La S-adénosyl méthionine (S-adénosyl méthionine, SAM) est un substrat auxiliaire impliqué dans la réaction de transfert de méthyle, qui dans l'organisme est composé d'adénosine triphosphate et de méthionine dans la méthionine adénosyltransférase sous l'action de la synthèse. La SAM est préparée dans une solution de 10 mM HCl, 10 % d'éthanol et pH 4 à 25 ℃. Ce produit est fabriqué selon les exigences du processus GMP et fourni sous forme liquide.

Caractéristiques

• Procédés et méthodes d'analyse validés et spécifiques aux produits
• Stabilité spécifique au produit
• La documentation suit les directives GMP applicables
• Processus de production et matières premières AOF (TSE et BSE)
• Déclaration sur les nitrosamines
• Documents d'appui réglementaire disponibles
• Production à grande échelle

Applications

• Procédé de coiffage enzymatique pour vaccins et produits thérapeutiques à ARNm
• Méthylations enzymatiques de biopolymères

Caractéristiques

Numéro CAS	485-80-3
Formule	C15H23N6O5S+
Poids moléculaire	399,44 g/mol
Pureté (HPLC)	＞ 90%
Contenu	32 mM ± 2 mM
Composition (1X)	10 mM HCl, 10 % éthanol pH 4 à 25℃
Structure

Composants

Expédition et stockage

Le produit est expédié avec de la glace sèche et peut être stocké à -15℃ ~ -25℃ pendant un an.

Chiffres

• Évaluation de la pureté

Figure 1. La pureté (HPLC) du produit SAM pourrait être supérieure à 98 % (Figure 1A) et la pureté optique (ee, %) de l'isoforme (S, S)-SAM pourrait toujours être d'environ 70 % (Figure 1B).

• Détection des résidus enzymatiques

Figure 2. Aucun résidu d’enzyme n’a été détecté par électrophorèse sur gel d’agarose.

Une réaction de 20 µl dans le tampon contenant 500 ng de digestion Hind III de λADN et 2 µl de S-adénosylméthionine (SAM) incubée pendant 4 heures à 37ºC n'entraîne aucune différence par rapport au contrôle (SAM libre dans le système de réaction) par électrophorèse sur gel d'agarose (Figure 2A).Une réaction de 20 µl dans le tampon contenant 500 ng de plasmide pUC19 et 2 µl de S-adénosylméthionine (SAM) incubée pendant 4 heures à 37ºC n'entraîne aucune différence par rapport au contrôle (SAM libre dans le système de réaction) par électrophorèse sur gel d'agarose (Figure 2B).

• Test et vérification fonctionnels

Figure 3 L'efficacité de coiffage de la réaction de coiffage post-transcriptionnelle YEASEN pourrait être proche de 99 %.

Une réaction de 20 µl dans le tampon contenant 1 µg de λDNA, 1 unité de M. SssI (méthyltransférase CpG) et 160 µM de S-adénosylméthionine (SAM) est incubée pendant 1 heure à 37°C. L'ADN résultant est résistant à la digestion avec BstUI comme déterminé par électrophorèse sur gel d'agarose (Figure 3A). 10 µg d'ARN ont été dénaturés par incubation à 65°C pendant 5 min avant le bouchage. Une réaction de bouchage post-transcriptionnelle de 20 µL a été mise en place et incubée à 37°C pendant 2 heures dans une machine PCR. Les transcrits ont été purifiés par des billes magnétiques (Cat#12602). Ensuite, l'efficacité du bouchage est détectée par LC-MS (Figure 3B).