Hifair™ Le kit de sondes RT-qPCR Universal Multiplex One Step (UDG Plus) de qualité supérieure est un kit de PCR quantitative multiplex basé sur l'ARN comme modèle. Au cours de l'expérience, la transcription inverse et la PCR quantitative ont été réalisées dans le même tube, ce qui a simplifié l'opération expérimentale et réduit le risque de contamination.

Dans ce kit, le premier brin d'ADNc a été synthétisé efficacement par Hifair™ résistant à la chaleur Transcriptase inverse et amplifiée quantitativement par UNICON™ ADN polymérase HotStart Taq. Le kit contient principalement un tampon MP optimisé et un mélange d'enzymes. La solution tampon contient déjà du Mg²⁺ et dNTP Mix. De plus, les facteurs qui peuvent inhiber efficacement l'amplification PCR non spécifique et améliorer l'efficacité d'amplification de multiples réactions qPCR sont ajoutés, ce qui peut garantir l'efficacité de l'amplification et réaliser jusqu'à plusieurs réactions d'amplification. Le système dUTP/UDG a été ajouté pour prévenir efficacement le risque de contamination par aérosol.

Fonctionnalité

Caractéristiques

1. Gbonne polyvalence: Il convient à l'amplification qPCR et à la détection d'acides nucléiques de micro-organismes pathogènes, de génomes humains, de plantes et d'autres espèces.

2. Haute sensibilité: Le système tampon soigneusement optimisé améliore la sensibilité de détection des modèles à faible concentration jusqu'à 250 copies/mL.

3. Système dUP/UDG: Le système antipollution dUTP/UDG thermolabile est introduit pour dégrader efficacement la pollution par aérosol des produits, réduire les faux positifs et garantir des résultats authentiques.

4. Soutiening programme rapide: compatible avec le programme rapide de 40 minutes.

5. Super stabilité : stableet à 37℃ pendant 14 jours, congélation et décongélation répétées 10 fois.

Caractéristiques

Composants

Note: 1) 5×Hifair™ MP Buffer est l'abréviation de Hifair™ Tampon de sonde RT-qPCR multiplex en une étape de qualité supérieure, qui comprend des dNTP, des dUTP et du Mg²⁺, stabilisateurs et plus.

2) Hifair™ Mélange d'enzymes contient principalement Hifair™ transcriptase inverse, UNICON™ Polymères d'ADN HotStart Taq, Inhibiteur de RNase, et UDGase et ainsi de suite.

Stockage

Le produit doit être conservé entre -25℃ et -15℃ pendant 1 an. Il faut éviter les congélations et décongélations répétées.

Instructions

1. Composition de la réaction :

Note：Assurez-vous de bien mélanger avant utilisation, évitez les bulles excessives causées par des vibrations violentes.

un) Concentration de l'amorce : Apprêt mélange comprenant un apprêt multiplex, selon la situation, la concentration optimale de l'amorce peut être comprise entre 0,1 et 1,0 μM.

b) Concentration de la sonde : mélange de sondes comprenant un groupe fluorescent de différence de marquage de sonde multiplex, selon la situation, la concentration optimale de la sonde peut être comprise entre 0,05 et 0.5 µM.

c) Dilution du modèle : la qPCR est très sensible et il est recommandé de diluer le modèle. La valeur Ct du contrôle est adaptée entre 20 et 35.

d) Préparation du système : démonter la tête avec l'élément filtrant. Éviter la contamination croisée et la contamination par aérosol.

2. Protocole de cyclisme optimisé

(1) Procédure d'amplification standard

Note：

a) Transcription inverse : La température peut sélectionner 50°C ou 55°C pendant 10 à 15 minutes.

b) Réaction d'amplification : La température est ajustée en fonction de la valeur Tm des amorces conçues.

c) Acquisition du signal de fluorescence : Veuillez définir la procédure expérimentale en fonction des exigences de la instrument manuel.

(2) Programme d'amplification rapide

Note：Si le détecteur qPCR actuel prend en charge l’amplification rapide, veuillez effectuer un pré-test pour confirmer.

3. Matériel d'application

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 et 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；

Stratagène MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；

Roche Sciences appliquées LightCycler® 480, LightCycler® 2.0 ; Lightcycler® 96；

Thermo Cycleur scientifique PikoReal ; Céphéide SmartCycler®; Illumina Éco qPCR; SLAN 96S, 96P.

Remarques

Veuillez porter l'EPI nécessaire, comme une blouse de laboratoire et des gants, pour assurer votre santé et votre sécurité！

Veuillez utiliser des consommables sans RNase pour l'expérience.

Ce produit est pour recherche utiliser uniquement！