Description
Exonucléase I, issue d'une plante génétiquement modifiée Escherichia coli La souche exprimant le gène Exo I présente une activité exonucléase qui digère l'ADN monocaténaire de l'extrémité 3' à l'extrémité 5'. Elle libère séquentiellement les désoxyribonucléotides 5'-monophosphates, préservant l'intégrité des dinucléotides 5'-terminaux. Cette enzyme est principalement utilisée pour la dégradation et l'élimination des amorces après l'amplification par PCR. Elle reste inactive vis-à-vis de l'ADN double brin et des brins d'ADN dont les extrémités hydroxyles 3' sont bloquées par phosphorylation ou acétylation.
Caractéristiques
Aucune exonucléase résiduelle (double brin), endonucléase ou RNase
Inactivé en le traitant simplement à 80°C pendant 15 minutes
Applications
Retirez les amorces monocaténaires du système de réaction PCR avant le séquençage de l'ADN Sanger ou l'analyse SNP
Supprimer les amorces monocaténaires du système de réaction PCR imbriquée
Éliminer l'ADN monocaténaire linéaire de l'échantillon, laissant derrière lui l'ADN double brin
Caractéristiques
| Ssource | Escherichia coli |
| Poids moléculaire | 55 KDun |
| Concentration | 20 U/μL |
| Unité Ddéfinition | Une unité est définie comme la quantité d'enzyme nécessaire pour catalyser la libération de 10 nmol de nucléotides solubles dans l'acide à partir d'ADN monocaténaire [3H] à une concentration de 0,17 mg/ml dans une solution de 50 μL système de réaction contenant 1X tampon de réaction d'exonucléase I à 37°C dans les 30 minutes |
Composants
| Composants Non. | Nom | 14535ES80 | 14535ES90 |
| 14535-A | Exonucléase je (20 U/μL) | 250 μL | |
| 14535-B | 10×Exonucléase Tampon de réaction I | 1 ml | 1 ml |
Expédition et stockage
Ce produit doit être conservé entre -25 et -15 °C.°C depuis 2 ans.
Chiffres
Figure 1. Capacité de digestion de l'exonucléase I sur l'ADN simple brin
Remarque : Dans un système de réaction de 20 μL, une concentration finale de 15 pmol/μL de substrat d'ADN simple brin a été ajoutée. Différentes quantités (0,63, 1,25, 2,5, 5, 10, 20 U) d'exonucléase I de Yeasen et du fournisseur A ont été utilisées et incubées à 37 °C pendant 15 minutes, suivies d'une inactivation thermique à 80 °C pendant 15 minutes. L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide a été utilisée pour détecter la dégradation de l'ADN simple brin. Les résultats ont démontré que l'exonucléase I de Yeasen a la même capacité à digérer l'ADN simple brin que le fournisseur A.
Documents:
Fiche de données de sécurité
14535_FDS_Version EN20241210.pdf
Manuels
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