Description
MolPureMT Kit magnétique universel d'ADN/ARN viral est adapté à l'extraction d'acide nucléique viral à partir d'échantillons de sang total ou de fluides corporels acellulaires (tels que le sérum, le plasma, le liquide céphalo-rachidien, l'écouvillon nasal/pharyngé, le liquide de lavage alvéolaire, etc.). Cette méthode adopte la technologie de purification par billes magnétiques, sans extraction toxique au phénol chloroforme, sûre, non toxique et rapide. Les produits résultants peuvent être directement utilisés pour la PCR, la qPCR, le séquençage de deuxième génération et d'autres expériences. Avec l'instrument d'extraction automatique de la méthode des billes magnétiques, l'extraction à haut débit d'acide nucléique peut être réalisée.
Produit IInformations
Catalogue.Non | 18521ES48/18521ES49/18521ES97 |
Tailles |
Composants
Bembouteillé Version
Numéro de composant | Nom du composant | 18521ES48 | |
Partie I | 18521-A | Liquide de liaison de lyse
| 33 ml/bouteille × 1 |
18521-B | Suspension à billes magnétiques
| 1.1 mL/flacon × 1 | |
18521-C | Solution de lavage A | 40 ml/bouteille × 1 | |
18521-D | Solution de lavage B | 80 ml/bouteille × 1 | |
18521-E | Solution d'élution | 10 ml/bouteille × 1 | |
Partie II | 18521-G | Protéase K | 1.1 mL/flacon × 1 |
V préemballéversion
Catégorie | Numéro de composant | Nom du composant | 18521ES49 | 18521ES97 |
Partie Ⅰ | 18521-a | Plaque de liaison de lyse | 1 assiette/boîte | 1 assiette/boîte |
18521-b | Plaque de lavage | 1 assiette/boîte | 1 assiette/boîte | |
18521-c | Lavage + Perles magnétiques Plaque Plaqueplaque | 1 assiette/boîte | 1 assiette/boîte | |
18521-d | Plaque de lavage | 1 assiette/boîte | 1 assiette/boîte | |
18521-f | Plaque d'élution | 1 assiette/boîte | 1 assiette/boîte | |
18521-f | Ensemble de tiges magnétiques | 1 ensemble/boîte | 1 ensemble/boîte | |
Partie II | 18521-G | Protéase K | 1,1 ml/ampoule × 1 | 1.1 mL/ampoule × 2 |
Stockage
Partie I : Conserver à température ambiante, transporter à température ambiante, avec une durée de conservation de 1 an.
Partie II : Pour le composant 18521-G (Protéase K), conserver à 2~8℃, transporter à température ambiante.
Remarques
1.Les différents tampons de ce kit contiennent des sels de guanidinium. Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire
et des gants jetables pendant le fonctionnement. Manipuler conformément aux précautions de sécurité standard pour éviter tout contact avec la peau, les yeux et les muqueuses. En cas de contact, rincer immédiatement et abondamment à l'eau et consulter un médecin.
2.Si une précipitation se produit dans la solution, celle-ci doit être chauffée dans un bain-marie à 30°C jusqu'à ce que le précipité soit
complètement dissous avant utilisation.
3.Si la suspension de billes magnétiques est gelée, ne l’utilisez pas.
4.Les différents tampons de ce kit contiennent des sels de guanidinium. Ne pas traiter avec des désinfectants oxydants tels que
comme l'hypochlorite de sodium, car il peut libérer des gaz toxiques. Ils doivent être traités comme des déchets médicaux.
5.Pendant l'élution, il peut y avoir des billes magnétiques résiduelles. Lors de l'aspiration des échantillons, essayez d'éviter d'inhaler les
perles magnétiques.
Instructions
1. Types d'échantillons applicables : sang total, sérum, plasma, liquide céphalo-rachidien, écouvillons nasaux/pharyngés,
liquide de lavage broncho-alvéolaire et autres échantillons.
2. Stockage et transport des échantillons : Les échantillons peuvent être utilisés immédiatement pour les tests ou stockés à -70 °C ou
Conserver à une température inférieure pour les tests ultérieurs avec une durée de conservation de 6 mois. Éviter les congélations et décongélations répétées. Les échantillons doivent être transportés en utilisant la logistique de la chaîne du froid.
3. Exigences de congélation et de décongélation : Congélation et décongélation rapides pour éviter les cycles répétés.
Étapes de fonctionnement
La solution a été vérifiée pour la précipitation et si les billes magnétiques pouvaient être remises en suspension avant les expériences.
Manuel Eextraction
1. Transférer 200-300 μL de l'échantillon dans un tube à centrifuger de 1,5 mL, ajouter 600 μL de liquide de liaison de lyse,
20 μL de protéase K et 20 μL de suspension de billes magnétiques, puis mélanger au vortex pendant 30 secondes à grande vitesse. Incuber à 50 °C sous agitation pendant 5 à 7 minutes ; si l'incubateur n'a pas de fonction d'agitation, vortexer trois fois pendant l'incubation, chacune pendant 15 secondes.
2. Transférer sur un support magnétique de 1,5 ml pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire et transparente, puis aspirer et jeter la solution.
3. Ajoutez 700 μL de solution de lavage A, vortexez pendant 10 secondes pour disperser les billes magnétiques, puis transférez sur le support magnétique pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire, puis aspirez et jetez la solution.
4. Ajoutez 700 μL de solution de lavage B, vortexez pendant 10 secondes pour disperser les billes magnétiques, puis transférez sur le support magnétique pour séparation magnétique jusqu'à ce que la solution soit claire, puis aspirez et jetez la solution.
5. Répétez l’étape 4 avec 700 μL supplémentaires de solution de lavage B.
6. Centrifuger brièvement pour recueillir les gouttelettes sur la paroi du tube, transférer sur le support magnétique jusqu'à ce qu'elles soient claires, aspirer et éliminer le liquide résiduel. Sécher à l'air libre pendant 3 à 5 minutes.
Remarque : les résidus d'éthanol peuvent inhiber les réactions enzymatiques ultérieures. Veillez donc à ce que l'éthanol s'évapore complètement pendant le séchage. Ne séchez pas trop longtemps pour éviter d'affecter l'élution ultérieure.
7. Ajouter 50 à 100 µL de liquide d'élution, vortexer à grande vitesse pendant 2 à 3 minutes pour disperser les billes magnétiques. Incuber à 60°C pendant 5 minutes, puis vortexer à grande vitesse pendant 60 secondes.
8. Centrifuger brièvement pour recueillir les gouttelettes sur le bouchon du tube dans le tube, transférer sur le support magnétique jusqu'à ce que les billes magnétiques soient complètement adsorbées, puis transférer soigneusement le liquide dans un nouveau tube à centrifuger pour obtenir la solution d'acide nucléique.
9. La solution d'acide nucléique peut être stockée à -20°C à court terme ou à -80°C à long terme.
Automatisé Eextraction
Yeasen Instrument d'extraction et de purification automatique d'acide nucléique AP-96N (pour plus de types d'instruments, veuillez contacter le support technique)
1. Avant l'expérience, pré-emballer le Plaque à trous profonds avec oscillation de force à plusieurs reprises pour éviter les résidus de liquide sur la membrane d'étanchéité. La solution a été vérifiée pour la précipitation et si les billes magnétiques pouvaient être remises en suspension.
2. Placez chaque plaque à 96 puits dans l’instrument d’extraction d’acide nucléique dans l’ordre et placez le manchon de tige magnétique à 96 trous de profondeur.
Position 1 : couper la plaque de liaison
Position 2 : planche de rinçage
Position 3 : lavage + plaque à billes magnétiques
Position 4 : plaque de lavage
Position 6 : plaque d'élution
3. Ajoutez 200 à 300 µL de l’échantillon et 20 µL de protéase K dans les puits de la plaque de liaison de lyse.
4. Exécutez la procédure suivante. Après la procédure, transférez l'éluat de la plaque d'élution dans un nouveau tube à centrifuger. La solution peut être placée à -20 ℃ pour un stockage à court terme et à -80 ℃ pour un stockage à long terme.
Programme d'instrument d'extraction d'acide nucléique du canal AP-96N
Sétape | Étape 1 | Étape 2 | Étape 3 | Étape 4 | Étape 5 | Étape 6 | Étape 7 |
Station | 3 | 1 | 2 | 3 | 4 | 6 | 3 |
Temps d'attente | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:00:00 | 00:01:00 | 00:00:00 |
M 2 | M 2 | M 2 | M 2 | M 2 | M1 | M 2 | |
00:00:30 | 00:05:00 | 00:01:00 | 00:00:30 | 00:00:30 | 00:05:00 | 00:00:30 | |
Pause | refuser | refuser | refuser | refuser | refuser | refuser | refuser |
Le temps magnétique | 00:01:00 | 00:03:00 | 00:01:00 | 00:01:00 | 00:01:00 | 00:03:00 | 00:00:00 |
Volume | 800 | 900 | 800 | 800 | 800 | 100 | 800 |
Ttempérature | -- | 50℃ | -- | -- | -- | 90℃ | -- |
| |||||||
Mode de mixage | M 1 | Le temps de mélange était de 10 s, avec une vitesse de mélange de 300 000 | |||||
Mode de mixage | M 2 | Le temps de mélange était de 10 s, avec une vitesse de mélange de 200 000 |
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