Description
Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester Plus) est un prémix réajusté développé à base de Hifair™ⅢReverse Transcriptase. Par rapport à Hifair™ⅡReverse Transcriptase, Hifair™ⅢReverse Transcriptase présente une stabilité thermique nettement supérieure et peut supporter des températures de réaction allant jusqu'à 60℃, et convient à la transcription inverse de modèles d'ARN avec des structures secondaires complexes. En même temps, l'enzyme améliore l'affinité avec les modèles, ce qui est idéal pour la transcription inverse d'un petit nombre de modèles et de gènes à faible nombre de copies.
Le prémélange contient 5×gDNA Digester Mix et 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus. Le mélange digesteur 5×gDNA peut éliminer la contamination résiduelle de l'ADN génomique dans les modèles d'ARN pour garantir des résultats de suivi plus fiables. 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus contient tous les composants nécessaires à la transcriptase inverse (tampon, dNTP, Hifair™ Ⅲ La transcriptase inverse, l'inhibiteur de RNase, les amorces aléatoires/le mélange d'amorces oligo (dT)18, le modèle d'ARN et l'H2O sans RNase sont ajoutés à la transcription inverse, et le digesteur d'ADNg est arrêté simultanément pour assurer l'intégrité de l'ADNc.
Le produit est adapté à la détection RT-QPCR en deux étapes, spécialement optimisé pour la qPCR, mélange d'amorces aléatoires/oligo (dT)18 optimisé proportionnellement, permettant d'initier la synthèse d'ADNc à partir de toutes les régions de la transcription d'ARN avec la même efficacité de transcription inverse. L'authenticité et la répétabilité des résultats de qPCR sont garanties dans la plus grande mesure. Le produit de transcription inverse est compatible avec la méthode SYBR Green et la méthode de sonde TaqMan qPCR, Hifair™ Mélange maître UNICON™ qPCR SYBR Green, mélange maître Hifair™ qPCR SYBR Green ou Hifair™ Le qPCR TaqMan Probe Master Mix peut être sélectionné en fonction des objectifs expérimentaux et est utilisé en combinaison pour effectuer une analyse d'expression génétique haute performance.
Caractéristiques
- Transcription inverse haute performance
- Augmenter la température de réaction - Le premier brin d'ADNc peut être synthétisé dans une plage de températures de 55 à 60 °C
- Élimination efficace des résidus génomiques
- Large plage de détection linéaire
Applications
- Construction d'une bibliothèque d'ADNc
- Synthèse d'ARN antisens
Caractéristiques
| Type de produit final | ADNc (premier brin) |
| Méthode PCR | RT-PCR |
| Type de réactif | Transcription inverse |
| Type d'échantillon | ARN |
| Température de réaction optimale | 55℃-60℃ |
| Transcriptase inverse | M-MLV |
Composants
| Composants N° | Nom | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100T) |
| 11141-A | H sans RNase2O | 1 ml | 2×1 mL |
| 11141-B | Mélange de digesteur d'ADNg 5× | 30 μL | 300 μL |
| 11141-C | 4×HifairTM Ⅲ SuperMix plus | 50 μL | 500 μL |
Expédition et stockage
Le produit est expédié avec de la glace sèche et peut être stocké à -15℃ ~ -25℃ pendant 18 mois.
Chiffres
Figure 1.Excellente efficacité de transcription inverse, adaptée aux gènes avec différentes abondances d'expression avec différentes teneurs en GC
Figure 2. Plage de dosage linéaire ARN total 10 pg~5 μg
Figure 3. Élimination efficace des résidus génomiques
Cité dans « Une enzyme d'acide nucléique thréose clivant l'ARN capable de discrimination de mutation ponctuelle. Nat Chem. 2022 mars ;14(3) :350-359. doi : 10.1038/s41557-021-00847-3. »
Cité dans « La protéine de répétition tétratricopeptide OsTPR075 favorise l'épiaison en régulant le transport du florigène dans le riz. Plant Cell . 27 septembre 2022 ; 34(10) : 3632-3646. doi : 10.1093/plcell/koac190. »
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