Description
La DNase I est une endonucléase qui peut digérer l'ADN simple brin et double brin pour produire des désoxynucléotides simples ou des oligodésoxynucléotides simple brin ou double brin. Elle peut hydrolyser la liaison phosphodiester pour produire des monodésoxynucléotides et des oligodésoxynucléotides contenant des groupes 5'-phosphate et des groupes 3'-OH. Le produit de digestion moyen est le plus petit polytétranucléotide. La DNase I peut catalyser de nombreuses formes d'ADN, telles que l'ADN simple brin, l'ADN double brin et même la chromatine (son taux de coupure est affecté par les histones). La plage de pH optimale est de 7 à 8. L'activité de la DNase I dépend du Ca2+ et peut être activé par des ions métalliques divalents, tels que Co2+, Mn2+, Zn2+, etc. 5 mM de Ca2+ peut protéger l'enzyme contre l'hydrolyse. En présence de Mg2+, l'enzyme peut reconnaître et couper n'importe quel site sur n'importe quel brin d'ADN de manière aléatoire ; et en présence de Mn2+, il peut reconnaître deux brins d'ADN en même temps et les couper presque au même endroit pour former des extrémités émoussées ou des extrémités collantes avec 1 à 2 nucléotides en saillie. La DNase I est largement utilisée dans la préparation d'ARN sans ADN ; éliminer l'ADN modèle après la transcription in vitro ; préparer l'ARN sans ADN avant les réactions de RT-PCR et de RT-qPCR ; se combiner avec l'ADN polymérase I pour effectuer le marquage de l'ADN par translocation de coupure ; construction d'une bibliothèque de fragmentation de l'ADN.
Ce produit est fabriqué conformément aux exigences du processus GMP et le produit est fourni sous forme liquide.
Fonctionnalité
- Endonucléase spécifique de l'ADN
- Dégrade l'ADN double brin et simple brin
- Les produits sont des oligos courts avec 5'-phosphate et 3'-OH
Application
- Élimination de l'ADN génomique contaminant des échantillons d'ARN
- Dégradation des modèles d'ADN dans les réactions de transcription
Spécification
| Source | Recombinant Escherichia coli avec le gène DNase I |
| Température optimale | 37℃ |
| Mémoire tampon de stockage | 10 mM de Tris-HCl à pH 7,6, 2 mM de CaCl2, 50% (v/v) de glycérol |
| Définition de l'unité | La quantité d'enzyme nécessaire pour dégrader complètement 1 μg d'ADN plasmidique en 10 min à 37°C. (Le tampon de réaction est : 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2,5 mM MgCl2, 0,5 mM de CaCl2, 1 μg d'ADN plasmidique) |
Composants
| Composants N° | Nom | 10611ES76 (500 U) | 10611ES84 (2 000 U) | 10611ES92 (10 000 U) |
| 10611 | Désoxyribonucléase I (DNase I) de qualité GMP (2 U/μL) | 250 μL | 1 ml | 5 ml |
Expédition et stockage
Les produits de qualité GMP à base de désoxyribonucléase I (DNase I) sont expédiés avec de la glace sèche et peuvent être stockés à -15℃ ~ -25℃ pendant un an.
Chiffres
Figure 1. La DNase I de YEASEN pourrait éliminer efficacement le modèle d'ADN pendant la transcription, par rapport aux marques concurrentes.
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14 aggrave les lésions des podocytes et la progression de la glomérulopathie par la régulation négative de Sirt1 dépendante de la N<sup>6</sup>-méthyladénosine. Cell Death Dis. 2021 ; 12(10) : 881. Publié le 27 septembre 2021. doi : 10.1038/s41419-021-04156-y(IF : 8.469)
[2] Yu Y, Wang Y, Zhang W, et al. Substitut biomimétique périoste-os composé d'une matrice dérivée de préostéoblastes et d'un hydrogel pour la réparation de grands défauts osseux segmentaires. Acta Biomater. 2020 ; 113 : 317-327. doi : 10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF : 7.242)
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