 mL / 100 mL | Conserver entre -25 et -15 °C. Durée de conservation : 2 ans. |
Poudre d'ARN porteur, 216 μg/tube | 19703ES | 1 tube / 100 tubes / 1000 tubes | Conserver à température ambiante. La durée de conservation est de 2 ans. |
19704ES | 1 tube / 100 tubes / 1000 tubes | Conserver à température ambiante. La durée de conservation est de 2 ans. |
Solution d'acrylamide linéaire
- Concept et fonction d'une solution d'acrylamide linéaire
L'acrylamide linéaire, dont le nom anglais est Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, abrégé en LPA), est un coprécipitant qui aide à précipiter les acides nucléiques pendant le processus de purification des acides nucléiques.
- Caractéristiques de la solution d'acrylamide linéaire
Il s'agit d'un vecteur neutre et d'origine non biologique. Par conséquent, il ne contient pas de contamination potentielle par des acides nucléiques ou des nucléases.
Il n’interférera pas avec les lectures A260/A280 et n’inhibera pas les activités de la polymérase et de l’endonucléase de restriction.
Il est compatible avec d’autres applications ultérieures de biologie moléculaire telles que la PCR et la digestion enzymatique.
Il peut aider à précipiter l'ADN et l'ARN (y compris les oligos) de l'ordre du picogramme ou plus. La longueur du fragment récupérable est supérieure à 20 nucléotides et les acides nucléiques monocaténaires et bicaténaires sont applicables.
- Présentation du produit
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
Solution d'acrylamide linéaire (5 mg/mL) | 10408ES | 1 ml | Stocké à 4 °C. La durée de conservation est de 3 années. |
Enzyme auxiliaire d'extraction d'acide nucléique
ARNase A
- Concept et fonction de la RNase A
La ribonucléase A (RNase A), en tant qu'endoribonucléase, dégrade spécifiquement les résidus de cytosine (C) ou d'uracile (U) sur l'ARN simple brin. L'application la plus courante de la ribonucléase A (RNase A) est l'élimination de l'ARN lors de la préparation de l'ADN plasmidique ou de l'ADN génomique. En outre, ce produit peut également être utilisé dans des expériences de biologie moléculaire telles que les tests de protection par RNase et l'analyse de séquences d'ARN.
- Caractéristiques de la RNase A
La RNase A est dérivée du pancréas bovin. Elle ne présente aucune contamination par l'endo- et l'exonucléase désoxyribonucléase. Elle peut être utilisée directement sans préchauffage et résiste aux environnements à haute température.
- Présentation du produit
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
RNase A (100 mg/mL) | 10406ES | 1 ml | Conserver à -20°C. Durée de conservation : 2 ans. |
RNase A (10 mg/mL) | 10405ES | 1 ml | Conserver à température ambiante.La durée de conservation est de 1 années. |
10407ES | 100 mg/1 g | Conserver à température ambiante. La durée de conservation est de 2 ans. |
Désoxyribonucléase I (DNase I)
La désoxyribonucléase I (DNase I), une endonucléase présente dans diverses cellules et tissus, cible et coupe la liaison phosphodiester adjacente aux pyrimidines, produisant des polynucléotides avec un groupe phosphate à l'extrémité 5' et un groupe hydroxyle à l'extrémité 3'. Le produit de digestion minimum moyen est un polymère tétranucléotidique. La DNase peut catalyser diverses formes d'ADN, telles que l'ADN simple brin, l'ADN double brin et même la chromatine (dont le taux de clivage est affecté par les histones). Dans les expériences de biologie moléculaire, elle est souvent utilisée pour retirer l'ADN des protéines ou pour introduire des entailles dans l'ADN afin d'insérer des bases marquées dans l'ADN.
2. Caractéristiques de la DNase I
La plage de travail optimale de la DNase I est de pH 7-8 et son activité dépend du Ca2+ et peut être activé par des ions métalliques divalents tels que Co2+, Mn2+, Zn2+, etc. 5 mM de Ca2+ peut protéger l'enzyme contre l'hydrolyse. En présence de Mg2+, cette enzyme peut reconnaître et couper de manière aléatoire n'importe quel site sur l'un ou l'autre brin d'ADN ; en présence de Mn2+, il peut reconnaître les deux brins d’ADN simultanément et couper presque au même endroit.
3. Présentation du produit
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
Désoxyribonucléase I (DNase I) du pancréas bovin | 10607ES | 15 KU/10×15KU | Conserver à -20°C. Durée de conservation : 2 ans. |
Désoxyribonucléase I (DNase I) du pancréas bovin | 10608ES | 25 mg/100 mg/1 g | Conserver à -20°C. Durée de conservation : 2 ans. |
Protéinase K
1. Concept et fonction de la protéinase K
La protéinase K (protéinase K) est une sérine protéase possédant une large gamme d'activités de clivage. Son poids moléculaire relatif est d'environ 29,3 kDa et elle peut cliver les liaisons peptidiques carboxyle-terminales des acides aminés aliphatiques et des acides aminés aromatiques. La protéinase K a une large gamme d'applications et peut être utilisée dans des expériences telles que la préparation d'ADN chromosomique pour l'électrophorèse sur gel en champ pulsé, le Western blot et l'élimination des nucléases dans les préparations d'ADN et d'ARN. Des agents dénaturants tels que le SDS (1 %) peuvent augmenter son activité.
2. Caractéristiques de la protéinase K
Dérivé d'une souche de levure génétiquement recombinante.
Sans RNase ni DNase.
Actif et stable dans l'urée et le SDS.
Actif dans une large gamme de pH (pH 4,0 - 12,0), et la gamme de pH optimale est pH 7,5 - 9,0.
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
10401ES | 100 mg/1 g/5 g/100 g | Conserver à 4°C. La durée de conservation est de 3 années. | |
Solution de protéinase K (20 mg/mL) | 10412ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Conserver à 4°C. La durée de conservation est de 2 années. |
Solution de protéinase K (20 mg/mL) | 10410ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Conserver à 4°C. La durée de conservation est de 2 années. |
Stabilisateur d'ARN
Solution stabilisatrice d'ARN pour tissus animaux et végétaux
1. Fonction de la solution stabilisatrice d'ARN pour les tissus animaux et végétaux
Les ARNases sont largement présentes dans l'environnement et sont très susceptibles de dégrader l'ARN dans les échantillons fraîchement collectés de tissus animaux et végétaux, de sang, de liquides organiques, etc. Le stabilisateur tissulaire RNAsafe pour tissus animaux et végétaux (RNAsafe Tissue Stabilizer) est spécialement développé pour stabiliser et protéger l'ARN dans les échantillons collectés. En tant que solution non toxique, elle peut pénétrer rapidement les tissus et inactiver les ARNases endogènes.
2. Caractéristiques de la solution stabilisatrice d'ARN pour les tissus animaux et végétaux
Extrêmement simple à utiliser : il suffit de couper les tissus frais en blocs de tissus de taille appropriée (≤ 0,5 cm) et de les immerger dans 5 à 10 fois le volume de RNAsafe.
Longue période de stabilisation : Les tissus/cellules infiltrés avec RNAsafe peuvent être stockés à 37°C pendant 1 jour, à température ambiante pendant 1 semaine, à 4°C pendant 4 semaines et pour un stockage à long terme à -20°C/-80°C.
Large compatibilité en aval : il est compatible avec presque toutes les méthodes d'isolement d'ARN, telles que le réactif d'extraction d'ARN total HieffTM (numéro de catalogue : 10606ES60), et presque tous les kits d'extraction d'ARN commerciaux, y compris la méthode d'extraction par colonne centrifuge et la méthode de purification par billes magnétiques.
Large application de matériaux : Il peut être utilisé pour la conservation de divers tissus animaux et végétaux (tels que le cerveau, le cœur, le foie, le pancréas, les reins, la rate, les testicules, les muscles, les tiges et les feuilles de plantes, etc.), et également pour la levure, les cellules de culture tissulaire, etc.
3. Présentation du produit
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
Stabilisateur de tissu RNAsafe RNAsafe | 10604ES60 | 100 ml | Conserver à température ambiante. La durée de conservation est de 5 années. |
Produits connexes
Nom du produit | Produit Nombre | Spécification | Conditions de stockage et durée de conservation |
Lysozyme | 10402ES | 5/50 g | Conserver à -20°C. Durée de conservation : 3 années. |
Lyticase (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000 U | Stocké à -20°C. |
Escargot | 10404ES | 5/10 g | Conserver entre 2 et 8 °C. La durée de conservation est de 2 années. |
RNAsafe-ICE | 10605ES | 100 ml | Conserver à température ambiante. La durée de conservation est de 2 années. |