Description
Escherichia coli L'ADN ligase peut catalyser la formation de liaisons phosphodiester entre les extrémités 5'-PO4 et 3'-OH des brins d'ADN adjacents. Elle ne présente quasiment aucune activité détectable pour l'ADN substrat à extrémités franches. Le pH optimal pour cette réaction est de 7,5 à 8,0 (tampon Tris-HCl) et le NAD est nécessaire comme coenzyme. Contrairement à l'ADN ligase T4, qui peut joindre à la fois les extrémités collantes et franches, cette enzyme ne catalyse que la ligature entre les molécules d'ADN à extrémités cohésives. Cependant, en présence de PEG et de concentrations élevées de cations monovalents, elle peut également ligaturer l'ADN à extrémités franches. De plus, ce produit ne peut pas catalyser les ligatures entre l'ADN et l'ARN ou entre les molécules d'ARN. Cette enzyme peut être utilisée pour les réactions de ligature dans la bibliothèque de méthylation NGS et peut également être utilisée dans la méthode d'Okayama-Berg pour le clonage d'ADNc.
Caractéristiques
| Concentration | 60 U/μL |
| Définition de l'unité | Dans un 20 μL système de réaction de ligature, la quantité d'enzyme nécessaire pour ligaturer plus de 90 % of 6 μg d'ADN λ-Fragments de Hind III à 16°C pendant 30 minutes est défini comme une unité d'activité (U) |
Composants
| Nom | 14955ES82 | |
| 14955-A | Escherichia coli ADN ligase (60 U/μL) | 20 μL |
| 14955-B | 10× Escherichia coli Tampon d'ADN ligase | 100 μL |
| 14955-C | 10× BSA (0,05 %) | 100 μL |
Remarque : le BSA doit être protégé des congélations et décongélations répétées. Pour un stockage à court terme, il peut être conservé à 4 ℃.
Expédition et stockage
Les produits doivent être stockés à -25℃ ~ -15℃ pour 1 année.
Documents:
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14955_FDS_Version EN20241210.pdf
Manuels
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