Description
HifairMT Prêt pour Lyo je Kit RT-qPCR multiplexé en une étape（(UDG plus) est un kit de PCR quantitative multiplex basé sur l'ARN comme modèle. Au cours de l'expérience, la transcription inverse et la PCR quantitative ont été réalisées dans le même tube, ce qui a simplifié l'opération expérimentale et réduit le risque de contamination.Le La conception unique du tampon et de l'enzyme garantit qu'il peut être utilisé dans la préparation et la conception de produits de systèmes de réaction lyophilisés RT-qPCR en une étape.
Dans ce kit, le premier brin d'ADNc a été synthétisé efficacement par Hifair résistant à la chaleurMT Transcriptase inverse et amplifiée quantitativement par UniconMT ADN polymérase HotStart Taq. Le kit contient principalement de l'ADN polymérase optimisée ltampon yophilisable, mélange d'enzymes, etc. De plus, les facteurs qui peuvent inhiber efficacement l'amplification PCR non spécifique et améliorer l'efficacité d'amplification de plusieurs réactions qPCR sont ajoutés, ce qui peut garantir l'efficacité de l'amplification et réaliser jusqu'à plusieurs réactions d'amplification.
Ce kit est équipé de lYoprotecteur qui peut être utilisé pour la lyophilisation.
Caractéristiques
| Composants N° | 16645ES60 / 16645ES80 / 16645ES92 |
| Taille | 100 T / 1000 T / 10000 T |
Composants
| Nom | 16645ES60 (100T) | 16645ES80 (1 000 T) | 16645ES92 (10 000 T) | |
| 16645-UN | 4×HifairMT Tampon Lyo | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
| 16645-B | HifairMT Mélange de lyo-enzymes | 100 μL | 1 mL | 10 mL |
| 16645-C | Lyoprotecteur | 800 μL | 8 mL | 80 ml |
Stockage
Le produit doit être conservé à -25℃ ~ -15℃ pendant 1 an. Il faut éviter les congélations et décongélations répétées.
Instructions
1. Composition de la réaction :
| Composants | Volume (μL) | Concentration finale |
| 4×HifairMT Tampon Lyo | 6 | 1× |
| HifairMT Mélange de lyo-enzymes | 1 | - |
| Lyoprotecteur | 8 | - |
| Mélange d'amorces (10 μM) | 1 | |
| Mélange de sondes (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Modèle d'ARN | 5 | - |
| DEPC H2O | à 25 | - |
Note：Assurez-vous de bien mélanger avant utilisation, évitez les bulles excessives causées par des vibrations violentes.
2. Protocole de cyclisme optimisé
(1) Procédure d'amplification standard
| Étape de réaction | Température | Temps | Faire du vélo | |
| 1 | Transcription inverse | 50°Cun | 1 | |
| 2 | Dénaturation initiale | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Réaction d'amplification | 95°C |
| 45 cycles |
| 60°Cb | 30 secondec |
(2) Programme d'amplification rapide
|
| Étape de réaction | Température | Temps | Faire du vélo |
| 1 | Transcription inverse | 50°Cun | 2 min | 1 |
| 2 | Dénaturation initiale | 95°C | 2 seconde | 1 |
| 3 | Réaction d'amplification | 95°C |
| 45 cycles |
| 60°Cb | 13 secondec |
Note:
a) Transcription inverse : La température peut être sélectionnée à 42°C ou 50°C pendant 10 à 15 minutes.
b) Réaction d'amplification : La température est ajustée en fonction de la valeur Tm des amorces conçues.
c) Acquisition du signal de fluorescence : veuillez définir la procédure expérimentale conformément aux exigences du manuel de l'instrument.
3. Application équipement
Équipement avec Rox：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT rapide, StepOne™, StepOne Plus™
Équipement avec faible Rox：ABI 7500, 7500 rapide, ViiA™7, QuantStudio™ 3 et 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Équipement sans Rox：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Sciences Appliquées LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Thermo Cycleur scientifique PikoReal ; Céphéide SmartCycler®; Illumina Éco qPCR
Remarques
Veuillez porter l'EPI nécessaire, comme une blouse de laboratoire et des gants, pour assurer votre santé et votre sécurité !
Veuillez utiliser des consommables sans RNase pour l'expérience.
Ce produit est pour recherche utiliser uniquement！
Procédure de lyophilisation
Ce kit peut être utilisé directement pour la lyophilisation, ou vous pouvez explorer davantage d'excipients pour différents amorces sur cette base.La procédure de lyophilisation standard de ce réactif est la suivante :
| Processus | température | régler l'heure | durée | Vide mbar |
| prélyophilisation | -45℃ | 10 minutes | 60 minutes | —— |
| Étape initiale de lyophilisation | -45 ℃ | 10 minutes | 60 min | 0,01 mbar |
| -40 ℃ | 10 minutes | 900 min | 0,01 mbar | |
| -35 ℃ | 10 minutes | 60 min | 0,01 mbar | |
| -30 ℃ | 20 minutes | 60 min | 0,01 mbar | |
| -20 ℃ | 20 minutes | 60 min | 0,01 mbar | |
| 0 ℃ | 20 minutes | 60 min | 0.01 mbar | |
| test de montée en pression | ||||
| Étape de séchage analytique | 5 ℃ | 10 minutes | 20 minutes | 0,01 mbar |
| 10 ℃ | 10 minutes | 20 minutes | 0,01 mbar | |
| 15 ℃ | 10 minutes | 20 minutes | 0,01 mbar | |
| 20 ℃ | 10 minutes | 20 minutes | 0,01 mbar | |
| 25 ℃ | 10 minutes | 240 min | 0,01 mbar | |
| test de montée en pression | ||||
Paiement et sécurité
Vos informations de paiement sont traitées en toute sécurité. Nous ne stockons pas les détails de la carte de crédit ni accès aux informations de votre carte de crédit.
Enquête
Vous pouvez aussi aimer
FAQ
Le produit est destiné à des fins de recherche uniquement et n'est pas destiné à un usage thérapeutique ou diagnostique chez l'homme ou l'animal. Les produits et le contenu sont protégés par des brevets, des marques déposées et des droits d'auteur appartenant à Yeasen Biotechnology. Les symboles de marque indiquent le pays d'origine, pas nécessairement l'enregistrement dans toutes les régions.
Certaines applications peuvent nécessiter des droits de propriété intellectuelle tiers supplémentaires.
Yeasen se consacre à la science éthique, estimant que nos recherches doivent répondre à des questions cruciales tout en garantissant la sécurité et les normes éthiques.