Le microARN, une classe d'ARN non codants d'une longueur d'environ 22 nt, est largement concerné et joue un rôle très important dans la régulation de l'expression des gènes chez les plantes et les animaux. Ce kit utilise la méthode de fluorescence chimérique SYBR Green I pour la détection quantitative de la fluorescence du miARN. Le 2×Hieff™ miRNA Universal qPCR Master Mix est une nouvelle génération de réactif de détection PCR quantitative fluorescent pré-mélangé spécialement développé pour la détection quantitative du miARN. Il contient un colorant de référence passif spécial ROX. Adapté à la plupart des instruments qPCR, il n'est pas nécessaire d'ajuster la concentration de ROX sur différents instruments, il suffit d'ajouter des amorces et des modèles dans la préparation du système de réaction qui peut être amplifié. L'ADN polymérase utilise une polymérase activée par la chaleur modifiée chimiquement, combinée à un système tampon spécial, pour rendre la réaction plus spécifique, plus sensible et peut être quantifiée avec précision dans une gamme plus large.
Ce produit est recommandé pour une utilisation avec notre kit de synthèse d'ADNc Hifair™ miRNA 1st Strand (Tailing) (Cat# 11148) pour obtenir des résultats expérimentaux optimaux.

Caractéristiques

• À l'échelle de la plateforme : pas besoin de modifier la concentration de ROX à l'aide de couleurs prémélangées
• Taux de détection de sensibilité élevé : 10 pg d'ADN peuvent être détectés
• Bonnes performances d'amplification : Excellente efficacité d'amplification
• Haute spécificité : capable de distinguer les différences de base unique entre les miRNA d'une même famille

Applications

• Expression génétique

Caractéristiques

Composants

Stockage

Le produit doit être conservé entre -25℃ et -15℃ pendant 1 an.

Chiffres

Figure 1. Bonnes performances d’amplification : excellente efficacité d’amplification.

Les gènes miR-let-7b-5p, miR-let-7c-5p, miR-let-7e-5p et miR-let-7f-5p ont été amplifiés en utilisant des cellules 293T humaines et de l'ARN total du foie de souris comme modèles.Les résultats ont montré que, comparé à des produits similaires, le kit de synthèse d'ADNc 1er brin miRNA Hifair™ (Cat# 11148ES) correspondait au système de réaction du Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix (Cat# 11171ES) avec d'excellentes performances.

Figure 2. Haute spécificité : être capable de distinguer les différences de base unique entre les miRNA d'une même famille.

La famille humaine hsa-let-7 possède plusieurs miRNA, avec peu de bases qui diffèrent les unes des autres, ou même une seule différence de base. Amplifiez ces miRNA avec différentes amorces et utilisez la formule 2- Δ CT x 100 % de taux de correspondance calculé. Les résultats ont montré que les membres de la famille de sous-types étroitement liés pouvaient être efficacement distingués.