Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix pour qPCR représente une itération améliorée du Hifair™ Ⅲ SuperMix de synthèse d'ADNc 1er brin pour qPCR (gDNA Digester Plus). Il est conçu pour répondre aux exigences de la réalisation de réactions de transcription inverse et d'élimination du génome dans un seul tube. De plus, il rationalise le processus de réaction, réduit considérablement le temps de réaction et augmente le rendement du produit de transcription inverse. Le SuperMix 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT comprend tous les réactifs essentiels pour la réaction de transcription inverse. Pendant la réaction, il vous suffit de le compléter avec le mélange de suppression d'ADNc, l'ARN modèle et l'eau pour synthétiser efficacement le brin initial d'ADNc tout en éliminant simultanément la contamination de l'ADN génomique. Ce produit est bien adapté à la transcription inverse de modèles d'ARN complexes et s'avère très efficace pour la transcription inverse impliquant de faibles quantités de modèles et des gènes à faible nombre de copies.

Le produit de transcription inverse généré par ce produit particulier est entièrement compatible avec les méthodes de qPCR à base de sonde et de colorant. Pour la qPCR à base de sonde, nous recommandons d'utiliser le mélange maître qPCR multiplex Hieff Unicon® Universal TaqMan (réf. 11211), tandis que pour la qPCR à base de colorant, le mélange maître qPCR SYBR Green Hieff UNICON® Universal Blue (réf. 11184) est le choix recommandé pour une analyse d'expression génétique haute performance.

Il est toutefois important de noter que le produit de transcription inverse produit par ce produit ne convient pas aux applications ultérieures telles que l'amplification de longs fragments. Si vous avez besoin d'une transcription inverse efficace à ces fins, nous vous recommandons d'utiliser le kit de synthèse d'ADNc Hifair® AdvanceFast 1st Strand (Cat#11149, Cat#11150).

Caractéristiques

• 5 minutes de RT

• Digestion RT et gDNA intégrée dans un seul tube

Applications

• RT-qPCR
  
• Synthèse d'ARN antisens

Caractéristiques

Composants

Expédition et stockage

Le produit est expédié avec de la glace sèche et peut être stocké à -15℃ ~ -25℃ pendant 12 mois.

Mode d'emploi

Dégel les composants 11151-A/B/C sur de la glace, agitez doucement et mélangez soigneusement chaque composant réactif. Ensuite, assemblez les éléments suivants composants dans un tube sans RNase :

Tableau 1 : Préparation de la réaction

*Nous suggérons de ne pas dépasser 2 μg comme quantité totale d'ARN. En cas de faible expression du gène cible, la quantité totale d'ARN peut être augmentée jusqu'à un maximum de 5 μg.

Tableau 2 : Protocoles de réaction

*Ce processus englobe à la fois la transcription inverse et la digestion de l’ADNg.

Le produit de transcription inverse peut être utilisé immédiatement dans les réactions de qPCR ou peut être stocké à -20 °C pendant une courte durée. Pour un stockage prolongé, nous recommandons de le fractionner en aliquots et de le stocker à -80 °C pour éviter de multiples cycles de congélation-décongélation.

Précautions:

1. Toutes les procédures doivent être effectuées sur de la glace, avec le plus grand soin pour éviter toute contamination par la RNase.

2. Assurez votre sécurité et votre bien-être en portant une blouse de laboratoire et des gants jetables.

3. Ce produit est destiné uniquement à des fins de recherche scientifique et ne doit pas être utilisé à d’autres fins.