Description
CRISPR/Cas9 est une technique dans laquelle la nucléase Cas dirigée par l'ARN permet d'effectuer des modifications spécifiques de l'ADN sur des gènes ciblés, ce qui est un mécanisme de défense immunitaire acquis développé par les bactéries et les archéobactéries en réponse aux attaques de phages et de plasmides étrangers. Dans ce système, la nucléase Cas9 est guidée par un ARN guide simple (sgRNA) optimisé artificiellement pour couper l'ADN double brin (dsADN) au site cible, provoquant ainsi des cassures de l'ADN. L'ADN est réparé par le mécanisme de jonction d'extrémité non homologue ou de réparation dirigée par homologie in vivo, ce qui entraîne une mutation par décalage de cadre, un remplacement ou une suppression de gènes.
Le kit de synthèse d'ARNg de précision HifairTM utilise un mélange d'ARN polymérase T7 pour transcrire efficacement l'ARNg spCas9. Le kit contient une séquence spécifique reconnue par la protéine Cas9 et qui agit comme un échafaudage. Une partie de la séquence peut être partiellement superposée à la séquence spécifique cible conçue par l'utilisateur. Les brins complémentaires sont remplis par l'ADN polymérase pour générer des modèles d'ADNdb pour la transcription. En utilisant son réactif fourni et des séquences d'ADN spécifiques conçues par l'utilisateur, le kit peut obtenir 20 à 100 μg de sgRNA fonctionnel en 4 heures dans une seule réaction en tube.
Caractéristiques
Rendement de synthèse élevé:Dans une réaction en tube unique sur 4 heures, le rendement en sgRNA peut atteindre 20 à 100 μg.
Large gamme d'applications:Des rendements élevés peuvent être obtenus pour différents types de sgRNA.
Haute pureté:L'ARNsg synthétisé possède une seule bande.
Activité élevée:L'ARNsg synthétisé peut guider efficacement Cas9 pour cliver l'ADN cible.
Applications
Édition génétique CRISPR/Cas
Composants
| Composants N° | Nom | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
| 11355-A | Mélange d'enzymes 10×sgRNA | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-B | Tampon de réaction 10×sgRNA | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-C | Mélange d'enzymes Canace 2× | 62,5 μL | 312.5 μL | 625 μL | 1,25 ml |
| 11355-D | Modèle d'échafaudage | 6,25 μL | 31,25 μL | 62,5 μL | 125 μL |
| 11355-F | NTP (25 mM chacun) | 40 μL | 200 μL | 400 μL | 800 μL |
| 11355-F | Contrôle de l'oligo-ARN sg (10 μM) | 2 μL | 10 μL | 20 μL | 40 μL |
Expédition et stockage
Ce produit doit être conservé entre -25 et -15 °C.ouC pour 2 années.
Chiffres
Chiffre 1.Quantité de synthèse de sgRNA à différents moments
Chiffre 2.Le rendement de synthèse de sgRNA avec différentes séquences
Chiffre 3.La pureté du sgRNA synthétisé (déterminée par Agilent 2100)
Chiffre 4.Le graphique d'efficacité de clivage de l'ARNsg
Documents:
Fiche de données de sécurité
11355_FDS_Version EN20250120.pdf
Manuels
11355_Manuel_Ver.FR20240710.pdf
Paiement et sécurité
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Enquête
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FAQ
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