La ribonucléase A (RNase A) est un polypeptide monocaténaire contenant 4 liaisons disulfures et dont le poids moléculaire est d'environ 13,7 kDa. La RNase A est une endoribonucléase qui dégrade spécifiquement l'ARN monocaténaire au niveau des résidus C et U. Plus précisément, le clivage reconnaît la liaison phosphodiester formée par le 5'-ribose d'un nucléotide et le groupe phosphate sur le 3'-ribose du nucléotide pyrimidique adjacent, de sorte que les phosphates cycliques 2', 3' sont hydrolysés en phosphates 3'-nucléosidiques correspondants (par exemple, pG-pG-pC-pA-pG est clivé par la RNase A pour générer pG-pG-pCp et A-PG). La RNase A est la plus active dans le clivage de l'ARN simple brin. La concentration de travail recommandée est de 1 à 100 μ G/mL, compatible avec divers systèmes de réaction. Une faible concentration en sel (0 à 100 mM NaCl) peut être utilisée pour couper l'ARN simple brin, l'ARN double brin et les chaînes d'ARN formées par hybridation ARN-ADN. Cependant, à une concentration élevée en sel (≥ 0,3 M), la RNase A ne clive spécifiquement que l'ARN simple brin.

La RNase A est le plus souvent utilisée pour éliminer l'ARN lors de la préparation de l'ADN plasmidique ou de l'ADN génomique. Le fait que la DNase soit active ou non pendant le processus de préparation peut facilement affecter la réaction. La méthode traditionnelle d'ébullition au bain-marie peut être utilisée pour inactiver l'activité de la DNase. Ce produit ne contient pas de DNase ni de protéase et ne nécessite pas de traitement thermique avant utilisation. De plus, ce produit peut également être utilisé dans des expériences de biologie moléculaire telles que l'analyse de protection de la RNase et l'analyse de séquence d'ARN.

Ce produit est fourni sous forme de solution à une concentration de 100 mg/mL. La concentration de travail recommandée est de 1 à 100 μg/mL, selon le type d'application.

Caractéristiques

Ribonucléase A (RNase A), provenant du pancréas bovin

Activité ≥80 Kunitz U/mg

Non Résidu de DNase

Applications

ARNases

Analyse de l'épitranscriptome

Extraction et purification de l'ADN génomique

Caractéristiques

Expédition et stockage

Le produit doit être conservé entre -25°C et -15℃ pendant 2 ans.

Le tampon de conservation était composé de 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4) et de 50 % (V/V) de glycérol.

Chiffres

Échantillon 1 n'a pas ARNase A,Échantillon 2-4 ont ajouté 1 μl de 100 mg/mL ARNase A. Puis undd 500 ng d'ARN. Après incubation à température ambiante pendant 5 minutes, ajouter 1 µl de tampon de chargement d'ARN 10X. Puis charger tous les échantillons sur un gel d'agarose à pores de milieu à 0,8 % pour l'électrophorèse à 160 V pendant 10 minutes.

Documents:

Fiche de données de sécurité

10406Fiche signalétique ES-MSDS-HB240223.PDF

Manuels

10406_Manuel_Ver. HB240703_FR.pdf

Citations et références :

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. L'inhibition du LDHA pour induire la libération d'eEF2 améliore la thrombocytopoïèse. Sang. 2022 ; 139(19) : 2958-2971. doi : 10.1182/blood.2022015620(IF : 23.629)

[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Régulation translationnelle de la réponse des plantes à une température élevée par une guanylyltransférase à double fonction de l'ARNtHis dans le riz. Mol Plant. 2019 ; 12(8) : 1123-1142. doi : 10.1016/j.molp.2019.04.012(IF : 10.812)