Introduction aux anticorps anti-tag
Les anticorps marqueurs sont utilisés pour la détection et la purification de séquences de marqueurs sur divers vecteurs d'expression commerciaux afin d'analyser et de déterminer les niveaux d'expression et les fonctions des protéines cibles. Le principe qui sous-tend leur utilisation est la réaction antigène-anticorps, où ces anticorps marqueurs peuvent se lier spécifiquement aux protéines fusionnées au marqueur correspondantes. Voici une brève liste de quelques marqueurs protéiques courants pouvant être utilisés avec des anticorps marqueurs :
Tableau 1. Présentation des différentes étiquettes protéiques
| Étiqueter | Séquence | Caractéristiques | Scénarios applicables |
| Drapeau | DYKDDDDK | 1. Faible poids moléculaire, ne modifie pas la fonction de la protéine de fusion, plus hydrophile que les étiquettes similaires ; 2. Contient un site de reconnaissance d'entérokinase (DDDDK), qui est pratique pour la suppression des étiquettes lorsqu'il est fusionné à l'extrémité N de la protéine cible. | Convient à la purification et à la détection de protéines de fusion à faible niveau d'expression dans les systèmes d'expression eucaryotes. |
| HA | YPYDVPDYA | Dérivé de l'antigène de surface hémagglutinine déterminant du virus de la grippe ; éviter de l'utiliser dans les expériences liées aux cellules apoptotiques. | Convient pour la purification et la détection des protéines. |
| Monc | Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu | Dérivé du proto-oncogène humain Myc ; éviter de l'utiliser dans des expériences liées aux cellules humaines. | Généralement non utilisé pour la purification des protéines, convient à la détection. |
Les produits de purification par affinité des anticorps marqueurs Yeasen sont fabriqués à partir d'anticorps monoclonaux IgG de souris de haute qualité comme matières premières. Grâce à un processus appelé « couplage covalent », ces anticorps sont couplés de manière directionnelle et efficace à des matrices d'agarose ou à la surface de billes nano-magnétiques. Cela permet non seulement de réduire la liaison protéique non spécifique, mais également d'obtenir une charge d'anticorps plus élevée sur le milieu. De plus, il fournit des produits de purification d'anticorps marqueurs adaptés à diverses exigences de purification, notamment différentes résines de purification d'anticorps marqueurs et billes immunomagnétiques, facilitant la purification des protéines marquées et les expériences d'immunoprécipitation à l'aide de méthodes manuelles ou automatisées.
Guide de sélection des produits de purification d'anticorps Yeasen Tag
| Série de produits | Série de résines de purification | Série de billes immunomagnétiques | |||||
| Numéro de produit | 20584ES | 20586ES | 20587ES | 20565ES | 20566ES | 20567ES | 20564ES |
| Nom du produit | Perles MagBeads Anti-HA | Perles anti-MycMagBeads | |||||
| Ligands | Anticorps monoclonaux IgG de souris de haute qualité | Anticorps monoclonaux de souris anti-GFP/Flag/HA/Myc de haute qualité | |||||
| Capacité de liaison des protéines | ≥ 1,1 mg de protéine de fusion marquée par un drapeau/ml de gel ≥ 1,5 mg de protéine de fusion marquée HA/ml de gel ≥ 0,9 mg de protéine de fusion marquée Myc/ml de gel | ≥ 0,8 mg de protéine de fusion marquée GFP/mg perles ≥ 0,6 mg de protéine de fusion marquée par un drapeau/billes mg ≥ 0,4 mg de protéine de fusion marquée HA/mg de billes ≥ 0,5 mg de protéine de fusion marquée Myc/mg perles
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| Matrice | Gel d'agarose réticulé à 4 % | Billes magnétiques à base de silice | |||||
| Taille des particules | 45-165 µm | 200 nm | |||||
| Avantages | Faible liaison non spécifique, grande capacité | Haute pureté, haute capacité, haute spécificité, utilisation pratique avec support magnétique | |||||
| Applications recommandées | Purification par affinité de protéines de fusion marquées à n'importe quelle échelle, immunoprécipitation (IP) | Immunoprécipitation (IP), Co-immunoprécipitation (COIP) | |||||
Données de test
1. Test de comparaison de purification du gel d'affinité anti-drapeau Yeasen (20584ES) par rapport à la marque S*.
Figure 1. Test de comparaison des gels anti-drapeaux Yeasen (a) et Brand S* (b) Image du gel
M : Marqueur protéique ; 1 : Lysat pré-colonne des protéines Flag-N, M, C ; 2 : Perméat post-colonne des protéines Flag-N, M, C ; 3 : Élution (élution à pH 2,7) ; 4 : Élution (élution à pH 12)
2. Les flèches dans la figure ci-dessous indiquent les protéines cibles marquées, et les trois bandes de haut en bas après ébullition directe des billes magnétiques sont la BSA, la chaîne lourde de l'anticorps et la chaîne légère de l'anticorps.
Chiffre 2. Purification des protéines marquées par des marqueurs anti-Flag MagBeads
1 : lysat d'E. coli contenant la protéine marquée Flag 10 μL ; 2 : surnageant après incubation du lysat d'E. coli contenant la protéine marquée Flag avec des billes magnétiques 10 μL ; 3 : ébullition directe de la protéine marquée Flag avec des billes magnétiques anti-Flag 10 μL ; 4 : ébullition directe des billes magnétiques anti-Flag ; 5 : marqueur
3.
Chiffre 3. Purification des protéines marquées GFP par des billes MagBeads anti-GFP
1 : lysat d'E. coli contenant une protéine marquée GFP 10 μL ; 2 : surnageant après incubation du lysat d'E. coli contenant une protéine marquée GFP avec des billes magnétiques 10 μL ; 3 : ébullition directe de la protéine marquée GFP avec des billes magnétiques anti-GFP 10 μL ; 4 : ébullition directe des billes magnétiques anti-GFP ; 5 : marqueur
Informations sur le produit
| Nom du produit | Numéro de produit | Spécification |
| 20584ES03/08/25 | 1 mL/5 mL/25 mL | |
| 20586ES03/08/25 | 1 mL/5 mL/25 mL | |
| 20587ES03/08/25 | 1 mL/5 mL/25 mL | |
| 20565ES03/08 | 1 mL/5 mL | |
| Perles MagBeads Anti-HA | 20566ES03/08 | 1 mL/5 mL |
| Perles MagBeads Anti-Myc | 20567ES03/08 | 1 mL/5 mL |
| 20564ES03/08 | 1 mL/5 mL |