Description
Description du produit
La phosphatase alcaline peut éliminer les groupes phosphate 5' de l'ADN et de l'ARN. Elle est couramment utilisée pour empêcher l'auto-ligature des vecteurs. Dans les expériences de clonage moléculaire, l'ADN ligase nécessite la présence de groupes phosphate pour catalyser la ligature de l'ADN. Après digestion avec des enzymes de restriction, les vecteurs conservent un groupe phosphate au site de clivage. Cependant, après déphosphorylation par la phosphatase alcaline, l'extrémité 5' du vecteur est dépourvue de groupe phosphate et ne peut donc pas se connecter à sa propre extrémité 3'. En conséquence, l'auto-ligature du vecteur, qui se produirait autrement de préférence dans la réaction de ligature, est empêchée. Cela augmente le taux d'insertion du fragment cible. De plus, la phosphatase alcaline peut être utilisée pour préparer des modèles d'ADN pour le marquage de l'extrémité 5'.
Ce produit est une phosphatase alcaline dérivée de la crevette qui peut dégrader presque tous les monoesters de phosphate. Cependant, elle ne peut pas hydrolyser les diesters ou les triesters de phosphate. L'enzyme agit sur la déphosphorylation terminale, que les extrémités soient collantes ou émoussées. La SAP peut également être utilisée pour dégrader les dNTP dans les réactions de PCR, ce qui est utile pour le séquençage ultérieur et l'analyse des SNP.
Caractéristiques
- Élimination des groupes phosphates des extrémités de l'ADN et de l'ARN. Prévenir l'auto-ligature des vecteurs.
- Préparation de matrices d'ADN pour le marquage de l'extrémité 5'.
- Dégradation des dNTP dans les réactions PCR.
Applications
- Moléculaire csolitaire
- Séquençage de l'ADN
- Analyse SNP
Composants
| Composants N° | Nom | 10322ES72 |
| 10322-UN | Phosphatase alcaline de crevette (SAP) (1 U/µL) | 250 Tu |
| 10322-B | Tampon SAP 10× | 1 mL |
Caractéristiques
| À partir de Pichia pastoris, le gène de la phosphatase alcaline de crevette a été cloné à partir de Pandalus borealis. | |
| Contrôle de qualité | Sans contamination par la ribonucléase et la désoxyribonucléase. |
| Pureté | ＞95% |
| Inactivation thermique | Incubation à 65 ans°C pendant 5 minutes, cela entraîne une perte d'activité complète et irréversible. |
| Définition de l'unité | La quantité d'enzyme nécessaire pour déphosphoryler 1 μg d'ADN pUC19 digéré avec HindIII (qui produit des surplombs 5') en 30 min à 25°C est défini comme une unité d'activité. |
Stockage
Le les produits doivent être stockés à -25~-15℃ pour 3 années.
Documents:
Fiche de données de sécurité
10322ES-MSDS-HB.PDF
Manuels
10322_Manuel_Ver. FR20250219_FR.pdf
Paiement et sécurité
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Enquête
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FAQ
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