Description
HifairMT Kit RT-qPCR Lyo Multiplex en une étape est un kit de PCR quantitative multiplex basé sur l'ARN comme modèle. Au cours de l'expérience, la transcription inverse et la PCR quantitative ont été réalisées dans le même tube, ce qui a simplifié l'opération expérimentale et réduit le risque de contamination. La conception unique du tampon et de l'enzyme garantit qu'il peut être utilisé dans la préparation et la conception de produits de systèmes de réaction lyophilisés RT-qPCR en une étape.
Dans ce kit, le premier brin d'ADNc a été synthétisé efficacement par Hifair résistant à la chaleurMT V Reverse Transcriptase et amplifiée quantitativement par UniconMT ADN polymérase HotStart Taq. Le kit contient principalement de l'ADN polymérase optimisée lyophilisable tampon, mélange d'enzymes, etc. De plus, les facteurs qui peuvent inhiber efficacement l'amplification PCR non spécifique et améliorer l'efficacité d'amplification de plusieurs réactions qPCR sont ajoutés, ce qui peut garantir l'efficacité de l'amplification et réaliser jusqu'à plusieurs réactions d'amplification.
Ce kit est équipé de lyoprotecteur qui peut être utilisé pour la lyophilisation.
Caractéristiques
| Démarrage à chaud | Démarrage à chaud intégré |
| Méthode de détection | Détection par sonde-amorce |
| Méthode PCR | RT-qPCR en une étape |
| Type d'échantillon | ARN |
| Matériel d'application | Équipement avec Rox：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™ Équipement avec faible Rox：ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 et 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex Stratagène MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™ Équipement sans Rox : Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™ Eppendorf Maître du cyclisme® ep réelplex, réelplex 2 s; Qiagen Rotor-gène Corbett® Q, gène du rotor® 3000, Rotor-Gene® 6000 Roche Sciences Appliquées Cycleur de lumière® 480, LightCycler® 2.0, Cycleur de lumière® 96 Thermo Scientifique Vélo PikoReal; Céphéide Vélomoteur intelligent®; Illumina Éco qPCR |
Composants
| Composants N° | Nom | 11831ES60 (100T) | 11831ES80 (1 000 T) | 11831ES92 (10 000 T) |
| 11831-A | 4×HifairMT V Lyo-Tampon | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
| 11831-B | HifairMT Mélange de lyo-enzymes | 100 μL | 1 mL | 10 ml |
| 11831-C | Lyoprotecteur | 800 μL | 8 mL | 80 ml |
Stockage
Partie 1 : 11831-A【4×Hifair Le tampon V Lyo-Buffer doit être stocké à -25℃ ~ -15℃ pour 1 année.
Partie 2 : 11831-B【HifairMT Mélange lyo-enzymatique devrait être stocké à 2℃ ~ 8℃ pour 6 mois.
11831-C【Lyoprotecteur】doit être conservé à -25℃ ~ -15℃ pour 1 année.
Chiffre
Performances des billes
PCR multiplex
Demande de renseignements sur les produits de perles
Instructions
- Réaction Composition
| Composants | Volume (μL) | Concentration finale |
| 4×HifairMT V Lyo-Tampon | 6 | 1× |
| HifairMT Mélange de lyo-enzymes | 1 | - |
| Lyoprotecteur | 8 | - |
| Mélange d'amorces (10 μM) | 1 | 0,1-1 μM |
| Mélange de sondes (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Modèle d'ARN | 5 | - |
| DEPC H2O | à 25 | - |
Remarque : assurez-vous de bien mélanger avant utilisation, évitez les bulles excessives causées par des vibrations violentes.
- Protocole de cyclisme optimisé
|
| Étape de réaction | Température | Temps | Faire du vélo |
| 1 | Transcription inverse | 50°Cun | 10 minutes | 1 |
| 2 | Dénaturation initiale | 95°C | 2 seconde | 1 |
| 3 | Réaction d'amplification | 95°C |
| 45 cycles |
| 60°Cb | 13 secondec |
Remarques
a) Transcription inverse : La température peut être sélectionnée à 42°C ou 50°C pendant 10 à 15 minutes.
b) Réaction d'amplification : La température est ajustée en fonction de la valeur Tm des amorces conçues.
c) Acquisition du signal de fluorescence : veuillez définir la procédure expérimentale conformément aux exigences du manuel de l'instrument.
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Enquête
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