Description
Npersonne-Tn5 est un recombinant Transposase Tn5 fusionné avec nanobody qui peut se lier spécifiquement avec anticorps primaires provenant de deux espèces différentes (souris et lapin).
Pproduit jeInformations
| Catalogue Non. | 12595ES01/12595ES02/12595ES03 |
| caractéristiques | 10 μL/ 80 μL/ 100 μL |
Produit Composantm
| Composant Non. | Nom du composant | 12595ES01 | 12595ES02 | 12595ES03 |
| 12595-A | Anti-souris Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
| 12595-B | Anti-lapin Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
| 12595-C | Assembler le tampon | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
Expédition et Sstockage
Stocké à -85° ～ -65℃ pour un année.
Chiffres
H3K4me1:
H3K4me3
H3K9me3
H3K27ac
H3K27me3
H3K27me3
Contrôle : pA/G-Tn5 conventionnel, Cut&Tag Multi Cut&Tag : Nanobody Tn5
Instruction
Prenez une bibliothèque de séquençage à haut débit préparation à titre d'exemple, assurez-vous de lire attentivement les instructions avant utilisation.
1. Adaptateur préparation
1) Référence oligo nom et séquence de la plateforme Illumina :
Oligo A-1 : 5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-2 : 5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-3：5'-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo B：5'-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo C : 5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2) Dissoudre le Oligo UN, Oligo Groupe Oligo C à 200 μM.
3) Les systèmes réactionnels suivants sont formulés respectivement :
| composant | Réaction 1 |
| Oligo B (200 μM) | 10 μL |
| Oligo C （200 μM） | 10 μL |
| total | 20 μL |
| composant | Réaction 2 |
| Oligo A-1 ou A-2 ou A-3 (200 μM) | 10 μL |
| Oligo C （200 μM） | 10 μL |
| total | 20 μL |
4) Mélanger les réactions 1 et 2 ensemble, puis centrifuger brièvement pour ramener la solution au fond du tube. Placer dans l'instrument PCR, configurer le programme suivant et l'exécuter : couvercle chaud à 105°C,et ensuite chauffer à 94℃ pendant 2 min. Une fois le temps écoulé, la procédure de réaction a été arrêtée sans ouvrir le couvercle chaud.Le tube PCR a été refroidi naturellement dans l'instrument PCR pendant 2 h, puis placé à 4℃ pendant 5 min.
5) Après la réaction, mélanger les volumes égaux de Raction 1 et Réaction 2. Nommé annonce Adaptateur Mélanger et stocker entre – 25 et – 15℃.
2. pour la génération de transposons
1) Pour configurer le système de réaction suivant :
| composant | volume (μL) |
| Anti-souris Tn5 ou anti-lapin Tn5 | 10 |
| Mélange d'adaptateurs (50 μM) | 0.5 |
| Assembler le tampon | 0,5 |
2) Conditions de réaction : utiliser la pipette pour souffler doucement et bien mélanger. Effectuer le réaction à 25℃ pendant 1 h (couvercle chaud enlevé). Les produits de réaction peut être directement appliqué à la bibliothèque préparation ou stocké à partir de -25 à -15℃.
Remarques
1. La transposase est sensible à la température, il est donc recommandé de compléter le adaptateur intégration dès que possible. Le transposon généré peut être stocké à -25~ -15℃, avec une période de validité d'un an.
2. Ce produit est utilisé uniquement à des fins de recherche scientifique.
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