Description
La PBCV DNA Ligase, également connue sous le nom de ligase SplintR, PBCV-1 DNA Ligase ou Chlorella virus DNA Ligase, est une ADN ligase dépendante de l'ATP qui catalyse efficacement la réaction de ligature de deux brins d'ADN adjacents qui sont complémentaires d'un ARN simple brin. Dans ces deux brins d'ADN adjacents, celui fournissant le groupe hydroxyle 3' est appelé brin d'ADN accepteur, tandis que celui fournissant le groupe phosphate 5' est appelé brin d'ADN donneur. Au cours de ce processus de ligature, un brin d'ARN complémentaire agit comme une « attelle » ou un « échafaudage » pour les deux brins d'ADN. L'activité de la PBCV DNA Ligase est beaucoup plus élevée que celle de la T4 DNA Ligase traditionnelle et montre une forte affinité pour les substrats d'ADN avec l'ARN comme attelle (Km apparent = 1 nM, où une valeur Km plus petite indique une affinité plus forte). Il peut détecter des espèces d'ARN uniques au niveau sous-nanomolaire dans des mélanges complexes, ce qui le rend adapté aux processus d'enrichissement de cibles dans des applications telles que la détection d'ARN à haute sensibilité, le séquençage de nouvelle génération et les diagnostics moléculaires.
Caractéristiques
Aucune nucléase, endonucléase, RNase ou phosphatase résiduelle
Applications
Détection de microARN et d'autres petits ARN par la méthode de la sonde
Connexion d'ADN simple brin par fixation par « pince » par des séquences d'ARN complémentaires
Utilisation de sondes ADN pour détecter un ARN spécifique
Détection de SNP ou d'épissage alternatif
Analyse RASL-seq
Caractéristiques
Source | Le gène de l'ADN ligase du PBCV-1 provenant du virus Chlorella exprimé dans E.coli |
Poids moléculaire | 34 KD |
Concentration | 25 U/µL |
Unité Définition | Une unité est définie comme la quantité d'enzyme requise pour atteindre au moins 50 % d'achèvement de la ligature de 2 pmol de substrat hybride ADN:ARN marqué FAM en 15 min à 25°C en 1×Tampon de ligase PBCV |
Inactivation Cconditions | 65°C, 20 min |
Composants
Numéro de composant | Nom | 14962ES80 | 14962ES90 |
14962-A | ADN ligase du virus PBCV (25 U/µL) | 50 µL | 200 µL |
14962-B | 10 x tampon de ligase PBCV | 1 ml | 1 ml |
Expédition et stockage
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