Description
ARN Hieff NGS® Le kit d'amorces de liaison Lib Prep 384 CDI Primer pour Illumina est un kit d'amorces de liaison dédié à la construction de bibliothèques d'ARN de la plate-forme de séquençage à haut débit d'Illumina, divisé en 2 ensembles, chaque ensemble contenant l'adaptateur PE utilisé dans la bibliothèque de séquençage de deuxième génération et 8 amorces d'index i5 et 12 amorces d'index i7. Au total, 16 amorces d'index i5 et 24 amorces d'index i7 sont disponibles en 2 ensembles, ce qui permet de construire 384 combinaisons différentes de bibliothèques à double extrémité marquées par index. Tous les réactifs fournis dans le kit sont soumis à un contrôle qualité rigoureux et à une vérification fonctionnelle afin de maximiser la stabilité et la répétabilité de la construction de la bibliothèque.
Composants
Non. | Nom | Volume |
12414ES02 | Adaptateur PE | 320 μL |
RP 501-508 | 60 μL chacun | |
RP 701-712 | 40 μL chacun | |
12415ES02 | Adaptateur PE | 320 μL |
RP 509-516 | 60 μL chacun | |
RP 713-724 | 40 μL chacun |
Expédition et stockage
Tous les composants sont expédiés avec un emballage sec glace et peut être conservé à -15℃~ -25℃ pendant 18 mois.
Note:
2) L'adaptateur PE fourni avec ce kit est un adaptateur court à usage général qui nécessite une amplification PCR pour obtenir une bibliothèque complète. Index Primer fournit des balises de séquence de code-barres pour distinguer les échantillons lors du séquençage à haut débit.
3) Chaque ensemble de ce kit contient 8 amorces d'index i5 (RP 5xx) et 12 amorces d'index i7 (RP 7xx), qui peuvent être combinées entre elles pour construire 96 combinaisons différentes de bibliothèques étiquetées par index à double extrémité. 2 ensembles offrent un total de 16 de i5 Index Primers et de 24 i7 Index Primers. Vous pouvez utiliser l'i5 Index Primer (ou i7 Index Primer) du Cat#12414 et l'i7 Index Primer (ou i5 Index Primer) du Cat#12415 pour créer jusqu'à 384 combinaisons différentes de bibliothèques étiquetées Index à double extrémité.
4) Ne chauffez pas l'adaptateur, laissez-le se dissoudre lentement à température ambiante, et la température du laboratoire est mieux réglée à 20-25 °C. des adaptateurs sont nécessaires pour éviter les cycles de gel-dégel répétés, et il est recommandé de les stocker en aliquotes et de les conserver à 4°C pendant une courte période.
5) La structure de la bibliothèque de séquençage construite à l'aide du kit Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer pour Illumina® est la suivante :
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6) Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et porter des gants jetables.
7) Ce produit est destiné uniquement à des fins de recherche scientifique !
Instructions
1. Utilisation des adaptateurs : Diluer à une concentration appropriée selon le dosage recommandé pour différentes quantités d'entrée dans le manuel de construction de la bibliothèque utilisé.
2. Utilisation de l'amorce d'index : Préparez le système de réaction conformément au manuel de construction de la bibliothèque chinoise, le système d'amplification de la bibliothèque (comme indiqué dans le tableau ci-dessous), et la procédure de réaction est définie conformément à la procédure du manuel de construction de la bibliothèque.
Nom | Volume (μL) |
2× Mélange PCR ADN haute fidélité | 25 |
RP 5xx | 2.5 |
RP 7xx | 2.5 |
Adaptateur ADN ligaturé | 20 |
Ttotal | 50 |
Informations sur la séquence
Adaptateur PE pour Illumina :
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Primer d'index i5 pour Illumina :
5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[Index i5]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´
Primer d'index i7 pour Illumina :
5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[Index i7]GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-3´
[Index i5]8 pb de i5 Séquence d'index,[Index i7]8 pb de Séquence d'index i7.
Le nom de l'index correspondant à chaque amorce, la séquence d'index contenue dans l'amorce et les informations de séquence d'index correspondantes pendant le séquençage sont indiqués dans le tableau suivant :
I5 jeindice Nom | I5 jeindice séquence | Informations sur la séquence d'index pendant le séquençage | |
NovaSeq 6000 Réactifs v1.0, MiSeq, HiSeq 2000/2500 | NovaSeq 6000 v1.5 réactifs, MiniSeq, NextSeq, | ||
RP501 | TATAGCCT | TATAGCCT | AGGCTATE |
RP502 | ATAGAGGC | ATAGAGGC | GCCTCTAT |
RP503 | CCTATCCT | CCTATCCT | AGGATAGG |
RP504 | GGCTCTGA | GGCTCTGA | TCAGAGCC |
RP505 | AGGCGAAG | AGGCGAAG | CTTCGCCT |
RP506 | TAATCTTA | TAATCTTA | TAAGATTA |
RP507 | CAGGACGT | CAGGACGT | ACGTCCTG |
RP508 | GTACTGAC | GTACTGAC | GTCAGTAC |
RP509 | GACCTGTA | GACCTGTA | TACAGGTC |
RP510 | ATGTAACT | ATGTAACT | AGTTACAT |
RP511 | GTTTCAGA | GTTTCAGA | TCTGAAAC |
RP512 | Cacaggat | Cacaggat | ATCCTGTG |
RP513 | TAGCTGCC | TAGCTGCC | GGCAGCTA |
RP514 | AGCGAATG | AGCGAATG | CATTCGCT |
RP515 | TATGCTGC | TATGCTGC | GCAGCATA |
RP516 | AGAGAGACT | AGAGAGACT | AGTCTTCT |
I7 jeindice Nom | I7 jeindice séquence | Informations sur la séquence d'index pendant le séquençage |
RP701 | CGAGTAAT | ATTACTCG |
RP702 | TCTCCGGA | TCCGGAGA |
RP703 | AATGAGCG | CGCTCATT |
RP704 | GGAATCTC | GAGATTCC |
RP705 | TTCTGAAT | ATTCAGAA |
RP706 | ACGAATTC | GAATTCGT |
RP707 | AGCTTCAG | CTGAAGCT |
RP708 | GCGCATTA | TAATGCGC |
RP709 | CATAGCCG | CGGCTATG |
RP710 | TTCGCGGA | TCCGCGAA |
RP711 | GCGCGAGA | TCTCGCGC |
RP712 | CTATCGCT | AGCGATAG |
RP713 | CCCTACACG | CGTGTAGG |
RP714 | GTAGTGTC | GACACTAC |
RP715 | TGTATGCA | TGCATACA |
RP716 | CCAGACTG | CAGTCTGG |
RP717 | AGGTGCCA | TGGCACCT |
RP718 | TCACCTTG | CAAGGTGA |
RP719 | GTATCTTT | AAAGATAC |
RP720 | CAGCTCCA | TGGAGCTG |
RP721 | TCGCCTTA | TAAGGCGA |
RP722 | CTAGTACG | CGTACTAG |
RP723 | AGCGTAGC | GCTACGCT |
RP724 | GAGCCTCG | CGAGCTC |
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FAQ
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