La luciférase de luciole est une protéine d'un poids moléculaire d'environ 61 kDa, qui peut catalyser l'oxydation de la luciférine en oxyluciférine en présence d'ATP, d'ions magnésium et d'oxygène. Elle émet une bioluminescence d'une longueur d'onde d'environ 560 nm. La luciférase de renilla est une protéine d'un poids moléculaire d'environ 36 kDa, qui peut catalyser l'oxydation de la cœlentérazine en cœlentéramide en présence d'oxygène, et émet une longueur d'onde de 480 nm pendant le processus d'oxydation. à propos de la bioluminescence. Les deux bioluminescences peuvent être mesurées par chimioluminescence. Le principe de détection est illustré dans la figure 1 :

Figure 1 : Schéma du test de la luciférase de Firefly et Renilla

En général, le 5´UTR ou le promoteur du gène cible est cloné en amont de la luciférase de luciole, ou le 3´UTR est cloné en aval de la luciférase de luciole, et l'effet de régulation transcriptionnelle du promoteur ou de l'élément régulateur est détecté en détectant la quantité de luciférase de luciole. La luciférase de Renilla a été utilisée comme contrôle interne pour éliminer les différences de nombre de cellules, d'efficacité de transfection, etc. Le kit d'analyse du gène rapporteur de la luciférase double utilise la luciférine comme substrat pour détecter l'activité du gène rapporteur de la luciférase de luciole, puis utilise la coelentérazine comme substrat pour détecter la luciférine de Renilla tout en éteignant la réaction de fluorescence. Activité du gène rapporteur enzymatique. Le kit présente les caractéristiques d'une sensibilité élevée.

Caractéristiques

Capacité de lyse améliorée : capable de lyser complètement la grande majorité des types de cellules.

Signal plus fort : détection précise de l’expression d’un promoteur faible.

Sensibilité plus élevée : détectable jusqu'à 10 à 20 picomoles de molécules de luciférase.

Plage linéaire plus large : la plage de détection linéaire dépasse 8 ordres de grandeur de la concentration enzymatique.

Applications

Vérification des interactions des miRNA avec les 3'UTR des gènes cibles

Vérification des interactions lncRNA-miRNA

Vérification de la régulation des facteurs de transcription dans la région promotrice

Analyse des voies de signalisation

Analyse de l'activité SNP

Caractéristiques

Composants

Expédition et stockage

Les produits du kit d'analyse du gène rapporteur de la double luciférase doivent être conservés à -15℃ ~ -25℃ pour 1 année.

Chiffres

Figure 1. YEASEN (Chat#:11402) a une intensité de fluorescence comparable à celle de Brand P.

Chiffre2. YFACILITER (Chat#: : 11402) Les réactifs de détection interagissent avec la luciférase pour obtenir une intensité de luminescence optimale. Après l'ajout du substrat de luciférase de Renilla, la bioluminescence de la luciférase de luciole est éteinte : elle peut être pratiquement complètement éteinte.

Documents:

Fiche de données de sécurité

11402 MSDS HB220209 FR.PDF

Manuels

11402 Manuel HB241230 FR.pdf

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