La ribonucléase A (RNase A) est un polypeptide simple brin contenant 4 liaisons disulfures avec un poids moléculaire d'environ 13,7 kDa. La RNase A est une endoribonucléase qui dégrade spécifiquement l'ARN simple brin au niveau des résidus C et U. Français Plus précisément, le clivage reconnaît la liaison phosphodiester formée par le 5'-ribose d'un nucléotide et le groupe phosphate sur le 3'-ribose du nucléotide pyrimidique adjacent, de sorte que les phosphates cycliques 2', 3' sont hydrolysés en phosphates nucléosidiques 3' correspondants (par exemple, pG-pG-pC-pA-pG est clivé par la RNase A pour générer pG-pG-pCp et A-PG). La RNase A est la plus active dans le clivage de l'ARN simple brin. La concentration de travail recommandée est de 1 à 100 μ G/mL, compatible avec divers systèmes de réaction. Une faible concentration en sel (0 à 100 mM NaCl) peut être utilisée pour couper l'ARN simple brin, l'ARN double brin et les chaînes d'ARN formées par hybridation ARN-ADN. Cependant, à une concentration élevée en sel (≥ 0,3 M), la RNase A ne clive spécifiquement que l'ARN simple brin.

La RNase A est couramment utilisée pour éliminer l'ARN lors de la préparation d'ADN plasmidique ou génomique. L'activité de la DNase pendant la préparation peut facilement influencer la réaction. La méthode traditionnelle d'ébullition au bain-marie permet d'inactiver l'activité de la DNase. Ce produit ne contient ni DNase ni protéase et ne nécessite aucun traitement thermique avant utilisation. De plus, il peut également être utilisé dans des expériences de biologie moléculaire telles que l'analyse de la protection par la RNase et l'analyse de séquences d'ARN.

Ce produit est fourni sous forme de solution à une concentration de 100 mg/mL. La concentration de travail recommandée est de 1 à 100 μg/mL, selon le type d'application.

Caractéristiques

Ribonucléase A (RNase A), provenant du pancréas bovin

Activité ≥80 Kunitz U/mg

Non résidu de DNase

Applications

ARNases

Analyse de l'épitranscriptome

Extraction et purification d'ADN génomique

Caractéristiques

Expédition et stockage

Le produit doit être conservé à -25°C ~ -15℃ pendant 2 ans.

Le tampon de conservation était composé de 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4) et de 50 % (V/V) de glycérol.

Chiffres

Échantillon 1 n'a pas de RNase A, échantillon 2 à 4 ont ajouté 1 μl de 100 mg/mL RNase A. Ajoutez ensuite 500 ng d'ARN. Après incubation à température ambiante pendant 5 minutes, ajouter 1 μl de tampon de chargement d'ARN 10X. Charger ensuite tous les échantillons sur un gel d'agarose à 0,8 % pour électrophorèse à 160 V pendant 10 minutes.

Documents:

Fiche de données de sécurité

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

Manuels

10406_Manuel_Ver. HB240703_FR.pdf

Citations et références :

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. L'inhibition du LDHA pour induire la libération d'eEF2 améliore la thrombocytopoïèse. Sang. 2022 ; 139(19) : 2958-2971. doi : 10.1182/blood.2022015620(IF : 23.629)

[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Régulation translationnelle de la réponse des plantes aux températures élevées par une ARNtHis guanylyltransférase à double fonction chez le riz. Mol Plant. 2019 ; 12(8) : 1123-1142. doi : 10.1016/j.molp.2019.04.012(IF : 10.812)