Le mélange maître Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR (Low Rox) est une pré-solution pour l'amplification PCR quantitative en temps réel 2×, caractérisée par une intensité de fluorescence élevée, une sensibilité et une spécificité élevées et un rendement d'amplification élevé. Le composant principal, l'ADN polymérase Hieff UNICON™ Taq, est démarré à chaud par la méthode des anticorps, ce qui peut inhiber efficacement l'amplification non spécifique causée par le recuit de l'amorce pendant la préparation de l'échantillon. Dans le même temps, la formule ajoute des facteurs pour améliorer l'efficacité de l'amplification de la réaction PCR et des facilitateurs pour égaliser l'amplification des gènes avec différentes teneurs en GC (30 à 70 %), de sorte que la PCR quantitative puisse obtenir une bonne relation linéaire dans une large gamme de régions quantitatives. Le produit utilise la réaction de changement de couleur mixte de différents colorants pour surveiller l'opération de pipetage, ce qui réduit efficacement l'apparition d'erreurs de pipetage.

Caractéristiques

Suivi du pipetage : Réduisez le risque d'erreurs d'oubli/d'ajout

Excellente amplification : bonne linéarité sur une large plage linéaire

Haute précision : peut distinguer avec précision les modèles avec une différence de concentration de 2 fois

Bonne répétabilité : faible variabilité interpuits dans les puits répliqués, ce qui se traduit par une meilleure répétabilité

Stable et fiable : le système de réaction peut être stocké à température ambiante pendant 24 heures et le produit reste inchangé après 20 cycles de congélation-décongélation

Applications

Analyse des différences d'expression génétique

Analyse quantitative absolue

Caractéristiques

Composants

Expédition et stockage

Ce produit doit être conservé entre -25 et -15 ℃ pendant 1 an.

Chiffres

Figure 1. Des résultats fiables peuvent être obtenus dans la plage dynamique.

En utilisant 2 µL de modèles plasmidiques avec un gradient de 10^1-10^7, les gènes apparentés ont été amplifiés. Hieff UNICON™ Le mélange maître ColorGPS peut détecter efficacement une plage de quantités de modèles de 7 ordres de grandeur, obtenant une bonne linéarité dans une large plage linéaire.

Chiffre2.Peut distinguer avec précision les différences de concentration de modèle de 2 fois.

En utilisant 2 µL de plasmide dilué dans un gradient de 2 fois comme matrice, les gènes apparentés ont été amplifiés. Hieff UNICON™ Le mélange maître ColorGPS peut résoudre avec précision les différences de concentration du modèle.

Chiffre3Une faible variabilité inter-puits est observée, montrant une meilleure répétabilité.

En utilisant des dizaines de copies du plasmide comme modèle, l'amplification a été réalisée avec différents réactifs quantitatifs fluorescents selon les procédures spécifiées dans leurs manuels d'instructions respectifs. Les valeurs d'écart-type indiquent que, par rapport aux autres réactifs de transcription inverse, le nouveau produit présente des différences plus faibles entre les puits répliqués et une meilleure répétabilité.

Chiffre4. Plus flexible, adapté aux procédures standards ou rapides.

Dans la procédure standard, le temps de dénaturation et le temps d'extension sont respectivement fixés à 10 secondes et 30 secondes, tandis que dans la procédure rapide, le temps de dénaturation et le temps d'extension sont respectivement fixés à 3 secondes et 10 secondes, pour détecter les valeurs Ct correspondant à 10 gènes cibles. Les résultats montrent que les valeurs Ct obtenues avec le nouveau produit dans les procédures standard et rapide présentent une forte corrélation, et que le nouveau produit peut obtenir de bons résultats en utilisant la procédure rapide.

Chiffre5Une fois le système réactionnel préparé, il peut rester stable à température ambiante pendant 24 heures.

En utilisant différents gènes de souris, de cellules humaines 293 et ​​d'Arabidopsis thaliana comme cibles, après avoir préparé le système de réaction, celui-ci a été placé dans l'obscurité à différentes températures pendant 24 heures avant la détection. Par rapport au traitement immédiat, la différence de détection pour différents gènes ne dépasse pas 0,5 Ct, ce qui indique que des résultats stables peuvent également être obtenus avec des opérations de longue durée.

Documents:

Manuels

11189_Manuel_Version EN20241218.pdf