Description
La RNase HII est une enzyme interne de la ribonucléase obtenue à partir de Pyrococcus abyssi et exprimé de manière recombinante dans E. ColiElle reconnaît le double brin ADN-rN-ADN/ADN, coupant au site où les ribonucléotides sont incorporés dans l'ADN. Cependant, son activité sur l'ARN simple brin est très faible et elle ne montre aucune activité de coupe sur l'ADN double brin ou l'ADN simple brin. La RNase HII coupe au site d'un seul résidu de ribonucléotide de l'extrémité 5', produisant un groupe phosphate 5' et une extrémité hydroxyle 3' après la coupe. Cette enzyme RNase HII a une activité optimale à 70~75°C, est active entre 50°C et 75°C, mais a une très faible activité à température ambiante. Le produit est hautement thermostable, avec presque aucune perte d'activité après incubation à 95°C pendant 45 minutes, et est compatible avec divers systèmes de réaction PCR.
Caractéristiques
N° de cat. | 14539ES80/14539ES92 |
Taille | 50 U / 250 U |
Espèces | Pyrococcus abyssi, Pennsylvanie |
Composants
Nom | 14539ES50 (50U) | 14539ES72 (250U) |
RNase HII (2 U/μL) | 25 μL | 125 μL |
Stockage
Ce produit doit être stocké entre -25 et -15 ℃ depuis 2 ans.
Application du produit
- Détection par LAMP avec sondes haute sensibilité.
- PCR dépendante de la RNase HII (rhPCR).
- Élimination des ribonucléotides non appariés formés lors de la réaction en chaîne par polymérase.
- Dégradation de la partie ARN des fragments d'Okazaki.
Remarques
- Ce produit est destiné à la recherche uniquement.
- Veuillez travailler avec des blouses de laboratoire et des gants jetables, pour votre sécurité.
Chiffres
1. E. coli résidu d'ADN génomique < 0,5 copies/100 U
Détection de Escherichia coli Les résidus d'ADN génomique dans différents lots de RNase HII ont montré que le résidu d'ADN génomique de l'hôte de la RNase HII de YEASEN est bien inférieur à 0,5 copie/100 U.
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Fig 4. Détection de Escherichia coli résidu d'ADN génomique
2. Test de résistance à la chaleur à 95°C
Après avoir chauffé la RNase HII à 95°C pendant 0 à 45 minutes, l'activité enzymatique de la RNase HII a été testée. Les résultats ont indiqué qu'il n'y avait presque aucune perte d'activité enzymatique dans la RNase HII de YEASEN même après 45 minutes de chauffage.
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Fig 5. Test de résistance à la chaleur à 95°C
3. Pas d'exonucléase, d'enzyme de coupure ou de résidu d'ARNase (dose de 1 U)
En incubant 1 U de différents lots de RNase HII avec leurs substrats respectifs ADN/ARN à 37°C pendant 4 heures, les résultats de l'électrophorèse sur gel d'agarose ont indiqué qu'il n'y avait pas d'exonucléase, d'enzyme de coupure ou de résidu de RNase dans la RNase HII.
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Fig 6. Détection d'exonucléase, d'enzyme de coupure et de résidu d'ARNase
Documents:
Paiement et sécurité
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Enquête
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